[논문]신규 건강기능식품소재 'EGCG 고함유 녹차추출물(EGTE)'의 장기안정성 평가

천세인; 허은지; 윤민지; 최상운; 류건식; 유시용

신규 건강기능식품소재 'EGCG 고함유 녹차추출물(EGTE)'의 장기안정성 평가
Evaluation for Long-term Stability of EGCG Rich Green Tea Extract (EGTE) 원문보기

생약학회지, v.49 no.4, 2018년, pp.328 - 335

천세인 ((주)알앤오식품) , 허은지 ((주)알앤오식품) , 윤민지 ((주)알앤오식품) , 최상운 (한국화학연구원) , 류건식 ((주)알앤오식품) , 유시용 (충남대학교 신약전문대학원)

Abstract ▼ AI-Helper

'EGCG(epigallocatechin gallate) rich Green Tea extract(EGTE)' was prepared by a convenient chromatographical manner using water and alcohol which was regarded as the most suitable and appropriate process for food manufacturing. The EGCG content in EGTE was estimated above 97%. Analysis of polyphenol components in green tea, i.e., catechin(C), epigallocatechin(EGC), epicatechin(EC), epigallocatechin gallate(EGCG), epicatechin gallate(ECG) and caffeine was performed by HPLC. The optimized HPLC method exhibited a good linearity of calibration curve, accuracy and precision. The long-term stability evaluation of EGTE was carried out with a powdered formulation and solution formulation by estimating the color change and measuring the EGCG content by HPLC analysis for one year. The EGCG content of the powdered EGTE stored in a transparent bottle at room temperature was retained over 97% at the end of the experimental period. The EGCG content of 0.1% water solution of EGTE stored in a transparent bottle at RT were observed to decrease below 30%, whereas that stored at $2^{\circ}C$ retained over 70%, respectively. These results suggested that a powdered formulation could be recommended for the commercialized nutraceutical product of EGTE rather than a solution formulation.

주제어

표/그림 (7)

그림 Fig. 1. Representative ingredients of green tea, five catechins and caffeine.
표 Table I. HPLC running condition for representative tea catechins and tea extract
그림 Fig. 2. HPLC chromatogram of a) standard 5 catechins and caffeine in green tea and of b) whole extract of green tea and c) EGTE.
그림 Fig. 3. Change of EGCG content (%) in EGTE powder according to the storage period.
표 Table II. Validation of HPLC method for quantitative analysis of EGCG
그림 Fig. 4. Color change of EGTE solutions according to the storage period.
그림 Fig. 5. Change of EGCG content (%) in EGTE solution according to the storage period.

AI 본문요약
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문제 정의

HPLC 분석조건 및 타당성 검증(Validation) − 신규 건강기능식품 소재 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’의 품질평가시험법 및 표준화 공정에 활용할 수 있는 새로운 HPLC 분석법을 개발하고 아울러 HPLC 분석방법의 분석적합도 및 타당성 평가를 위한 validation 연구를 수행하였다.
이를 위하여 우선적으로 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)을 서로 다른 실험조건(온도, 차광유무 등)에 장기간 노출시킨 후 안정성의 변화를 조사 분석함으로써 가장 적합한 보관조건 및 최종제품의 제형을 도출하고자 본 연구를 수행하였다.

