[논문]키토산 섬유를 담체로 이용한 라이소자임 효소의 고정화

이소희

doi:10.5764/tcf.2018.30.4.264

키토산 섬유를 담체로 이용한 라이소자임 효소의 고정화
Immobilization of Lysozyme from Hen Egg by Crosslinking Method onto Chitosan Non-woven 원문보기

韓國染色加工學會誌 = Textile coloration and finishing, v.30 no.4, 2018년, pp.264 - 274

Abstract ▼ AI-Helper

Immobilization of lysozyme on chitosan non-woven using glutaraldehyde(GA) was investigated. For this, 100 % chitosan non-woven was prepared as novel support for the enzyme immobilization. In addition, free lysozyme activity was examined depending on various pH and temperature by measuring time. Moreover, the optimum immobilization conditions depending on various pH, temperature, immobilization time and lysozyme concentration was evaluated. In addition, thermal stability and storage stability of immobilized lysozyme were measured. The characteristics of immobilized lysozyme was examined by FT-IR, surface morphology, and MTT assay. The results are follows: the optimal immobilization of lysozyme were pH 7.0, $25^{\circ}C$, lysozyme concentration 1.5 mg/ml, immobilization time 240 min. The immobilized lysozyme showed higher thermal stability than the free trypsin. The immobilized lysozyme activity was retained 80 % of its initial activity at $4^{\circ}C$ over 30 days of storage. The lysozyme was immobilized effectively on chitosan non-woven by observation of surface morphology.

주제어

표/그림 (14)

표 Table 1. Characteristics of chitosan non-woven
표 Table 2. Properties of enzyme
그림 Figure 1. The effects of pH on the free lysozyme activity depending on time.
그림 Figure 2. The effect of temperature on the free lysozyme activity depending on time.
그림 Figure 3. The effects of pH on the immobilized lysozyme activity.
그림 Figure 4. The effects of temperature on the immobilized lysozyme activity.
그림 Figure 5.The effects of immobilization time on the immobilized lysozyme activity.
그림 Figure 7. The thermal stabilities of immobilized lysozyme.
그림 Figure 6. The effects of lysozyme concentration on the immobilized lysozyme activity.
그림 Figure 8.Storage stabilities of immobilized lysozyme.
그림 Figure 9. Antimicrobial effects of the lysozyme immobilized chitosan non-woven.
그림 Figure 10. Cell viability of the chitosan non-woven.
그림 Figure 11. FT-IR spectrometer of chitosan non-woven.
그림 Figure 12. FE-SEM analysis of the chitosan non-woven.

AI 본문요약
AI-Helper

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문제 정의

본 연구는 생채재료용 텍스타일 분야의 창상치료제로 사용하기 위한 목적으로 글루타알데하이드를 이용한 공유결합을 통해 키토산 섬유를 담체로 하여 라이소자임을 고정화하였다. 이를 위하여 난백에서 추출한 라이소자임을 사용하여 다양한 온도 및 시간의 조건에서 자유 라이소자임의 활성을 측정하였다.
넷째, 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포의 분광학적 특성 변화, 표면 변화 및 세포독성 등의 변화를 측정하였다. 이를 통해, 라이소자임이 고정화된 창상치료용 부직포를 개발하고자 한다.
이에 본 연구에서는 생채재료용 텍스타일 분야의 창상치료제로 사용하기 위한 목적으로 글루타알데하이드를 이용한 공유결합을 통해 키토산섬유를 담체로 하여 라이소자임을 고정화하는 방법을 연구하고자 한다. 이를 위하여 난백에서 추출한 라이소자임을 사용하였다.

