[논문]수산물의 콜레스테롤 분석을 위한 콜레스테롤 분석법 개선 및 검증

정소희; 정유린; 신혜영; 김연계; 윤나영

doi:10.5657/kfas.2022.0218

수산물의 콜레스테롤 분석을 위한 콜레스테롤 분석법 개선 및 검증
Improvement and Verification of a Cholesterol Analytical Method to Analyze Cholesterol Content in Seafood 원문보기

한국수산과학회지 = Korean journal of fisheries and aquatic sciences, v.55 no.2, 2022년, pp.218 - 223

정소희 (국립수산과학원 식품위생가공과) , 정유린 (국립수산과학원 식품위생가공과) , 신혜영 (국립수산과학원 식품위생가공과) , 김연계 (국립수산과학원 식품위생가공과) , 윤나영 (국립수산과학원 식품위생가공과)

Abstract ▼ AI-Helper

Cholesterol is an essential component for maintaining health; however, excessive consumption can lead to diseases. Thus, continuous monitoring of cholesterol content is important in food research. The cholesterol analysis method used in Korea follows the Korean Food Standards Codex. As this method uses gas chromatography, derivatization of the sample is required, and analysis time is more than 30 min. Kim developed a new method using liquid chromatography; however saponification by the non-heat saponification method is insufficient. To address these limitations, a new cholesterol analysis method was developed and verified. The correlation coefficients for the cholesterol standard (STD) were maintained above 0.99. The limit of detection and limit of quantitation of cholesterol STD were 2.41 ㎍/mL and 7.31 ㎍/mL, respectively. The accuracies for cholesterol were 92.21-99.02%. The developed analytical method was also verified using three standard reference materials, and their accuracies were 93.71-97.09%. In addition, the cholesterol content of fishes was analyzed, and the values were compared with those recorded by the United States Department of Agriculture. Our results suggest that this method could be used as a new analytical method for cholesterol in seafood.

주제어

표/그림 (4)

그림 Fig. 1. Chromatograms of cholesterol standard, SRM 1546a, Clupea pallasii and Tilapia mossambica for specificity.
표 Table 2. Accuracy, intra-day repeatability and inter-day reproducibility of a new cholesterol analytical method
표 Table 1. Linearity, limit of detection (LOD) and limit of quantitation (LOQ) of cholesterol standard (n=8)
표 Table 3. Cholesterol contents of Korean fisheries comparison with values of USDA (2022)

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 기존의 식품공전 등의 콜레스테롤 분석법을 개선한 새로운 분석법에 대한 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성 등의 분석수행지표를 평가하여 분석법을 검증하고, 수산물의 콜레스테롤 함량의 분석 및 비교를 통해 새로운 콜레스테롤 분석법의 신뢰성을 확보하고자 하였다.

제안 방법

검증한 분석법을 이용하여 수산물 10종의 콜레스테롤 함량을 분석하였다. 실험에 사용된 수산물은 미국 농무부(USDA, 2022)에서 제공하고 있는 수산물의 콜레스테롤 함량값과 비교할 수 있는 유사한 종으로 선정하였으며, 각 시료별로 3개의 시험용액을 제조하여 분석한 평균값을 가식부 100 g에 함유되어있는 함량(mg)±표준편차로 나타내었다.
검증한 콜레스테롤 분석법을 이용하여 미국 농무부(USDA, 2022)에서 콜레스테롤 함량정보를 제공하고 있는 수산물과 유사한 종(10종)을 분석하였다. 이들 수산물의 콜레스테롤 함량은 살 오징어 242.
또한, 정확한 콜레스테롤 함량 정보를 알고 있는 표준인증물질 3종을 사용하여 유효성을 검증하였다. 표준인증물질을 3회 반복 측정한 결과, 평균 95.
본 연구에서는 콜레스테롤 분석에 관한 시험방법의 유효성을 검증하였다. 특이성이란 불순물이 혼재되어 있는 상태에서 분석대상 물질을 선택적으로 정확하게 측정할 수 있는 능력을 말한다(KMFDS, 2008).
분석법의 정밀도(precision)는 검량선을 바탕으로 LOQ 이상의 세가지 농도(10, 50 및 100 μg/mL) 콜레스테롤 표준용액을 각각 3회 분석하여 일내정밀도(반복성, repeatability)를측정하였고, 조제한 표준용액을 1일 3회 반복, 3일간 분석하여 일간정밀도(재현성, reproducibility)를 측정하였다. 분석법의 유효화를 위하여 표준인증물질 3종(SRM1546a, SRM1549a 및 SRM1845a)의 콜레스테롤 인증 값을 근거로 평가하였다.
분석법의 정밀도(precision)는 검량선을 바탕으로 LOQ 이상의 세가지 농도(10, 50 및 100 μg/mL) 콜레스테롤 표준용액을 각각 3회 분석하여 일내정밀도(반복성, repeatability)를측정하였고, 조제한 표준용액을 1일 3회 반복, 3일간 분석하여 일간정밀도(재현성, reproducibility)를 측정하였다
콜레스테롤의 직선성은 표준용액을 단계적으로 희석하여 총 5개(0, 5, 10, 50 및 100 μg/mL) 의 농도로 조제하여 8회 반복하여 UPLC로 분석하였다
특이성(selectivity)은 콜레스테롤 표준용액(100 μg/mL)과 SRM 1546a, 청어, 틸라피아의 시험용액을 측정한 크로마토그램에서 콜레스테롤 피크 및 인근 물질의 피크의 머무름 시간(reten- tion time)과 파장을 비교하였다