제안 방법

‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 검체의 안전성 평가 − 추출 및 가공공정 중 유기용매를 사용하지 않고 물과 주정만을 사용하는 간편 chromatography 방법에 따라 녹차추출물을 정제하여 caffeine은 전혀 함유되지 아니하고 녹차의 대표 카테킨 성분으로 알려진 EGCG(epigallocatechin gallate) 성분이 97% 이상으로 함유된 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE: epigallocatechin gallate-rich green tea extract)을 개발하였으며 이를 소재로 활용하여 다양한 건강기능식품의 개발을 시도하였다.
‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 검체의 조제 및 안전성 평가 − ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 시료의 안정성평가는 분말상 시료 및 0.1% 수용액시료로 나누어 실시하였다.
‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)을 서로 다른 실험조건(온도, 차광유무 등)에 1 년간에 걸쳐 노출시킨 후 색도 및 EGCG 함량의 경시변화를 조사 분석하였다.
EGCG 표준품과 함께 caffeine 및 (+)-catechin(C), (−)-epigallocatechin(EGC), (−)-epicatechin(EC), (−)-epigallocatechin gallate(EGCG), (−)-gallocatechin gallate(GCG) 및 (−)-epicatechin gallate(ECG) 표준품 용액을 Zhu등18)의 방법에 따라 조제한 후 전술한 방법에 따라 HPLC를 실시하여 타당성검증을 실시하였다.
HPLC 분석조건 및 타당성 검증(Validation) − 신규 건강기능식품 소재 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’의 품질평가시험법 및 표준화 공정에 활용할 수 있는 새로운 HPLC 분석법을 개발하고 아울러 HPLC 분석방법의 분석적합도 및 타당성 평가를 위한 validation 연구를 수행하였다. HPLC 분석법은 EGCG를 포함한 EG, EGC, ECG 등 주요 녹차 catechin 성분들을 동시 정량할 수 있는 간편한 HPLC 분석방법으로서 Zhu 등¹⁸⁾의 방법을 일부 수정하여 사용하였다. Validation 연구로는 특이성(specificity), 검량선의 직선성(linearity), 일내정밀성(intra-day precision), 일간정밀성(inter-day precision),정확성(accuracy), 최소정량한계(LOQ) 및 최소검출한계(LOD) 등을 재검토함으로써 분석방법의 타당성 및 시스템 적합성을 판단하였다.
HPLC 분석법은 EGCG를 포함한 EG, EGC, ECG 등 주요 녹차 catechin 성분들을 동시 정량할 수 있는 간편한 HPLC 분석방법으로서 Zhu 등¹⁸⁾의 방법을 일부 수정하여 사용하였다. Validation 연구로는 특이성(specificity), 검량선의 직선성(linearity), 일내정밀성(intra-day precision), 일간정밀성(inter-day precision),정확성(accuracy), 최소정량한계(LOQ) 및 최소검출한계(LOD) 등을 재검토함으로써 분석방법의 타당성 및 시스템 적합성을 판단하였다.
1% 표준용액을 투명용기에 4 ml씩 분주하여서 실온에 보관한 RL군, 동량의 표준용액 시료를 갈색용기에 분주 후 실온에 보관한 RD군, 갈색용기에 분주 후 냉장보관한 CD군으로 나누었다. 각 실험그룹의 안정성평가는 수용액의 색변화(갈변) 및 평가 당일 HPLC 분석으로 측정한 EGCG의 함량을 지표로 설정하여 진행하였다. 또, ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 시료 100 mg과 vitamin C(ascorbic acid) 50 mg를 섞은 후 증류수 100 ml에 녹여 vitamin C 첨가 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 0.
또 각 농도의 표준액을 30분 간격으로 4회 반복 측정한 후 피크의 면적비(peak area)와 retention time을 각각 측정하였으며 이들 값의 상대표준 편차(RSD) 값을 산출하여 일내(intra-day) 정밀도(precision)를 구하였다. 같은 요령으로 각 농도의 표준액을 3일 간격으로 반복 측정하여 일간(inter-day) 정밀도(precision)를 구하였다. 또 분석법의 정확성(accuracy) 판정을 위하여 농도(0.
005% 농도 순으로 표준액을 각각 조제한 후 각 농도별 피크의 면적비를 산출하고, 이를 바탕으로 검량선을 작성하였으며 검량선의 회귀방정식과 상관계수(R²)를 구하였다. 또 각 농도의 표준액을 30분 간격으로 4회 반복 측정한 후 피크의 면적비(peak area)와 retention time을 각각 측정하였으며 이들 값의 상대표준 편차(RSD) 값을 산출하여 일내(intra-day) 정밀도(precision)를 구하였다. 같은 요령으로 각 농도의 표준액을 3일 간격으로 반복 측정하여 일간(inter-day) 정밀도(precision)를 구하였다.