제안 방법

cells/well이 되게 24-well plate에 seeding 하였다. Seeding 후 16-18시간이 지나 80% confluent 하게 자라면 배지를 제거한 후, 준비된 시료를 각각 0.5ml 씩 처리하였다. 그 후 인큐베이터(37±1℃, 5±1% CO₂)에서 48시간 배양하였고, 세포의 상태를 현미경으로 관찰하였다.
0) 변화에 따른 라이소자임의 효소 활성 결과이다. 고정화 시, 용액의 pH 조건을 변수로 하여 각 pH 별로 고정화를 완료하였으며, 최적의 고정화 용액의 pH는 고정화가 완료된 후에 라이소자임이 고정화된 키토산 담체를 회수한 후, 잔여용액에 라이소자임의 기질을 삽입하여 흡광도를 측정하였다. Figure 3에 나타난 바와 같이, 라이소자임의 활성은 pH 7.
고정화 시, 용액의 온도는 효소적 활성에 영향을 미치는 중요한 요인³⁶⁾으로 일반적으로 37℃의 온도 범위에서 효소적 활성이 우수하며, 온도가 일정 온도이상으로 증가함에 따라 효소의 사활로 인하여 효소 활성은 정지된다. 고정화 시, 용액의 온도변화에 따라 고정화를 실시하였으며, 고정화가 완료된 후에 고정화된 담체를 회수한 다음, 잔여용액 내 존재하는 효소와 기질의 반응을 통해 최적의 온도 조건을 평가하였다.
또한 라이소자임의 고정화 시, pH, 고정화 온도, 라이소자임의 농도 및 시간 조건 변화에 따른 최적 고정화 조건을 설정하였다. 고정화된 라이소자임의 온도안정성, 저장안정성을 평가하고, 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포의 분광학적 특성 변화, 표면 변화 및 세포독성 등의 변화를 측정하였다.
그 후 인큐베이터(37±1℃, 5±1% CO2)에서 48시간 배양하였고, 세포의 상태를 현미경으로 관찰하였다.
글루타알데하이드가 가교된 키토산 부직포에 라이소자임을 고정화하였다. 라이소자임의 고정화는 글루타알데하이드 가교된 키토산 부직포를 액비 1:50, 25mM의 버퍼용액에 넣고, pH 4.
셋째, 고정화된 라이소자임의 온도안정성, 저장안정성을 평가하였다. 넷째, 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포의 분광학적 특성 변화, 표면 변화 및 세포독성 등의 변화를 측정하였다. 이를 통해, 라이소자임이 고정화된 창상치료용 부직포를 개발하고자 한다.
연구내용으로 첫째, 다양한 온도 및 시간의 조건에서 자유 라이소자임의 활성을 측정하였다. 둘째, 고정화 시, pH, 고정화 온도, 라이소자임의 농도 및 시간 조건변화에 따라 라이소자임의 활성을 측정하여 최적 고정화 조건을 평가하였다. 셋째, 고정화된 라이소자임의 온도안정성, 저장안정성을 평가하였다.
이를 위하여 난백에서 추출한 라이소자임을 사용하여 다양한 온도 및 시간의 조건에서 자유 라이소자임의 활성을 측정하였다. 또한 라이소자임의 고정화 시, pH, 고정화 온도, 라이소자임의 농도 및 시간 조건 변화에 따른 최적 고정화 조건을 설정하였다. 고정화된 라이소자임의 온도안정성, 저장안정성을 평가하고, 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포의 분광학적 특성 변화, 표면 변화 및 세포독성 등의 변화를 측정하였다.
0mg/ml, 고정화 시간 10~1440분으로 변화시켜 항온진탕수조에서 110rpm으로 처리하였다. 라이소자임 고정화된 키토산 부직포의 활성은 증류수로 잔여효소가 검출되지 않을 때까지 여러 번 수세한 후, M. lysodeikticus를 기질로 하여 450nm에서의 초기흡광도 값으로 계산하였다.
글루타알데하이드가 가교된 키토산 부직포에 라이소자임을 고정화하였다. 라이소자임의 고정화는 글루타알데하이드 가교된 키토산 부직포를 액비 1:50, 25mM의 버퍼용액에 넣고, pH 4.0~10.0, 고정화 온도 25~65℃, 라이소자임 농도 0.1~5.0mg/ml, 고정화 시간 10~1440분으로 변화시켜 항온진탕수조에서 110rpm으로 처리하였다. 라이소자임 고정화된 키토산 부직포의 활성은 증류수로 잔여효소가 검출되지 않을 때까지 여러 번 수세한 후, M.
라이소자임의 활성분석은 M. lysodeikticus 9mg을 0.1M, pH 7.0의 인산버퍼 30ml에 용해시킨 후, 용해된 기질 용액 2.9ml에 라이소자임 용액 0.1ml를 첨가한 후, 상온에서 5분간 인큐베이팅하여 측정하였다^33,34).
라이소자임의 활성은 UV-Vis spectrophotometer(M-3100, Scinco. Ltd., Korea)를 사용하여 450nm에서 기질의 흡광도 변화량 측정을 통해 계산하였다.
미처리, 가교처리 및 고정화된 키토산 부직포 표면의 분광학적 분석은 적외선 분광광도계(FT-IR, FT-IR 670, Jasco Inc., USA)를 이용하여 비교·관찰하였다.
