[논문]유세포 분석을 통한 과잉치 치수 유래 세포의 줄기세포 특성 연구

류연숙; 김종빈; 신지선; 이준행; 김종수

doi:10.5933/jkapd.2019.46.3.337

유세포 분석을 통한 과잉치 치수 유래 세포의 줄기세포 특성 연구
Characterization of Human Dental Pulp Cells from Supernumerary Teeth by Using Flow Cytometry Analysis 원문보기

大韓小兒齒科學會誌 = Journal of the Korean academy of pediatric dentistry, v.46 no.3, 2019년, pp.337 - 342

류연숙 (미사서울치과) , 김종빈 (단국대학교 치과대학 소아치과학교실) , 신지선 (단국대학교 치과대학 소아치과학교실) , 이준행 (단국대학교 치과대학 소아치과학교실) , 김종수 (단국대학교 치과대학 소아치과학교실)

초록
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이 연구의 목적은 발치한 매복 과잉치에서 얻은 치수 유래 세포의 줄기세포 특성을 유세포 분석을 통해 알아보는 것이다. 15명의 환자로부터 채취한 정중 과잉치의 치수 세포를 계대 배양하였고, 3계대와 10계대 세포들을 유세포 분석을 이용하여 분석하였다. 간엽성 줄기세포 표지자 관찰에 사용된 항체 표지자(CD)는 양성 표지자로는 CD 73, CD 90, 그리고STRO-1 와 음성 표지자로는 CD 34, CD 45 이었다. 3계대에서 CD 73, CD 90은 각각 94.82%, 98.86%의 양성반응을, CD 34, CD 45는 각각 2.25%, 2.52%로 음성 반응을 보였으며, STRO-1은 20.93%를 나타냈다. 10계대에서는 CD 73, CD 90은 각각 96.62%, 98.61%의 발현을 보였지만, CD 34, CD 45는 각각 3.86%, 4.14%를 나타냈다. STRO-1은 35.62%로 발현되었다. 이상의 결과에서 과잉치 치수 유래 세포는 간엽성 줄기세포의 특성을 가지며, 3계대와 10계대 모두에서 간엽성 줄기세포의 특성을 유지하고 있다고 사료된다. 이에 빠른 성장 속도와 늦은 계대까지 유지되는 줄기세포능을 고려할 때, 치아 유래 줄기세포의 공여부로서 매복 과잉치의 충분한 활용 가능성을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

The aim of this study was to analyze cells from human dental pulp tissue of impacted supernumerary teeth as stem cells with flow cytometry. Human dental pulp cells from 15 supernumerary teeth were identified their characteristics as stem cells by expression of mesenchymal stem cell markers through flow cytometry analysis at passage 3 and passage 10. Cluster of differentiation (CD) 73, CD 90, CD 34, CD 45 and STRO-1 cell surface markers were used to figure out characteristics of dental pulp stem cells from supernumerary teeth. At passage 3, the cell population showed positive expression of CD 73, CD90 and STRO-1, lacked expression of CD 34 and CD 45. At passage 10, CD 73, CD 90 and STRO-1 showed positive expression while CD 34 and CD 45 showed negative expression. This study indicated that dental pulp stem cells of supernumerary teeth had the properties of mesenchymal stem cells at both early and late passage. Impacted supernumerary teeth could be considered as a noble source of stem cells because of rapid growth and maintaining characteristics of stem cells until late passage.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

The aim of this study was to identify MSCs in 15 SNT with flow cytometry analysis. CD 73, CD 90 and STRO-1 were used as positive CD markers, and CD 34 and CD45 were used as negative CD markers.
The purpose of this study is to analysis characteristics of MSC of dental pulp from 15 impacted SNT.

대상 데이터

Impacted supernumerary teeth in the anterior maxilla were extracted from 15 healthy patients who were between 6 and 9 years old. This study was approved by the Dankook university dental college institutional ethics committee (H-1506/006/001).
The surface markers used in this study were cluster of differentiation (CD) 73, CD 90, CD 34, CD 45 (BD Biosciences) and STRO-1 (R&D system).

이론/모형

Inactive cell surface markers were removed and the fluorescent antibodies were used for florescence-activated cell sorting (FACS) analysis. The cell-antibody complexes were analyzed with BD FACSCalibur flow cytometry (BD Biosciences). The cells that were not reacted to any markers were used as control group.

성능/효과

4% expression in the cells from periodontal ligament of supernumerary teeth. In this study, STRO-1 showed 20.93% expression at passage 3 and 35.62% at passage 10. The expression of the STRO-1 was even slightly increased in passage 10 comparing to passage 3.
The result indicated that DPSCs of impacted SNT had the characteristics of MSCs. Comparing passage 3 and passage 10 in flow cytometry analysis, the cell marker expressions were similar.

후속연구

According to ISCT’s recommend, the negative CD marker should be detected lower, further study is required.
The differentiation to hard tissues or fat should also be examined. Also additional researches including real time qPCR, would be needed to confirm gene expression in follow-up studies.

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