[논문]젖소의 환경성 유방염 원인체인 그람음성균 분포 및 E. coli의 혈청형 조사

이은실; 강현미; 문진산; 장금찬; 이희수; 주이석; 정충일

젖소의 환경성 유방염 원인체인 그람음성균 분포 및 E. coli의 혈청형 조사 원문보기

이은실 (건국대학교 축산대학) , 강현미 (국립수의과학검역원) , 문진산 (국립수의과학검역원) , 장금찬 (국립수의과학검역원) , 이희수 (국립수의과학검역원) , 주이석 (국립수의과학검역원) , 정충일 (건국대학교 축산대학)

본 연구는 젖소 유방염의 환경성 원인체인 그람음성균의 분포와 E. coli의 항생제 내성 및 사람 식중독과의 연관성을 조사하기 위해 E. coli 혈청형에 대해 조사한 바, 2001년과 2003년 그람음성균의 주요 균 중 분포에서 많은 차이가 났으며, 2003년에는 E. coli가 31.8%로 가장 높은 것으로 나타났다. 체세포수에 따른 그람음성균의 분포율에서는 1백만 cells/ml 이하가 65.3%로 가장 높았으며, 체세포수 3백만 이상의 유즙에는 10.8%만이 분포하고 있는 것으로 나타났다. 또한, E. coli의 항생제 내성율 양상에서는 페니실린, 클록싸신, 세팔로틴등이 70%이상의 높은 내성율을 나타내었으며, E. coli 혈청형에서는 O23, O111, O157과 같은 주요 장관출혈성 E. coli 식중독균은 분리되지 않았다.

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문제 정의

또한, 발생 유방염 원인체는 목장의 사양 관리 방식 및 유방염 관리방법에 따라서 변화할 수 있기 때문에 유방염 원인체에 대한 주기적인 모니터링이 필요하고, 유방염 감염우의 경우 젖소의 건강과 고품질 우유 생산을 위해서는 유방염 원인체별로 효과적인 항생제를 선발하여 항생제 치료율을 높이고, 새로운 내성균주의 확산을 방지해야 한다. 따라서, 본 연구의 목적은 젖소 유방염유에서 환경성 유방염 원인체의 분포 및 주요 항생제에 대한 내성 실태를 조사하고, 유즙과 사람의 식중독과의 연관성을 조사하고자 유즙에서 분리한 E coil에 대해 혈청형을 조사하였다.

제안 방법

Blood agar(KOMED, KOREA)에 유즙을 접종하여 37℃에서 24시간 동안 배양한 다음, 그람음성균으로 의심되는 집락에 대해서 그람염색 및 생화학적 실험을 실시하였으며, Vitek System(bioMerieux, U.S.A)의 GNI+ card를 이용하여 균을 동정하였다.
Group O-sera(Set 1), Group H-sera(Sel2)와 Group 0 seFa(Altemative)로 구성된 Eschericia coli antisera kit(DENKA SEIKEN, UK)를 이용하여 분리된 46주의 E coli에 대해 혈청형을 조사하였다. O-antigen type과 H-antigen type을 조사하기 위해 균을 불활화시키고 각각 slide aggultination method와 tube method를 이용하였다.
체세포수는 Fossomatic series 4000(Foss Electronic Co., Denmark)을 이용하여 측정하였으며, 체세포수 200, 000cells/ml의 시료에 대해 유방염 원인균 분리를 시도하였다.

이론/모형

Kirby-Bauei(1996)의 디스크 확산법(3)에 따라 모든 균의 항생제 감수성을 조사하였다. 즉, 시료를 Muller-Hinton agar(Difco, USA)에 접종하고 항생제 디스크를 배지 위에 떨어뜨린 다음, 37℃에서 18시간 동안 배양하였다.
O-antigen type과 H-antigen type을 조사하기 위해 균을 불활화시키고 각각 slide aggultination method와 tube method를 이용하였다.
즉, 시료를 Muller-Hinton agar(Difco, USA)에 접종하고 항생제 디스크를 배지 위에 떨어뜨린 다음, 37℃에서 18시간 동안 배양하였다. 항생제 감수성 결과 판독은 Nation이 Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS, 2004)의 기준(4)을 따랐다.

성능/효과

8%만이 분포하고 있는 것으로 나타났다. 또한, 유즙의 항생제 내성과 사람 식중독의 연관성을 알아보기 위해 E coli의 항생제 내성 양상과 혈청형을 조사한 결과 페니실린, 클록싸신, 세팔로틴은 70% 이상의 높은 내성을 나타내었고, 반면에 암피실린, 겐타마이신, 아미카신 등에 대해서는 내성율이 낮은 것으로 나타났다. E.
coil가 3L8%로 가장 많이 분포하는 것으로 나타났다, 이와 같이 그람음성균의 주요 균종의 분포가 연도별 차이가 많이 나는 것은 계절별, 지역별, 목장별, 시료 채취 방법 등 다양한 요인에 의한 것으로 사료된다. 체세포수에 따른 그람음성균의 분포율에서는 1백만 celk/ml이하가 653%로 가장 높았으며, 체세포수 3백만 이상의 유즙에서 10.8%만이 분포하고 있는 것으로 나타났다. 또한, 유즙의 항생제 내성과 사람 식중독의 연관성을 알아보기 위해 E coli의 항생제 내성 양상과 혈청형을 조사한 결과 페니실린, 클록싸신, 세팔로틴은 70% 이상의 높은 내성을 나타내었고, 반면에 암피실린, 겐타마이신, 아미카신 등에 대해서는 내성율이 낮은 것으로 나타났다.

후속연구

또한, 유즙의 항생제 내성과 사람 식중독의 연관성을 알아보기 위해 E coli의 항생제 내성 양상과 혈청형을 조사한 결과 페니실린, 클록싸신, 세팔로틴은 70% 이상의 높은 내성을 나타내었고, 반면에 암피실린, 겐타마이신, 아미카신 등에 대해서는 내성율이 낮은 것으로 나타났다. E. coli 혈청형 조사에서는 023, 0111, 0157과 같은 주요 장관출혈성 E coli 식중독균은 분리되지 않았으나, 0159 혈청형 10주가 분리되어 추후 PCR을 이용한 독소형 검출 시험등 유방염 원인체에 대한 지속적인 모니터링과 조사가 필요할 것으로 사료된다.
의한 유선내 감염은 현저히 증가하고 있는 추세다(2). 또한, 발생 유방염 원인체는 목장의 사양 관리 방식 및 유방염 관리방법에 따라서 변화할 수 있기 때문에 유방염 원인체에 대한 주기적인 모니터링이 필요하고, 유방염 감염우의 경우 젖소의 건강과 고품질 우유 생산을 위해서는 유방염 원인체별로 효과적인 항생제를 선발하여 항생제 치료율을 높이고, 새로운 내성균주의 확산을 방지해야 한다. 따라서, 본 연구의 목적은 젖소 유방염유에서 환경성 유방염 원인체의 분포 및 주요 항생제에 대한 내성 실태를 조사하고, 유즙과 사람의 식중독과의 연관성을 조사하고자 유즙에서 분리한 E coil에 대해 혈청형을 조사하였다.

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