미처리, 가교처리 및 고정화된 키토산 부직포의 표면 형태는 주사 전자 현미경(JSM-7600F, JEOL KOREA LTD., Japan)을 사용하여 비교, 관찰하였다.
둘째, 고정화 시, pH, 고정화 온도, 라이소자임의 농도 및 시간 조건변화에 따라 라이소자임의 활성을 측정하여 최적 고정화 조건을 평가하였다. 셋째, 고정화된 라이소자임의 온도안정성, 저장안정성을 평가하였다. 넷째, 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포의 분광학적 특성 변화, 표면 변화 및 세포독성 등의 변화를 측정하였다.
연구내용으로 첫째, 다양한 온도 및 시간의 조건에서 자유 라이소자임의 활성을 측정하였다. 둘째, 고정화 시, pH, 고정화 온도, 라이소자임의 농도 및 시간 조건변화에 따라 라이소자임의 활성을 측정하여 최적 고정화 조건을 평가하였다.
Figure 7은 라이소자임이 고정화 된 키토산 부직포의 온도에 따른 안정성 결과이다. 온도에 따른 안정성은 고정화 된 키토산 부직포를 일정한 온도에서 처리 시, 시간에 따른 활성 감소변화를 통해 측정하였다. Figure 7에 나타난 바와 같이, 고정화가 잘 되는 30-50℃의 온도에서는 시간이 경과하여도 뚜렷한 활성 감소는 관찰되지 않았다.
본 연구는 생채재료용 텍스타일 분야의 창상치료제로 사용하기 위한 목적으로 글루타알데하이드를 이용한 공유결합을 통해 키토산 섬유를 담체로 하여 라이소자임을 고정화하였다. 이를 위하여 난백에서 추출한 라이소자임을 사용하여 다양한 온도 및 시간의 조건에서 자유 라이소자임의 활성을 측정하였다. 또한 라이소자임의 고정화 시, pH, 고정화 온도, 라이소자임의 농도 및 시간 조건 변화에 따른 최적 고정화 조건을 설정하였다.
자유 라이소자임의 pH 및 온도에 따른 영향은 라이소자임 1.0mg/ml를 pH 4.0~10.0, 온도 25~60℃로 조건을 변화시켜 60분 동안 측정하였다.
자유 및 고정화된 라이소자임의 온도안정성은 30~60℃의 범위 내에서 자유 라이소자임 0.5mg/ml, 혹은 라이소자임 0.5mg/ml이 고정화된 키토산 부직포 0.15g을 온도에 따라 처리 시, 시간에 따른 활성 변화로 평가하였다. 저장 안정성은 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포를 4℃에서 30일간 보관한 후, 5일 간격으로 고정화된 라이소자임의 활성 변화를 통해 평가하였다.
15g을 온도에 따라 처리 시, 시간에 따른 활성 변화로 평가하였다. 저장 안정성은 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포를 4℃에서 30일간 보관한 후, 5일 간격으로 고정화된 라이소자임의 활성 변화를 통해 평가하였다.
처리한 5시간 후 배지를 모두 제거하고 DMSO 500μl로 crystal을 녹인 후 96-well plate에 100μl씩 옮겨 담아 490nm에서 흡광도를 측정하였다.
이는 키토산과 라이소자임의 다지점 공유결합의 형성에 의해 효소 분자가 높은 온도에서도 활성이 유지되기 때문으로, 더 높아진 온도에서도 훨씬 안정적으로 반응한 것으로 보인다³³⁾. 최적의 고정화 시간은 고정화 시, 고정화 시간변화에 따라 고정화를 실시하였으며, 일정 시간동안 고정화를 한 후, 고정화 용액 내 라이소자임이 고정화된 담체를 회수한 다음, 잔여용액에 기질을 삽입하여 기질의 활성정도를 평가하였다.
처리한 5시간 후 배지를 모두 제거하고 DMSO 500μl로 crystal을 녹인 후 96-well plate에 100μl씩 옮겨 담아 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정한 후 용매 대조군의 세포생존율을 100%로 하여 각 시료의 상대적인 세포생존율을 구하였다.
고정화 시 사용되는 효소는 양이 증가할수록 활성은 증가하며, 일정이상의 농도가 고정화에 사용이 되어도 담체와 결합할 수 있는 효소는 한정적이므로, 최적의 고정화 농도를 설정하는 것은 경제성 측면에서 중요한 문제이다. 키토산 담체에 고정화 시, 최적의 라이소자임 필요 농도는 pH 10.0, 40℃의 240분 동안 고정화 시, 사용되는 라이소자임의 농도(0.1, 0.5, 0.7, 1.0,1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 5.0mg/ml) 변화에 따라 측정하였다.
키토산 부직포의 가교는 5×5cm 크기의 250mg의 키토산 부직포를 액비 1:50, 25mM, pH 10의 버퍼용액에 넣고, 3%(v/v)의 글루타알데하이드 용액으로 25℃, 110rpm으로 항온진탕수조(BS-31, Jeio Tech., Korea)에서 처리하였다.
현미경 관찰 후 MTT assay를 위해 5mg/ml이 되게 MTT reagent를 증류수에 녹여 0.2μm syringe filter로 filtering 한 후 각 well에 0.5mg/ml이 되게 처리하였다.

