[논문]배양액의 조성차이에 따른 인간 배아 줄기세포의 계대 배양에 관한 비교 연구

안희진; 김희선; 김윤영; 설혜원; 오선경; 서창석; 김석현; 최영민; 문신용

배양액의 조성차이에 따른 인간 배아 줄기세포의 계대 배양에 관한 비교 연구 원문보기

안희진 (서울대학교 의학연구원 인구의학연구소) , 김희선 (서울대학교 의학연구원 인구의학연구소) , 김윤영 (서울대학교 의학연구원 인구의학연구소) , 설혜원 (서울대학교 의학연구원 인구의학연구소) , 오선경 (서울대학교 의학연구원 인구의학연구소, 의과대학 산부인과학교실) , 서창석 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) , 김석현 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) , 최영민 (서울대학교 의과대학 산부인과학교실) , 문신용 (서울대학교 의학연구원 인구의학연구소, 의과대학 산부인과학교실

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구실에서 확립된 SNUhES2에 각기 다른 조성을 가진 배양액을 첨가하여 3계대에 걸쳐 배양에 미치는 영향을 살펴보았다. 기본 배양액으로 Knockout-DM侣M과 DM但M-F12을 사용하였으며, 기본 배양액에 fetal bovine serum (FBS, Hyclone)과 serum replacement (SR, Gibco)을 따로 첨가하여 4가지 종류 (KO-DMEM/FBS, KO-DMEM/SR, DMEM-F12/FBS & DMEM-F12/SR)의 배양액을 준비하였다.
종류와 첨가되는 물질의 조성이 다양해지고 있다. 이에 조성이 다른 배양액을 이용하여 보다 효과적인 인간 배아 줄기세포의 계대 배양 방법을 알아보고자 하였다.

제안 방법

각각의 배양액을 이용하여 SNUhES2를 3계대까지 배양하였다. 각 실험군의 배아 줄기세포군의 부착률과 분화률, 형태와 면적을 관찰하였으며, alkaline phosphatase 활성도와 SSEA-1, 3 & 4의 발현여부, 그리고 Oct-4 mRNA의 발현여부를 확인하여 배아 줄기세포의 미분화 특성을 확인하였다.

대상 데이터

걸쳐 배양에 미치는 영향을 살펴보았다. 기본 배양액으로 Knockout-DM侣M과 DM但M-F12을 사용하였으며, 기본 배양액에 fetal bovine serum (FBS, Hyclone)과 serum replacement (SR, Gibco)을 따로 첨가하여 4가지 종류 (KO-DMEM/FBS, KO-DMEM/SR, DMEM-F12/FBS & DMEM-F12/SR)의 배양액을 준비하였다. SR이 첨가된 배양액에는 bFGF를 첨가하였다.

성능/효과

7%). KO-DMEM/FBS 와 DMEM-F12/FBS의 실험군의 경우 조기 분화에 의해 3계대 이상의 계대 배양 유지가 불가능 하였다 KO-DMEM/SR과 DMEM-F12/SR 실험군 간의 배양 양상을 비교해 보면 두 실험군 간의 부착률과 세포분열에 따른 세포군 면적에서는 통계학적으로 유의한 차이가 없었다. 그러나 현미경상에서 DMEM-F12/ SR 실험군의 세포간 간격이 KO-DMEM/SR 실험군보다 조밀하게 관찰되었다.
그러나 현미경상에서 DMEM-F12/ SR 실험군의 세포간 간격이 KO-DMEM/SR 실험군보다 조밀하게 관찰되었다. 그러나 계대 배양 7일후의 배아 줄기세포군의 부분적인 분화률에선 DMEM-F12/SR 실험군이 KO-DMEM/SR 실험군보다 높게 나타났다 (30.7% Vs 7.1%). 두 실험군의 배아 줄기세포의 미분화 특성 확인 결과 alkaline phosphatase 및 SSEAV가 강하게 발현되었으며, SSEA-3는 부분적으로 발현되고 SSEA-1 은 발현되지 않았다.
1%). 두 실험군의 배아 줄기세포의 미분화 특성 확인 결과 alkaline phosphatase 및 SSEAV가 강하게 발현되었으며, SSEA-3는 부분적으로 발현되고 SSEA-1 은 발현되지 않았다. 또한 두 실험군에서 모두 Och4 mRNA가 강하게 발현됨으로써 배아 줄기세포가 미분화 특성을 유지하고 있음을 확인할 수 있었다.
두 실험군의 배아 줄기세포의 미분화 특성 확인 결과 alkaline phosphatase 및 SSEAV가 강하게 발현되었으며, SSEA-3는 부분적으로 발현되고 SSEA-1 은 발현되지 않았다. 또한 두 실험군에서 모두 Och4 mRNA가 강하게 발현됨으로써 배아 줄기세포가 미분화 특성을 유지하고 있음을 확인할 수 있었다.
배아 줄기세포군의 부착률은 KO-DMEM/SR과 DMEM-F12/SR 실험군에 비해 각 배양액에 FBS를 첨가한 두 군에서 현저하게 낮게 나타났다 (92.2% and 86.4% Vs 15% and 6.7%). KO-DMEM/FBS 와 DMEM-F12/FBS의 실험군의 경우 조기 분화에 의해 3계대 이상의 계대 배양 유지가 불가능 하였다 KO-DMEM/SR과 DMEM-F12/SR 실험군 간의 배양 양상을 비교해 보면 두 실험군 간의 부착률과 세포분열에 따른 세포군 면적에서는 통계학적으로 유의한 차이가 없었다.
본 실험 결과, SNUlmES2을 이용한 실험에서 배양액내 serum replacement 성분이 fetal bovine serum보다 인간 배아 줄기세포의 계대 배양에 보다 효과적이었으며, Knockout-DMEM과 DMEM-F12 의 기본 배양액 간에서는 DMEM-F12 배양액에서 배아 줄기세포군의 부분적 분화률이 높게 나타난것을 제외하고는 미분화 특성을 유지하는데는 차이가 없는 것으로 나타났다.

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증

배양액의 조성차이에 따른 인간 배아 줄기세포의 계대 배양에 관한 비교 연구 원문보기

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

제안 방법

대상 데이터

성능/효과

이 논문을 인용한 문헌

관련 콘텐츠

원문 보기

이 논문과 함께 이용한 콘텐츠

AI-Helper ※ AI-Helper는 오픈소스 모델을 사용합니다.

선택된 텍스트

연합인증

배양액의 조성차이에 따른 인간 배아 줄기세포의 계대 배양에 관한 비교 연구 원문보기

AI 본문요약 엑셀 다운로드 AI-Helper

문제 정의

제안 방법

대상 데이터

성능/효과

이 논문을 인용한 문헌

관련 콘텐츠

원문 보기

이 논문과 함께 이용한 콘텐츠

AI-Helper ※ AI-Helper는 오픈소스 모델을 사용합니다.

선택된 텍스트

AI 본문요약
AI-Helper