대상 데이터

본 연구에 사용한 콜레스테롤 표준품(5-Cholesten-3ß-ol, C-8503)은 Sigma-Aldrich Co
실험에 사용된 수산물은 미국 농무부(USDA, 2022)에서 제공하고 있는 수산물의 콜레스테롤 함량값과 비교할 수 있는 유사한 종으로 선정하였으며, 각 시료별로 3개의 시험용액을 제조하여 분석한 평균값을 가식부 100 g에 함유되어있는 함량(mg)±표준편차로 나타내었다.
콜레스테롤 분석을 위해 사용한 10종의 수산물은 2021년에 확보하였으며, 마루자주새우(Crangon hakodatei), 청어(Clu- pea pallasii), 대구(Gadus macorcephalus)는 동해에서, 살오징어(Todarodes pacificus)와 문치가자미(Pleuronectes yokoha- mae)는 남해에서 국립수산과학원 자원조사로 확보하였으며, 넙치(Paralichthys olivaceus), 조피볼락(Sebastes schlegeli) 은거제시, 숭어(Mugil cephalus)는 하동군, 송어(Oncorhynchus masou)와 틸라피아(Tilapia mossambica)는 김해시의 양식장에서 각각 구입하여 사용하였다. 시료 종마다 10마리 이상 확보하여 비늘, 지느러미, 뼈, 내장, 껍질 등을 제거한 후, 가식 부를 균질화하여 -80°C에서 보관 후 사용하였다.

성능/효과

UPLC를 사용한 콜레스테롤 분석조건에서 콜레스테롤 피크는 5.1–5.2 min 사이에 검출되었으며, 동시간대에 콜레스테롤 외에 나타나는 물질은 없는 것으로 확인되었다
2 min 사이에 검출되었으며, 동시간대에 콜레스테롤 외에 나타나는 물질은 없는 것으로 확인되었다. 콜레스테롤 표준용액과 시험용액을 각각 분석하여 피크의 머무름 시간과 동 시간대에 측정된 파장이 일치하는 것을 확인하였다. 또한, 피크 최소 3곳의 스펙트럼을 비교하여 모두 동일함을 확인함으로써 시험용액 내 검출되는 성분이 콜레스테롤임을 확인하였고, 그 특이성을 입증하였다(Fig.
표준인증물질을 3회 반복 측정한 결과, 평균 95.91%로 90% 이상의 높은 정확도를 나타내었으며, 표준인증물질 3종에 대한 RSD 값은 1.66–3.06 범위로 나타났다(Table 2)
표준품의 농도별 정확도와 표준인증물질의 정확도는 AOAC (2002) 가이드라인의 수용범위인 80–115% 내에 충족되므로 본 연구에서 제시한 분석법의 정확도가 우수함을 확인하였다.

후속연구

따라서 본 연구에서 개발한 새로운 콜레스테롤 분석법을 검증하였으며, 이를 이용하여 수산물의 콜레스테롤 함량을 분석·검증함으로써, 본 분석법이 수산물의 콜레스테롤 분석 및 함량 정보를 제공하는데 활용할 수 있을 것으로 사료된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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