대상 데이터

가교 및 효소 처리 시, pH를 일정하게 유지하기 위 하여 버퍼용액을 제조해서 사용하였으며, 버퍼로 인산수소칼륨(potassium phosphate monobasic, Sigma Chemicals Co., USA)과 인산일수소칼륨(potassium phosphate dibasic, Sigma Chemicals Co., USA), 탄산나트륨(sodium carbonate, Duksan Pure Chemicals Co., Korea)과 탄산수소나트륨(sodium bicarbonate, Duksan Pure Chemicals Co., Korea)을 사용하였다. 가교제로 25% 글루타알 데하이드(Glutaraldehyde, Junsei Chemical Co.
, Korea)을 사용하였다. 가교제로 25% 글루타알 데하이드(Glutaraldehyde, Junsei Chemical Co., Japan)를 사용하였으며, 라이소자임의 활성 측정을 위한 기질로 Micrococcus lysodeikticus(ATCC 4986, Sigma Chemicals Co., Korea)를 사용하였다. 이상의 시약은 모두 1등급을 사용하였다.

성능/효과

그러나 라이소자임의 농도가 증가함에 따라 용액 내 잔존 효소가 점차 늘어나 기질과 반응할 수 있는 효소가 검출되기 시작하였다. 농도가 증가함에 따라 활성은 점차 증가하였으며, 1.5mg/ml이상의 농도에서는 더 이상의 활성 증가가 나타나지 않았다.
이는 글루타알데하이드의 알데하이드기와 키토산 부직포섬유의 아미노기가 결합한 후, 라이소자임의 고정화에 의해 효소내 아미노기와 글루타알데하이드의 알데하이드기가 결합하게 됨에 따라 공유결합 내 C=N 결합이 생기기 때문이다³⁹⁾. 따라서 키토산 부직포에 글루타알데하이드 가교 및 라이소자임의 고정화가 효과적으로 이루어짐을 확인하였다.
Figure 11은 키토산 부직포의 적외선 분광 분석 결과이다. 미처리 키토산 부직포, 글루타알데하이드를 이용한 가교 후, 라이소자임 고정화 후의 표면 변화를 측정하였으며, 그 결과 가교 및 효소 고정화에 의해 1660~1680cm^-1 범위에서 피크의 변화가 관찰되고, 피크의 세기가 커짐을 알 수 있다. 이는 글루타알데하이드의 알데하이드기와 키토산 부직포섬유의 아미노기가 결합한 후, 라이소자임의 고정화에 의해 효소내 아미노기와 글루타알데하이드의 알데하이드기가 결합하게 됨에 따라 공유결합 내 C=N 결합이 생기기 때문이다³⁹⁾.
실험결과, 최적의 고정화 조건은 pH 7.0, 35℃, 라이소자임 농도 1.5mg/ml, 고정화 시간 240분이다. 고정화된 라이소자임은 자유 라이소자임에 비해 온도 안정성은 매우 우수하였다.
이는 효소와 담체간의 강한 공유결합에도 불구하고 아미노기와 알데하이드기 사이의 반응 및 위 반응으로 형성된 Schiff’s 염기가 가역적이므로 보관 기간이 일정기간 이상 길어짐에 따라 고정화 트립신의 활성 저하가 일어난 것으로 판단된다³⁾. 위 결과를 통해 글루타알데하이드 가교한 키토산 부직포에 공유결합으로 고정화된 라이소자임의 저장성은 4℃에서 30일 보관 후에도 약 50%의 활성을 유지함을 알 수 있다.
표면 거칠기의 증가는 글루타알데하이드 가교한 부직포 표면의 트립신 고정화에 의한 것으로 판단되며^40,41), 작은 알갱이들이 흡착된 표면은 트립신 단백질 결정의 재결정화에 의한 것으로 보인다^17,39,42). 이를 통해 글루타알데하이드를 이용한 라이소자임의 고정화가 잘 이루어짐을 확인하였다.
