[논문]Dracocephalum palmatum Stephan 잎 헥산 분획 추출물의 인간 유래 전립선 암세포 사멸에 대한 작용

이민지; 이세은; 최나리; 조성현; 조수인

doi:10.6116/kjh.2018.33.4.69.

Dracocephalum palmatum Stephan 잎 헥산 분획 추출물의 인간 유래 전립선 암세포 사멸에 대한 작용
Effects of hexane fraction of Dracocephalum palmatum Stephan leaf on human-derived prostate cancer cell death 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.33 no.4, 2018년, pp.69 - 76

이민지 (부산대학교 한의학전문대학원 한의과학과) , 이세은 (부산대학교 한의학전문대학원 한의과학과) , 최나리 (부산대학교 한의학전문대학원 한의학과) , 조성현 (부산대학교 한의학전문대학원 한의학과) , 조수인 (부산대학교 한의학전문대학원 한의학과)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : Dracocephalum palmatum Stephan (Lamiaceae) is a medicinal plant used by the East-Russian nomads but there were few studies on this plant. This study was to evaluate anti-cancer effects of D. palmatum Stephan leaf hexane fraction on human derived prostate cancer cell death. Methods : The dried leaves of D. palmatum were dissolved in methanol, and hexane fraction (DpLH) was again obtained from lyophilized methanol extract (DpLM). DpLH was investigated by measuring by MTT assay and annexin V/PI staining to evaluate its effects on the cell viability and apoptosis of PC-3 cells. The ROS generations were detected by DCF-DA dye. The protein expressions were confirmed by p-AKT, Bcl-2, Bax, procaspase-3 activities. Results : After treatment of DpLH to PC-3 cells, the cell proliferation was significantly inhibited, and in addition, DpLH treatment also accelerated apoptosis of PC-3 cells. When DpLH was treated to the PC-3 cells, its ROS production significantly decreased. The proportion of all proteins (p-AKT/actin, Bcl-2/Bax and procaspase-3/actin ratios) showed decreasing tendency of expression compared with the control group. Conclusions : As shown in the above results, the extract from D. palmatum inhibits ROS production and promotes cell death, which is considered to be a relatively safe induction of cell death when administered to a living body. In conclusion, these results suggested that DpLH may have anti-cancer effect in human prostate cancer cell.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

본 연구에서는 시베리아 지역에서 직접 채취하고 기원을 현지 학자로부터 동정 받은 위 식물 잎의 메탄올 추출물을 얻었으며, 이의 용매 분획 중 헥산 분획이 인간 유래 전립선 암세포의 사멸에 어떠한 작용을 미치는지 확인하여 그 결과를 보고하는 바이다.

제안 방법

메탄올 추출물과 DpLH 구성 성분 패턴의확인은 HPLC(YL 9100 HPLC system)을 사용하였다. 사용한 분석기기는 HPLC vacuum degasser, quaternary pump, UV/VIS detector 과 manual injection로 구성되어 있으며, data는 Autochro-3000 프로그램을 사용하여 분석하였다 (Table 1.
, Ltd)를사용하여 동결건조 분말을 얻었다. 앞으로의 후속 연구에서의 메탄올 추출물과 분획물의 비교를 위해 메탄올 추출물을 소량보관 후, 나머지를 증류수에 현탁하여 같은 양의 헥산, 클로로포름, 에틸 아세테이트, 부탄올 순으로 5가지 분획물을 만들었으며 (Fig. 1), 본 연구에서는 헥산 분획 (DpLH)만을 실험에 사용하였다

대상 데이터

본 연구에 사용된 약물인 D. palmatum S.은 러시아 북동부에 소재한 북동연방대학교의 식물생태학 전공 교수가 채집 및 기원을 동정한 후 멸균건조한 시료의 상태로 제공 받았다. 이 중 D.
인간 유래 전립선 암인 PC-3는 ATCC (American Type Culture Collection, Tockville, MD)에서 분양 받아 본 실험에 사용하였다.

