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문제 정의
- 이에 본 연구에서는 태충(LR3)침자와 비혈위의 간장(肝臟) 미토 콘드리아 분포 및 활성을 관찰하여 ATP 에너지 변화에 따른 관련 장부와 경맥의 연계성을 확인하고자 한다.
제안 방법
- 실험군들은 흡입 마취 상태에서 무처치 5분 정상군(Normal1, n=5), 흡입 마취 상태에서 무처치 10분 정상군(Normal2, n=5), 흡입 마취 상태에서 태충(LR3) 혈위에 양측 침자 시술을 한 5분 침자 군(MA1, n=5), 흡입 마취 상태에서 태충(LR3) 혈위에 양측 침자 시술을 한 10분 침자군(MA2, n=5)으로 분리하였다.
대상 데이터
- 1) 실험 동물: 실험동물은 동신대학교 실험동물위원회에서 승인 (2018-02-02) 받은 7주령 260 g의 Sprague Dawley계의 수컷 백서(Samtaco, Korea)를 항온항습 환경의 사육장(실내온도 23± 1℃, 습도 60±5%) 내에서 일주일 동안 적응시킨 후 실험에 사용하 였다. 적응기간 동안 물과 고형사료(pellet, 동아원, Korea)를 공급 하면서 자유롭게 섭취하였다.
데이터처리
- 모든 측정치는 excel statistic program (Microsoft, USA)을 사용하여 평균치와 표준오차(mean±standard error)를 표시하였고, 각 실험군들 사이의 통계 분석은 window용 SPSS (SPSS, USA)를 활용하여 비모수적 방법으로 Mann-Whitney U test를 실시하였 다. 각 실험군들은 대조군에 대하여 p＜0.
성능/효과
- 1. Liver to body weight에서는 Normal1군과 Normal2군에 비하여 각각 모든 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다.
- 2. Mitochondrial protein concentration에서는 Normal1군과 Normal2군에 비하여 각각 모든 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다.
- 3. Ubiquinon Oxidoreductase (complex I)에서는 Normal1 군과 Normal2군에 비하여 각각 모든 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다.
- 4. Succinate Dehydrogenase (complex II)에서는 Normal1군과 Normal2군에 비하여 각각 모든 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다.
- 6. Cytochrome C oxidase (complex IV)에서는 Normal1군, Normal2군, MA1군에 비하여 MA2군에서 유의한 증가를 보였다.
- 7. Aspartate aminotransferase (AST)에서는 Normal1군과 Normal2군에 비하여 각각 모든 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다.
- 9. Total protein 변화에서는 Normal1군에 비하여 Normal2군과 MA1군에서 유의한 증가를 보였다.
- Complex III에 대한 변화를 침자 시간별로 관찰한 결과, Normal1군에서 0.7±0.01 mOD/min, Normal2에서 0.74±0.04 mOD/min, MA1군에서 0.72±0.029 mOD/min, MA2군에서 0.75± 0.023 mOD/min을 나타내었다.
- Complex II에 대한 변화를 침자 시간별로 관찰한 결과, Normal1군에서 0.12±0.021 mOD/min, Normal2에서 0.11± 0.024 mOD/min, MA1군에서 0.12±0.019 mOD/min, MA2군에서 0.09±0.035 mOD/min을 나타내었다.
- Complex IV에 대한 변화를 침자 시간별로 관찰한 결과, Normal1군에서 0.67±0.035 mOD/min, Normal2에서 0.76± 0.066 mOD/min, MA1군에서 0.88±0.072 mOD/min, MA2군에서 1.15±0.036 mOD/min을 나타내었다.
- Complex I에 대한 변화를 침자 시간별로 관찰한 결과, Normal1군에서 0.44±0.052 mOD/min, Normal2에서 0.4±0.021 mOD/min, MA1군에서 0.35±0.028 mOD/min, MA2군에서 0.44± 0.041 mOD/min을 나타내었다.
- Total protein에 대한 변화를 침자 시간별로 관찰한 결과, Normal1군에서 5.4±0.04 g/dl, Normal2에서 5.6±0.07 g/dl MA1군에서 5.7±0.09 g/dl, MA2군에서 5.5±0.05 g/dl을 나타내 었다.
- 침자 치료는 Respiratory Complex enzymes (complex I, II, IV) 활동및 COX IV 발현을 복원하여 ROS 생성을 억제했다. 또한, 침술은 RCR (respiratory control rate) 및 MMP (mitochondrial membrane potential) 수준을 상향 조절함으로써 미토콘드리아 생물 에너지의 결핍을 개선하는 것으로 관찰되었다. 이러한 연구에서 침자 치료가 BCCAO에 의해 유발된 해마의 미토콘드리아 기능 장애를 향상 시켰음이 관찰되었으며, 미토콘드리아 호흡 조절 속도및 미토콘드리아 생물 에너지 매개 변수를 향상시키는 것에 영향을 주는 것을 알 수 있다.
- 본 연구에서는 태충(LR3)에 시술한 침자가 해당 肝臟 Mitochondrial Respiratory Chain 변화에 미치는 영향을 관찰하여 Liver to body weight, Mitochondrial protein concentration, Complex I, II, III, AST, ALT에서는 Normal1군과 Normal2군에 비하여 각각 모든 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다. 하지 만, Complex IV에서는 Normal1군, Normal2군, MA1군에 비하여 MA2군에서 유의한 증가를 보였으며, Total protein 변화에서는 Normal1군에 비하여 Normal2군과 MA1군에서 유의한 증가를 보였다.
- 위 결과로 보아, 태충에 대한 침의 자극이 간의 미토콘드리아의 대사 중 Complex IV의 활성을 증가시켜 해당 장기의 단백질 대사를 활성화 시키는 데 영향을 주는 것을 알 수 있으며, 이는 Li 33) 논문의 결과와 일치되는 결과이다. 또한 태충은 족궐음간경의 수토혈(輸土穴) 및 원혈(原穴)로서 “病在陰之陰者, 刺陰之滎輸” 및 “治臟者, 治其輸”에 근거하여 임상에서는 간장병(肝臟病), 기화병(氣化 病)등 주로 기기울체(氣機鬱滯)등의 에너지 울결과 관련된 병증 치료에 이용되는데, 위의 연구 결과를 근거로 태충 침자후 염전 수기 법을 사용할 경우, 해당 경락이 유주하는 간 조직내의 미토콘드리 아의 Cytochrome C oxidase (complex IV)에 영향을 주어 간 병변에 일정한 개선 효과를 보이는 기전으로 해석될 수가 있다.
- 본 연구에서는 태충(LR3)에 시술한 침자가 해당 肝臟 Mitochondrial Respiratory Chain 변화에 미치는 영향을 관찰하여 Liver to body weight, Mitochondrial protein concentration, Complex I, II, III, AST, ALT에서는 Normal1군과 Normal2군에 비하여 각각 모든 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다. 하지 만, Complex IV에서는 Normal1군, Normal2군, MA1군에 비하여 MA2군에서 유의한 증가를 보였으며, Total protein 변화에서는 Normal1군에 비하여 Normal2군과 MA1군에서 유의한 증가를 보였다.
후속연구
- 향후 침 자극에 대한 전달 기전 및 Cytochrome C oxidase의 활성에 따른 조직내 에너지대사와 타 장부와의 연계성에 대한 심도 있는 추후 연구가 필요하리라고 사료된다.
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