[논문]진균(Fungus)에 감염된 질증 환자에서 젖산균에 관한 연구

박미순; 장병수

진균(Fungus)에 감염된 질증 환자에서 젖산균에 관한 연구
A Study on Lactobacilli associated with Fungus Infection in Vaginosis 원문보기

박미순 (한국임상의학연구소 병리과) , 장병수 (한서대학교 보건학부 피부미용학과)

질염 환자의 질분비물 도말에서 광학현미경상에서 고배율로 관찰한 결과 정상 상피세포에서는 질내 정상 pH를 유지하기 위해 무수한 젖산균의 존재를 확인할수 있었다. 그러나 저배율, 고배율의 광학현미경상에서 진균에 감염된 세포 주변에서 젖산균(lactobacilli)은 관찰되지 않았다. 주사전자 현미경 상에서 Candida albicans는 기능을 탈락한 상피세포의 세포질에 기생하며, biofilm의 성장환경을 만들며, budding을 통해 2차 딸세포를 형성하며, 성장과 증식을 끊임없이 반복함을 확인하였다. 성장과 재생이 주기적으로 일어나지 않은 면역력이 약화된 임산부나, 호르몬의 부족으로 인한 위축성 질염 환자는 상피세포층이 떨어지면서 나오는 글리코겐을 이용해 질내에 존재하는 lactobacilli균이 젖산을 풍부하게 만들 수 없으므로 감염증 발생이 더 높아진 것으로 사료된다.

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문제 정의

그러나 질경검사를 통하여 직접 채취한 질 점막 찰과 검체물에 존재하는 탈락된 질 상피세포와 다양한 미생물들의 세포학적 미세구조적 특성에 대한 연구는 미흡한 상황이다. 본 연구는 질 찰과 검체물에서 Candida albicans의 감염 유무에 따른 정상세포와 진균에 감염된 세포의 성장환경에 따른 젖산균의 분포를 확인하고자 하였다.

제안 방법

고정이 끝난 재료는 인산완충용액(4℃, 0.4 M phosphate buffer, pH 7.4)으로 3회 수세한 다음, ethanol 농도(70%, 80%, 90%, 95%, 100%) 상승순으로 탈수하여 isoamyl acetate로 치환하였다. 처리된 각각의 재료는 임계점건조기(critical point dryer, Hitachi SCP-Ⅱ, Japan)에서 건조시킨 후, ion coater(JFC-1100)를 사용하여 20 ㎚ 두께로 금 도금(gold coating)한 다음 주사 전자현미경(JSM-840 A, Hitachi, Japan)으로 20 kV에서 관찰하였다.
액상 Vial에 들어있는 시료를 전자현미경 시료 제작을 위하여 원심분리기(HA1000-6,Hanil, Korea)로 1,000rpm에서 원심분리 시킨 후 상등액은 버리고 침전된 시료만 남긴 후 2.5% paraformaldehyde-glutaraldehyde(4℃, phosphate buffer, pH 7.4)로 2시간 동안 전고정하였다. 이어서 위와 동일한 방법으로 원심분리 시킨 후 인산완충용액(4℃, 0.
4)으로 3회 수세한 다음, ethanol 농도(70%, 80%, 90%, 95%, 100%) 상승순으로 탈수하여 isoamyl acetate로 치환하였다. 처리된 각각의 재료는 임계점건조기(critical point dryer, Hitachi SCP-Ⅱ, Japan)에서 건조시킨 후, ion coater(JFC-1100)를 사용하여 20 ㎚ 두께로 금 도금(gold coating)한 다음 주사 전자현미경(JSM-840 A, Hitachi, Japan)으로 20 kV에서 관찰하였다.

대상 데이터

실험재료는 H병원에서 질내 염증성 질환으로 내원한 환자 중에 세균성 질증으로 Pap smear의 판독결과가 확인된 액상시료를 사용하였으며, 보건복지부 지정 공용기관 생명윤리위원회의 심의 승인(과제관리번호: P01-201405- BS-03)을 받은 후 진행하였다.

성능/효과

(그림. 1) 그러나 고배율의 광학현미경상에서 진균에 감염된 세포 주변에서 젖산균(lactobacilli)은 관찰되지 않았다. (그림.
(그림. 2) Candida albicans에 감염된 질 찰과 분비물인 편평상피 세포질은 케라틴 섬유들로 채워져 있었고, 세포소기관은 용해되거나 붕괴되어 있음이 관찰되었다.
염색을 실시한 다음 광학현미경으로 관찰한 결과 진균 감염(Candida albicans)을 확인할 수 있었다. 광학현미경 상에서 고배율로 관찰한 결과 정상 상피세포에서는 질내 정상 pH를 유지하기 위해 무수한 젖산균의 존재를 확인할 수 있었다. (그림.
주사전자 현미경 상에서 Candida albicans는 기능을 탈락한 상피세포의 세포질에 기생하며, biofilm의 성장환경을 만들며, budding을 통해 2차 딸세포를 형성하며, 성장과 증식을 끊임없이 반복함을 확인하였다.(그림.

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