데이터처리

) 나타내었다. 각 그룹 사이의 통계적 유의성은 Kruskall-Wallis 분석을 통해 확인한 후 Dunnette 의 분석 방법을 사용해 사후 검정하였다. 이러한 분석에 사용된 프로그램은 SIGMAPLOT 12.

이론/모형

세포 생존율은 MTT assay로 측정되었다. 48-well plate에 5×10³ cells/well으로 하루 동안 배양 시킨 후, 다음날 약물을 농도 별로 처리하였다.

성능/효과

따라서 본 연구팀은 위 시료 일부를 획득하여 DpLM이 항암 활성이 있음을 예비연구를 통해 확인하였으며, 본 연구에서는 전립선 암 세포주에 대해 세포사멸 및 자멸에 어떠한 영향을 미치는지를 관찰한 결과 DpLH를 24시간 처리하였을 때 apoptosis 가 유도됨을 알 수 있었다 (Fig. 3-4).
본 실험에서는 DpLH의 처리가 p-AKT를 억제하여 세포사에 관여함을 알 수 있었고 (Fig. 6), Bcl-2가 감소하고 Bax가 증가하며 (Fig. 7), procaspase-3 가 감소하는 것을 확인 할 수 있었다 (Fig. 8).

후속연구

palmatum Stephan의 건조된 잎의 메탄올 추출물을 사용하였는데, 이러한 연구는 최초로 시도되었다. DpLH은 뚜렷한 세포자멸 효과를 보였으며 향후 유기 용매인 헥산 분획물이라는 단점을 최소화 시키고 임상에 적용 가능한 추출 방법들의 개발 등 해결점을 찾는다면 앞으로 항암 연구에 기대해볼 만한 자원 식물이 될 것으로 생각된다.
앞으로 저자들은 국내에 자생하는 용머리 추출물도 획득하여DpLM 및 DpLH 등의 항암 활성을 비교 연구할 계획이며 동일한 속에 속한 유사 식물들 간의 활성의 차이 유무 탐색을 통해 대체 한약 자원의 개발 가능성도 함께 탐구해보고자 한다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	Dracocephalum palmatum Stephan이란?	Dracocephalum palmatum Stephan은 꿀풀과 용머리속에 속하는 식물로 우리나라에서는 자생하지 않으나 중국 북동부와 러시아 등지에서 볼 수 있는데, 우리나라에 자생하는 식물 중 분류학상 가까운 식물로 용머리가 있으며 같은 용머리속에 속하고 Fisch. ex Link라는 학명을 가지고 있다. 용머리는 생약명으로는 광악청란 (光萼靑蘭)이라고 불리며, 성미는 苦, 寒하며 消炎, 鎭痛 등의 효과가 있고 한국, 일본, 중국 동북부 또는 시베리아 동부에 분포하며 산 숲에서 자란다6).
	현재 전립선 암 치료의 한계는?	2017년 자료에 의하면 미국에서 전립선 암세포는 암 관련 사망의 3번째 주요한 원인이 되고 있다1). 전립선 암 치료에는 수술, 호르몬 요법 및 화학요법 등 다양한 방법이 전 세계적으로 사용되고 있지만 심각한 부작용 때문에 한계가 있으며2-5), 이러한 이유로 인해 효과적이고 비교적 안전한 화학 치료제 또는 천연물에서 유래한 치료용 의약품들의 개발이 필요하다
	DpLH의 처리가 세포 내 ROS의 양을 감소시킴으로써 암세포가 산화적인 스트레스를 받는 것을 확인하였다고 판단한 이유는?	ROS는 세포의 산화, 대사 과정에서 생기는 유해한 산소로, 세포 손상과 생리적 기능 장애를 일으켜 DNA로부터 조직까지 파괴 할 수도 있다23-25). 따라서 DpLH의 처리가 세포 내 ROS의 양을 감소시킴으로써 암세포가 산화적인 스트레스를 받는 것을 확인하였다 (Fig.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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