005%)별로 조제한 검체를 4회 반복 측정하고 peak area와 retention time의 평균값(mean) ±표준편차(SD)를 구하였다. 또 통상적인 방법에 따라 signalto noise 비율(S/N ratio)를 바탕으로 검출한계(limit of detection, LOD)와 검량한계(limit of quantification, LOQ)를 산출하였다. EGCG 표준품과 함께 caffeine 및 (+)-catechin(C), (−)-epigallocatechin(EGC), (−)-epicatechin(EC), (−)-epigallocatechin gallate(EGCG), (−)-gallocatechin gallate(GCG) 및 (−)-epicatechin gallate(ECG) 표준품 용액을 Zhu등¹⁸⁾의 방법에 따라 조제한 후 전술한 방법에 따라 HPLC를 실시하여 타당성검증을 실시하였다.
또, ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 시료 100 mg과 vitamin C(ascorbic acid) 50 mg를 섞은 후 증류수 100 ml에 녹여 vitamin C 첨가 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 0.1% 표준용액을 조제하였다.
1% 수용액시료로 나누어 실시하였다. 분말상 시료는 투명용기 및 갈색용기에 나누어 담은 후 각각 실온, 냉장(2oC) 및 냉동(-20^oC)조건에서 보관하고 해당 평가일에 0.1% 수용액을 조제한 후 HPLC 분석법에 따라 EGCG의 함량을 측정하였다.
수용액상 시료를 대상으로 한 실험군은 보관조건에 따라 RL, RD, CD, VRL, VRD 및 VCD 등 총 6개의 군으로 나누었으며 각 군은 동일한 두 개의 검체를 사용하여 duplicate로 구성하였으며 측정치의 평균값을 구하였다. ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 시료 100 mg을 증류수 100 ml에 녹여 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 0.
45 mmHV, Durapore®)로 여과한 후 기기에 주입하였다. 이동상으로는 0.1% acetic acid(A)와 acetonotrile(B)의 혼합액을 1.0 ml/min의 유속으로 용출시켰으며 용출용매의 acetonotrile의 농도를 0분 10% B, 12분 15% B, 25분 30% B와 같이 기울기용리방식에 따라 실시하였다. 분석시 시료 주입량은100 µl로 하였으며, Oven(AT-4000 Column Oven, Futecs)의 온도는 35oC로 유지하였다.
‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)을 서로 다른 실험조건(온도, 차광유무 등)에 1 년간에 걸쳐 노출시킨 후 색도 및 EGCG 함량의 경시변화를 조사 분석하였다. 이를 위하여 EGCG를 포함한 EC, EGC, ECG 등 녹차의 주요 catechin 성분 및 caffeine 성분을 동시 정량할 수 있는 간편한 HPLC 분석방법을 개발하였으며 검량선의 직선성(linearity), 특이성(specificity), 일내정밀성(intra-day precision), 일간정밀성(inter-day precision), 정확성(accuracy), 최소정량한계(LOQ) 및 최소검출한계(LOD) 등을 검토하여 분석법의 validation 연구를 수행하였다.
이를 위하여 우선 ‘EGCG 고함유 녹차 추출물’을 서로 다른 실험조건(온도, 차광유무 등)에 1년에 걸쳐 노출시킨 후 색도의 변화 및 EGCG의 함량을 지표로 하여 안정성의 변화를 조사분석하였다.
이후 Diaion HP-20 column을 증류수로 수회 세척한 후 10% 주정, 20% 주정, 30% 주정 순으로 단계적으로 용출시켰으며 기존에 보고된16,17) 방법에 따라 Diaion HP-20 column chromatography를 반복하여 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 1.2 g을 얻었다.
이후 이 vitamin C 첨가 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 0.1% 표준용액을 투명용기에 4 ml씩 분주하여서 실온에 보관한 VRL군,동량의 표준용액 시료를 갈색용기에 분주 후 실온에 보관한 VRD군, 갈색용기에 분주 후 냉장보관한 VCD군으로 나누어 실험을 진행하였다.
99이상으로 양호한 직선성을 나타내었으며, 일내정밀성(intra-day precision)은 9%이하, 일간정밀성(inter-day precision)은 10% 이하, 정확성(accuracy)은 95-105%로 나타나 모든 항목에서 양호한 시스템 적합성를 보여주었다. 한편 본 연구에서 중점적으로 분석하고자 하는 EGCG 성분에 대하여 피크면적값(peak area)은 물론 retention time에 대한 일내정밀성(intra-day precision), 일간정밀성(inter-day precision), 정확성(accuracy) 등을 재검토하였다.

