The antioxidant activities of methanol and dichloromethane/acetone extracts of twenty three seaweeds were tested by using 1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH) at a $100{\mu}g/ml$ concentrations. The dichloromethane/acetone extracts of three seaweeds(Symphyocladia latiuscula, Gloiopoltis f...
The antioxidant activities of methanol and dichloromethane/acetone extracts of twenty three seaweeds were tested by using 1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH) at a $100{\mu}g/ml$ concentrations. The dichloromethane/acetone extracts of three seaweeds(Symphyocladia latiuscula, Gloiopoltis furcata, Sagassum thunbergii), were found to be most effective in DPPH radical scavenging activity. The DPPH radical scavenging effect of these seaweeds was Symphyocladia latiuscula(85.82%), Gloiopoltis furcata(82.83%), Sagassum thunbergii(74.05%) in order. These seaweeds were evaluated using the pyrogallol UV-VIS spectrophotometeric method to generate superoxide anion. Among them, the methanol extracts of six seaweeds were showed weak superoxide dismutase-like activities. The dichloromethane/acetone extracts obtained from Symphyocladia latiuscula was fractionated with $CH_2Cl_2$, n-hexane, 15% aq.MeOH, n-BuOH, $H_2O$. The 15% aq.MeOH soluble fraction exhibiting the strongest antioxidative activities was further purified by C18 column flash chromatography and reversed HPLC. The two active principles of Symphyocladia latiuscula were isolated and characterized as 2,3,6-tribromo-4,5-dihydroxybenzyl alcohol(1), 2,3,6-tribromo-4,5-dihydroxybenzyl methyl ether(2).
The antioxidant activities of methanol and dichloromethane/acetone extracts of twenty three seaweeds were tested by using 1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH) at a $100{\mu}g/ml$ concentrations. The dichloromethane/acetone extracts of three seaweeds(Symphyocladia latiuscula, Gloiopoltis furcata, Sagassum thunbergii), were found to be most effective in DPPH radical scavenging activity. The DPPH radical scavenging effect of these seaweeds was Symphyocladia latiuscula(85.82%), Gloiopoltis furcata(82.83%), Sagassum thunbergii(74.05%) in order. These seaweeds were evaluated using the pyrogallol UV-VIS spectrophotometeric method to generate superoxide anion. Among them, the methanol extracts of six seaweeds were showed weak superoxide dismutase-like activities. The dichloromethane/acetone extracts obtained from Symphyocladia latiuscula was fractionated with $CH_2Cl_2$, n-hexane, 15% aq.MeOH, n-BuOH, $H_2O$. The 15% aq.MeOH soluble fraction exhibiting the strongest antioxidative activities was further purified by C18 column flash chromatography and reversed HPLC. The two active principles of Symphyocladia latiuscula were isolated and characterized as 2,3,6-tribromo-4,5-dihydroxybenzyl alcohol(1), 2,3,6-tribromo-4,5-dihydroxybenzyl methyl ether(2).
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문제 정의
그러므로 free radical에 의한 과산화 반응은 세포막의 투과성을 항진시킬 뿐만 아니라 전반적인 세포독성을 초래하여 노화 현상이나 이에 따른 여러 가지 질환의 병리현상을 유도하며 발암 과정에도 관여한다* 따라서 과일과 채소에 많은 phenol성 화합물, flavone 유도체, 토코페롤, 아스코르브산, 셀레늄과 같은 항산화물질은 지방의 산화를 지연시키거나 방지하 며 암 심장 혈관계 질환 등을 예방 지연시킴으로써 노화방지에도 중요한 역할을 한다心 해양생물은 현재까지 탐색된 생물의 수가 전체 해양생물의 10%에도 미치지 못하고 있고, 해양이라는 특수환경에 서식하기 때문에 육상생물과는 다른 대사물질을 만들 가능성이 높다. 본 연구에서는 23여종의 해조류 추출물에 대한 DPPH radical 소거능과 pyrogallol의 자동산화반응 억제 효과를 이용한 SOD 유사 활성을 검색하여 항산화 활성을 탐색하고 그 원인물질을 규명하고자 하였다.
제안 방법
7697匂로 용매분획하였고 C18 reversed-phase vacuum flash chromatography를 한 후 C18-HPLC를 하여 2종의 화합물을 분리 . 정제하였다’ 그리고 *H-, "c-NM低을 측정하고 문헌치6와 비교하여 구조를 결정하였다.