그러나 60℃ 이상의 온도에서는 해당 온도에서 처리 시간이 증가할수록 활성은 급감하여, 약 135분 경과 시, 고정화 된 효소는 완전히 활성을 정지함을 알 수 있다. 이를 통해, 자유효소의 경우, 30℃에서 반응하고, 효소 고정화는 35℃의 온도에서 진행하였으나, 실제 고정화된 효소의 경우, 고온에서도 활성이 유지됨을 확인하였다. 즉, 열 안정성은 키토산 부직포에 라이소자임을 고정화시킴으로써 증가하였다.
표면관찰결과, 최적의 활성 조건에서 표면에 가교결합 되었으며, 고정화 라이소자임에 의해 표면이 원형상의 물질이 생성되는 것을 확인하였다. 이상의 연구를 통해, 글루타알데하이드를 이용해 키토산 부직포가 고정화 담체로서 활성하고 라이소자임이 효과적으로 고정화됨을 확인하였다. 본 연구를 통해 효소고정화를 이용한 기능성 섬유소재의 개발 가능성을 확인하였으며, 본 연구 결과는 효소 고정화를 이용하여 다기능성 섬유소재 개발 연구에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
0에서 고정화를 한 담체의 경우, 고정화 후, 표면이 황변 되는 것으로 나타나 산성 조건하에서는 라이소자임이 활성하지 못함을 알 수 있다. 자유 라이소자임의 경우, pH 6.0~9.0 사이의 조건 중, pH 6.0에서 최대 활성을 보인 반면, 고정화된 라이소자임의 경우, pH 7.0부터 고정화가 잘 된 것으로 보아, 고정화 시, 라이소자임의 최적 활성 pH가 시프트 됨을 확인하였다. 이는 pH 약 5.
Figure 2는 pH 6에서 온도에 따른 자유 라이소자임의 활성 결과이다. 자유 라이소자임의 활성은 25℃에서 온도가 증가함에 따라 증가하다가 30℃에서 최대 활성을 나타낸 후, 다시 온도가 증가함에 따라 감소하는 경향을 나타냈다. 특히, 25~35℃ 사이에서는 시간이 지남에 따라 활성이 증가하다가 일정 시간 이상이 되면 증가속도가 둔화되었다.
자유 라이소자임의 활성은 25℃에서 온도가 증가함에 따라 증가하다가 30℃에서 최대 활성을 나타낸 후, 다시 온도가 증가함에 따라 감소하는 경향을 나타냈다. 특히, 25~35℃ 사이에서는 시간이 지남에 따라 활성이 증가하다가 일정 시간 이상이 되면 증가속도가 둔화되었다. 그러나 40℃ 이상의 온도에서는 활성 정도의 차이만 관찰될 뿐, 시간에 따른 활성 변화는 크게 나타나지 않았다.
고정화된 라이소자임은 자유 라이소자임에 비해 온도 안정성은 매우 우수하였다. 특히, 고정화된 라이소자임은 60℃의 고온에서도 최대 1 시간가량 초기 활성의 약 80%를 유지하는 등, 우수한 활성을 나타내 고정화에 의해 라이소자임의 열 안정성은 향상되었다. 고정화된 라이소자임은 4℃에서 30일 보관 후에도 효소의 활성이 유지되었다.
표면관찰을 통해 글루타알데하이드 가교한 키토산 부직포에 라이소자임이 고정화되었음을 확인하였다. 표면관찰결과, 최적의 활성 조건에서 표면에 가교결합 되었으며, 고정화 라이소자임에 의해 표면이 원형상의 물질이 생성되는 것을 확인하였다. 이상의 연구를 통해, 글루타알데하이드를 이용해 키토산 부직포가 고정화 담체로서 활성하고 라이소자임이 효과적으로 고정화됨을 확인하였다.
고정화된 라이소자임은 4℃에서 30일 보관 후에도 효소의 활성이 유지되었다. 표면관찰을 통해 글루타알데하이드 가교한 키토산 부직포에 라이소자임이 고정화되었음을 확인하였다. 표면관찰결과, 최적의 활성 조건에서 표면에 가교결합 되었으며, 고정화 라이소자임에 의해 표면이 원형상의 물질이 생성되는 것을 확인하였다.