대상 데이터

HPLC 분석에 사용한 caffeine 및 (+)-catechin (C), (−)-epigallocatechin(EGC), (−)-epicatechin(EC), (−)-epigallocatechin gallate(EGCG), (−)-gallocatechin gallate(GCG), (−)-epicatechin gallate(ECG)표준품 및 ascorbic acid (vitamin C)는 Sigma-Aldrich (MI,USA)사에서 구입하였다.
HPLC 분석에 사용한 caffeine 및 (+)-catechin (C), (−)-epigallocatechin(EGC), (−)-epicatechin(EC), (−)-epigallocatechin gallate(EGCG), (−)-gallocatechin gallate(GCG), (−)-epicatechin gallate(ECG)표준품 및 ascorbic acid (vitamin C)는 Sigma-Aldrich (MI,USA)사에서 구입하였다. HPLC용 용매는 J.T Baker(water, MeOH) 및 Tedia(acetonitrile)제품을 사용하였다.
녹차 물추출물 및 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’의 조제 − 실험에 사용한 건조녹차는 2016년, 전남 보성산을 구매하여 시료로 사용하였으며 표준시료는 ㈜알앤오식품에 보관되어있다.
시약 및 분석기기 − HPLC는 Futecs HPLC system(NS3000i integrated HPLC System, AT-4000 Column Oven, Korea) 및 INNO column C18(4.6×250 mm, 5 µm)(영진바이오크롬, Korea)을 사용하였다.
자외부흡광광도검출기(Model500, Chrom Tech®)를 사용하였으며 검출파장은 280 nm로 정하였다.

데이터처리

또 HPLC분석법의 정확성(accuracy) 평가를 위하여 시료를 농도(0.04%, 0.02%, 0.01%, 0.005%)별로 조제한 후,각 농도별 검체를 4회 반복 측정하고 각 농도별 검체의 피크면적값(peak area)과 retention time의 mean ± 표준편차(SD)를 구하였다.
또 분석법의 정확성(accuracy) 판정을 위하여 농도(0.04%, 0.02%, 0.01%, 0.005%)별로 조제한 검체를 4회 반복 측정하고 peak area와 retention time의 평균값(mean) ±표준편차(SD)를 구하였다.
분석법 타당성 검증(Validation) − EGCG 표준품을 증류수에 녹여 0.04%, 0.02%, 0.01%, 0.005% 농도 순으로 표준액을 각각 조제한 후 각 농도별 피크의 면적비를 산출하고, 이를 바탕으로 검량선을 작성하였으며 검량선의 회귀방정식과 상관계수(R²)를 구하였다.

성능/효과

0.04% 수용액의 retention time은 100 ±0.53, 피크면적값(peak area)는 100 ± 0.63, 0.02% 수용액의 retention time은 100 ± 0.82, 피크면적값(peak area)는 100 ±0.65, 0.01% 수용액의 retention time은 100 ± 0.91, 피크면적값(peak area)는 100 ± 1.98, 및 0.005% 수용액의 retention time은 100 ± 0.34, peak area는 100 ± 0.93으로 산출 되어,표준편차는 모두 1.0 이하의 값을 나타내었다.
EGCG and 6. ECG.

