[논문]Cloning Polymerase Chain Reaction (PCR) Products: TA Cloning

Green, Michael R.; Sambrook, Joseph

doi:10.1101/pdb.prot101303

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[해외논문] Cloning Polymerase Chain Reaction (PCR) Products: TA Cloning 원문보기

Cold Spring Harbor protocols, v.2021 no.6, 2021년, pp.pdb.prot101303 - pdb.prot101303

Green, Michael R. , Sambrook, Joseph

Abstract ▼ AI-Helper

The nontemplate-dependent terminal transferase activity inherent in nonproofreading DNA polymerases such as Taq provides a highly efficient method to clone PCR products. The enzyme adds a single, unpaired residue—preferentially an adenosyl residue—to each 3′ end of a double-stranded amplified product. The unpaired terminal (A) residues can pair with a linear T vector that carries an unpaired 3′-thymidyl residue at each end. The two chief advantages of TA cloning are speed and lack of reliance on restriction enzymes. The major disadvantage is an inability to clone directionally. For this reason, it is important to pick and analyze several transformed clones when a particular orientation of the amplified fragment is required.

참고문헌 (14)

10.1093/nar/16.20.9677
Green, Michael R., Sambrook, Joseph. The Hanahan Method for Preparation and Transformation of Competent Escherichia coli: High-Efficiency Transformation. Cold Spring Harbor protocols, vol.2018, no.3, pdb.prot101188-pdb.prot101188.

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Green, Michael R., Sambrook, Joseph. Ligation and Ligases. Cold Spring Harbor protocols, vol.2019, no.8, pdb.top101352-pdb.top101352.

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Green, Michael R., Sambrook, Joseph. Screening Bacterial Colonies Using X-Gal and IPTG: α-Complementation. Cold Spring Harbor protocols, vol.2019, no.12, pdb.prot101329-pdb.prot101329.

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Green, Michael R., Sambrook, Joseph. Easy Transformation of Escherichia coli: Nanoparticle-Mediated Transformation. Cold Spring Harbor protocols, vol.2019, no.12, pdb.prot101204-pdb.prot101204.

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Green, Michael R., Sambrook, Joseph. The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent Escherichia coli: “Ultracompetent” Cells. Cold Spring Harbor protocols, vol.2020, no.6, pdb.prot101196-pdb.prot101196.

상세보기
Green, Michael R., Sambrook, Joseph. Transformation of Escherichia coli by Electroporation. Cold Spring Harbor protocols, vol.2020, no.6, pdb.prot101220-pdb.prot101220.

상세보기
Green, Michael R., Sambrook, Joseph. Cloning Polymerase Chain Reaction (PCR) Products: Making T Vectors. Cold Spring Harbor protocols, vol.2021, no.6, pdb.prot101295-pdb.prot101295.

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Trends Biochem Sci 20 85 1995 10.1016/S0968-0004(00)88964-1 Methods and reagents. Cloning PCR products using T-vectors

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10.1093/nar/19.5.1156
Magnuson, V.L., Ally, D.S., Nylund, S.J., Karanjawala, Z.E., Rayman, J.B., Knapp, J.I., Lowe, A.L., Ghosh, S., Collins, F.S.. Substrate Nucleotide-Determined Non-Templated Addition of Adenine by Taq DNA Polymerase: Implications for PCR-Based Genotyping and Cloning. Biotechniques, vol.21, no.4, 700-709.

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10.1093/nar/19.5.1154
Methods Mol Biol 31 19 1994 PCR cloning using T-vectors

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Curr Issues Mol Biol 2 1 2000 Universal TA cloning

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