각 시료 0.2ml에 pH 8.5로 보정한 Tris HC1 bufer 3ml와 7.2mM pyrogaUol 0.2ml를 가하고 25℃에서 10분간 방치 후 IN HC1 1ml로 반응 정지시킨 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다.
순차적으로 추출하였다. 각 시료에 대한 용매 추출물은 회전진공 농축기 (EYELA, N-N series)로 감압농축시켜 용매를 제거하고 각각의 농축물을 얻었다. 보라우무의 CHzCL/Acetone 추출물(1.
각 시료에 대한 용매 추출물은 회전진공 농축기 (EYELA, N-N series)로 감압농축시켜 용매를 제거하고 각각의 농축물을 얻었다. 보라우무의 CHzCL/Acetone 추출물(1.9787g) 은 CH2CI2, «-Hexane(0.2594g) 15% aqueous MeOH(0.8852g), »-BuOH(0.0644g), 压0(0.7697匂로 용매분획하였고 C18 reversed-phase vacuum flash chromatography를 한 후 C18-HPLC를 하여 2종의 화합물을 분리 . 정제하였다’ 그리고 *H-, "c-NM低을 측정하고 문헌치6와 비교하여 구조를 결정하였다.
추출한 후 MeOH로 추출하여 각각의 시료엑스를 얻었다. 이를 대상으로 100陽 /ml(final cone.) 농도에서 DPPH(l, l-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl) free radical 소거 활성을 검색하였다. 실험 결과는 3종의 시료에서 유의성 있는 라디칼 소거 활성이 관찰되었다.
채집한 해조류는 민물로 표면의 염분을 제거한 후 저온열풍 건조기(304TC)로 건조한 다음 추출관에 넣고 48시간 동안 CH2CI2와 Acetone 혼합용매로 추출한 다음 MeOH로 순차적으로 추출하였다. 각 시료에 대한 용매 추출물은 회전진공 농축기 (EYELA, N-N series)로 감압농축시켜 용매를 제거하고 각각의 농축물을 얻었다.
대상 데이터
경남 기장군과 부산 영도 중리에서 23종의 해조류를 채집하여 먼저 CH2CWAcetone 로 추출한 후 MeOH로 추출하여 각각의 시료엑스를 얻었다. 이를 대상으로 100陽 /ml(final cone.
본 실험에 사용한 해조류는 경남 기장군과 영도 중리에서 2002년 2~3월 중에 채집하였다.
데이터처리
그리고 각 농도별 시료(10"g/ml~ 100“g/ml) 5(楓와 제조한 DPPH용액을 혼합하여 10분간 상온에서 반응시킨 후 518nm에서 흡광도를 측정한다. 시료를 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 유리라디칼 소거 활성을 백분율로 나타내었으며 3회 반복 실험하여 얻은 결과를 평균한 값으로 나타내었다.
성능/효과
실험 결과는 3종의 시료에서 유의성 있는 라디칼 소거 활성이 관찰되었다. Symphyocladia 厨 "sc 汕(보라우무), Gloiopoltis 龙 rem(불등풀가사리), Sagassum 〃次沥ergz'i(지충이) CHzCleAcetone 추출물에서 L-ascorbic acid(96.64%)의 효과와 필적할 만큼의 각각 85.82%, 82.83%, 74.05%의 효과를 나타 내었다. 또한 Sargassum sp.
또한 Sargassum sp. (모자반)과 Symphyocladia 小興汕(보라우무)의 메탄올 추출물에서 63.99%, 56.83%의 DPPH radical 소거 효과가 확인되었다.이는 합성항산화제로 널리 사용되고 있는 BHT(55.
12/阐ml과 505/侣/ml였다. 이는 항산화제인 L-ascorbic acid (1.25闸ml), a-tocopherol(6.99/zg/ml), BHT07.84阐ml)의 I*)과 비교할 때 보라우무에서 분리한 화합물의 DPPH 라디칼 소거 활성이 매우 우수한 것을 확인할 수 있었다. 이것으로 보라우무조추출물의 항산화 활성은 화합물 1과 화합물 2에 의해 기인됨을 추정할 수 있다.
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