EGCG를 포함한 EG, EGC, ECG 등 주요 녹차 catechin 성분들을 모두 Zhu 등¹⁸⁾이 보고한 바와 같이 검량선의 상관계수는 모두 0.99이상으로 양호한 직선성을 나타내었으며, 일내정밀성(intra-day precision)은 9%이하, 일간정밀성(inter-day precision)은 10% 이하, 정확성(accuracy)은 95-105%로 나타나 모든 항목에서 양호한 시스템 적합성를 보여주었다. 한편 본 연구에서 중점적으로 분석하고자 하는 EGCG 성분에 대하여 피크면적값(peak area)은 물론 retention time에 대한 일내정밀성(intra-day precision), 일간정밀성(inter-day precision), 정확성(accuracy) 등을 재검토하였다.
3). EGCG의 함량 역시 VRL군이 RL군에 비하여 서서히 감소되고 있음이 관찰되었고 특히 RD군에 비하여 VRD군은 EGCG의 함량감소가 유의적으로 지연됨을 관찰할 수 있었다. 그러나 갈색용기에 분주 후 냉장보관한 CD군과 VCD군의 경우에는 두 군 간의 EGCG 함량감소에 있어서 유의적인 차이를 관찰할 수 없었다.
투명용기에 담은 후 실온에 보관한 경우 3주 경과 시점부터 육안으로 갈변현상을 관찰되었으며 1년 경과시점에서 EGCG의 함량이 30% 이하로 감소되었고 이러한 현상은 갈색용기에 담은 후 실온에 보관한 실험그룹의 경우에도 동일하게 나타났다. 갈색용기에 분주 후 냉장 보관한 경우에는 실험개시 후 1년 경과시에도 EGCG의 함량의 70% 이상의 수준을 유지하고 있어 안전성의 유지를 위하여 보관용기의 차광유무보다는 보관온도가 중요한 요인임을 알 수 있었다. 또 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액의 안정성을 높여줄 목적으로 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액에 vitamin C를 추가하여 보관할 경우 실온 보관조건에서는 안정성이 어느 정도 향상되었음이 관찰되었으나 그 효과는 미미하다고 사료된다.
그러나 갈색용기에 분주 후 냉장 보관한 CD군의 경우에는 EGCG의 함량감소가 서서히 진행되었으며 실험개시후 1년 경과시점에도 초기 EGCG의 함량의 70% 이상의 수준을 유지하고 있어 보관온도조건이 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액의 안정성유지에 보다 큰 영향을 미치고 있음을 알 수 있었다.
녹차표준품 EGCG 시료를 0.005%, 0.01%, 0.02%, 0.04% 등 농도별로 조제한 후, HPLC 분석을 실시하여 얻어진 각 농도별 피크면적값(peak area)을 산출하고, 이를 바탕으로 작성한 검량선의 회귀방정식은 y = 27424.21x + 20229.75으로 계산되었으며, 상관계수(R²)는 0.9998로 산출되어 우수한 직선성을 나타내었다.
녹차표준품 시료의 retention time과 동일한 위치에서 간섭피크의 유무를 관찰한 결과 EGCG를 포함한 EG, EGC, ECG 등 주요 녹차 catechin 및 caffeine의 피크들은 모두 정량분석에 충분한 형상을 나타내었으며, 분석물질과 동일한 retention time에서 간섭피크가 전혀 나타나지 않아 우수한 특이성을 나타내었다(Fig. 2)
3). 또 EGCG의 함량도 서서히 감소하여 3주 경과시에는 50%이하로 감소되었으며 실험개시후 1년 경과시점에서는 초기 EGCG의 함량의 30% 정도만 유지되고 있음을 관찰하였다(Fig. 4).
9998로 산출되어 우수한 직선성을 나타내었다. 또 각 농도별 시료를 30분 간격으로 4회 반복측정하고 retention time 및 피크면적값(peakarea)의 평균값 및 상대표준편차(RSD) 값을 구하여 본 결과 0.04% 수용액의 경우 retention time의 상대표준편차(RSD)는 1.06으로 나타났으며 피크면적값(peak area)의 상대표준 편차는 1.26으로 각각 산출되어 우수한 일내정밀성을 보여주었다. 또, 0.
26으로 각각 산출되어 우수한 일내정밀성을 보여주었다. 또, 0.02% 수용액, 0.01% 수용액, 0.005% 수용액의 경우에도 retention time의 상대표준편차는 1.65, 1.81, 0.68으로 각각 산출되었으며 피크면적값(peak area) 역시 상대표준편차가 각각 1.30, 3.95 및 1.87으로 산출되어 우수한 일내정밀성을 나타내었다. 또, 동일시료를 사용하여 1일 간격으로 3회 반복 측정한 일간정밀성 실험 역시 0.