후속연구

Figure 10은 라이소자임이 고정화 된 키토산 부직포에서의 세포 생존율 결과로, Figure 10에 나타난 바와 같이, 미처리된 키토산에 비해 라이소자임이 고정화된 키토산 부직포에서의 세포 생존율은 1%로 미미한 증가를 보였다. 그러나 라이소자임 고정화에 의해 세포 생존이 크게 증가했다고 보기에는 다소 어려움이 있으며, 세포 생존율을 올릴 수 있는 추가적인 방법에 대한 연구가 필요하다.
이상의 연구를 통해, 글루타알데하이드를 이용해 키토산 부직포가 고정화 담체로서 활성하고 라이소자임이 효과적으로 고정화됨을 확인하였다. 본 연구를 통해 효소고정화를 이용한 기능성 섬유소재의 개발 가능성을 확인하였으며, 본 연구 결과는 효소 고정화를 이용하여 다기능성 섬유소재 개발 연구에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	효소 고정화 방법의 종류와 그 특징은 무엇인가?	포괄법은 겔의 미세한 격자 혹은 고분자 피막 안에 효소를 집어넣어 효소를 고정화하는 방법으로, 한정된 공간 내에서 효소의 접힘이나 변성이 제한되어 안정성이 증가할 수 있으나, 제한적인 공간 내에서 효소의 활성이 영향을 받는다9,10). 담체 결합법 중 물리적 흡착에 의해 효소를 고정화하는 방법은 효소가 담체에 흡착되어 고정화 되지만 효소와 담체간의 결합이 약하여 온도, pH, 염 농도 등의 외부 요인에 의해 흡착된 효소가 쉽게 분리된다9,10). 담체결합법 중 공유결합에 의해 효소를 고정화 하는 방법은 효소의 활성에 직접 관여하지 않은 아미노산 잔기와 담체 표면에 유도된 기능기 사이의 공유결합에 의해 효소를 고정화하는 방법으로 가장 널리 쓰이고 있는 방법이다9,10). 공유결합에 의한 고정화는 담체와 효소의 결합이 강해 효소가 반응 중에 쉽게 분리되지 않고, 기질과 접촉이 용이하며 효소의 열 안정성이 증가되는 장점을 가진다9-11).
	효소 고정화는 무엇인가?	효소 고정화는 효소를 담체에 흡착, 가교, 포괄시킴으로써 적용의 편리성, 이용성, 안정성 및 재사용성 등을 향상시키는 방법으로 효소를 고정화하면 효소 활성의 pH와 온도 안정성 및 저장 안정성을 증가시킬 뿐 아니라 수용액 상에서 효소를 용이하게 분리할 수 있어 재사용이 가능하므로 편리하고 경제적이다1,2). 이에 효소고정화 기술에 대한 연구는 효소의 한계점을 극복할 수 있는 방안으로서 꾸준히 연구되고 있다3-8).
	고정화 담체에 요구되는 특성에는 어떤 것들이 있는가?	고정화 담체는 고정화된 효소의 활성 및 안정성 등과 같은 고정화 효소의 성질에 영향을 미치기 때문에 적절한 고정화 담체의 선택이 중요하다15). 고정화 담체로 사용되기 위해서는 높은 기계적 강도, 단백질 친화성, 물리/화학적 안정성 및 성형의 용이성 등이 요구된다10,16,17). 키토산은 β-1,4-글리코시딕 결합의 선형 다당류로 효소와의 생체 적합성이 우수하고, 항박테리아 성질, 무독성, 친수성, 높은 기계적 강도, 단백질 친화력 및 생분해성 등의 특성뿐만 아니라 글루타알데하이드와 결합할 수 있는 주 아민기와 같은 관능기가 풍부하여 효소 고정화 담체로 널리 사용되고 있다18-23).

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저자의 다른 논문 :

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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