0 이하의 값을 나타내었다. 또, signal to noise 비율(S/N ratio)이 각각 3배(LOD)와 10배(LOQ)되는 농도로 검출한계(limit of detection, LOD)와 검량한계(limit of quantification, LOQ)를 구하여본 결과 검출한계(LOD)는 2-4 ppm, 검량한계(LOQ)는 6-12 ppm의 값을 나타내었다(Table II).
또, 갈색용기에 담은 후 실온에 보관한 RD군의 경우에도 3주 경과시 EGCG의 함량이 50% 수준으로 감소되었으며 RL군의 경우와 마찬가지로 실험개시 후 1년 경과시점에서는 초기 EGCG의 함량의 30% 미만정도만 유지되고 있어‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액을 실온에서 보관할 경우 용기의 차광여부에 따른 안정성의 변화는 미미한 수준이라고 판단할 수 있었다.
87으로 산출되어 우수한 일내정밀성을 나타내었다. 또, 동일시료를 사용하여 1일 간격으로 3회 반복 측정한 일간정밀성 실험 역시 0.04% 수용액의 경우 retention time의 상대표준편차가 1.84로 나타났으며 피크면적값(peak area)도 상대표준편차 3.26으로 우수한 정밀성을 보여주었다. 이하 0.
분말상 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 시료의 경우 보관조건에 상관없이 보관후 1년이 경과한 시점에서도 EGCG의 함량감소 현상이 관찰되지 않았으며 수용액상 시료의 경우에는 보관조건에 따라 안정성의 변화가 큰 차이를 보여주었다.
우선 투명용기 및 갈색용기에 담은 후 각각 실온, 냉장 및 냉동조건에서 보관한 분말상 시료의 경우 HPLC 분석법에 따라 각 해당실험일에 EGCG의 함량을 측정한 결과 실험개시 1년이 경과한 시점에서도 EGCG의 함량변화가 관찰되지 않았으며 이러한 결과는 모든 보관조건에서 동일하게관찰되었다(Fig. 3).
26으로 우수한 정밀성을 보여주었다. 이하 0.02% 수용액, 0.01% 수용액, 0.005% 수용액의 경우 retention time 및 피크면적값(peak area)의 상대표준편차는 각각 3.16, 1.83, 0.41 및 2.37,4.22 및 4.12으로 산출되어 우수한 일간정밀성을 나타내었다. 또 HPLC분석법의 정확성(accuracy) 평가를 위하여 시료를 농도(0.
분말상 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE) 시료의 경우 보관조건에 상관없이 보관후 1년이 경과한 시점에서도 EGCG의 함량감소 현상이 관찰되지 않았으며 수용액상 시료의 경우에는 보관조건에 따라 안정성의 변화가 큰 차이를 보여주었다. 투명용기에 담은 후 실온에 보관한 경우 3주 경과 시점부터 육안으로 갈변현상을 관찰되었으며 1년 경과시점에서 EGCG의 함량이 30% 이하로 감소되었고 이러한 현상은 갈색용기에 담은 후 실온에 보관한 실험그룹의 경우에도 동일하게 나타났다. 갈색용기에 분주 후 냉장 보관한 경우에는 실험개시 후 1년 경과시에도 EGCG의 함량의 70% 이상의 수준을 유지하고 있어 안전성의 유지를 위하여 보관용기의 차광유무보다는 보관온도가 중요한 요인임을 알 수 있었다.
한편 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액의 안정성을 높여줄 목적으로 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액에 vitamin C를 추가한 후 동일한 실험조건에서 보관한 VRL, VRD 및 VCD군의 경우vitamin C를 추가하지 아니하고 동일한 실험조건에서 보관한 RL, RD 및 CD군과 상호비교하여 볼 때 VRL군의 경우 RL군에 비하여 색도의 변화가 비교적 서서히 진행됨이 관찰되었다(Fig. 3).
한편 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)을 본 HPLC방법에 따라 분석한 결과 EGCG의 함량은 EGTE 전체량의 97% 이상으로 측정되었으며 그외 ECG, EC, EGC, GCG 등의 존재가 미량이나마 확인되고 있지만 이들 성분들은 EGTE 전체량의 3% 이내를 점유하고 있었으며 caffeine 성분은 검출되지 않아 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)은 식품의약품안전처(KFDA)에서 규정한 고시형 건강기능식품의 규격조건에 잘 부합되고 있음을 확인하였다(Fig. 2).

후속연구

따라서 본 소재 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)은 보관 중에 함량 손실이 쉽게 발생될 수 있는 액상제제보다는 보다 우수한 안정성을 보여주는 캡슐제, 정제, 스틱제 등 분말상의 제형으로 개발되어야 하리라 사료된다.
또 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액의 안정성을 높여줄 목적으로 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’ 수용액에 vitamin C를 추가하여 보관할 경우 실온 보관조건에서는 안정성이 어느 정도 향상되었음이 관찰되었으나 그 효과는 미미하다고 사료된다. 또, 이상의 연구결과는 추후 신규건강 기능식품소재 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)의 제품제형연구에 유용한 자료로 활용될 수 있으리라 기대된다.
이와 같은 연구결과를 종합하여 볼때 신규건강기능식품 소재 ‘EGCG 고함유 녹차추출물’(EGTE)은 액상제제로 개발될 경우 비록 냉장보관 시에는 1년 후에도 70% 이상으로 유효성분이 유지될 수는 있으나 제품의 생산, 유통, 보관과정 중에 더 많은 함량손실이 예측되고 있어 상업적 제품에는 적합한 제형이 될 수 없으리라 예측된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	녹차나무의 원산지는 어디인가?	녹차나무 혹은 차나무(Camellia sinensis L)는 차나무과(Theaceae) 동백나무속(Camellia)에 속하는 다년생 상록관목으로 우리나라를 비롯하여 일본, 중국, 만주, 인도 등지에 널리 분포하고 있으며 예로부터 중국 등 동북아시아지역에서 널리 재배되고 있다. 원산지는 중국 쓰촨성과 티베트 경계의 산악지대 일대로 알려져 있으며, 국내에서는 신라 시대에 당나라로부터 씨앗이 도입되어 지리산 일대에 최초로 식재되었다고 보고되고 있다. 이와 같은 연유로 현재 보성군, 하동군을 둘러싼 지리산 일대에 대단위 차재배지가 조성되어 있다.
	녹차나무 혹은 차나무의 특징은 무엇인가?	녹차나무 혹은 차나무(Camellia sinensis L)는 차나무과(Theaceae) 동백나무속(Camellia)에 속하는 다년생 상록관목으로 우리나라를 비롯하여 일본, 중국, 만주, 인도 등지에 널리 분포하고 있으며 예로부터 중국 등 동북아시아지역에서 널리 재배되고 있다. 원산지는 중국 쓰촨성과 티베트 경계의 산악지대 일대로 알려져 있으며, 국내에서는 신라 시대에 당나라로부터 씨앗이 도입되어 지리산 일대에 최초로 식재되었다고 보고되고 있다.
	녹차 추출물의 효능은 무엇인가?	최근에는 국민소득의 증가와 더불어 녹차의 각종 생체조절기능성 및 약리학적 효능들이 속속 발표됨에 따라 녹차에 대한 인식이 종래의 기호음료에서 건강기능성식품으로 전환되고 있는 실정이다. 실제로 우리나라 식품의약품안전처(KFDA)에서도 녹차 추출물을 항산화 효과, 체지방 감소, 체내 콜레스테롤 개선 등을 주목적으로 하는 건강기능식품의 원료로 인정하고 있으며 현재 다수의 기업에서 녹차추출물을 가공한 건강기능식품들이 출시되고 있다. 이러한 영향으로 국내의 녹차 소비량는 크게 증가되고 있으며 녹차의 성분연구를 비롯하여 다양한 생리활성조절기능 및 약리효능에 대한 연구가 광범위하게 이루어지고 있다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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