초록 ▼

본 발명은 신선하거나 노화된 혈액 샘플을 사용하여 정확하고 정밀하게 백혈구를 감별 계수하고 서브군을 분석하기 위한 개선된 시약 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본 발명은 특히, 실온에서 하루 이상 저장되었던 노화된 혈액 샘플의 분석에 적용가능하므로 통상 최적 이하로 여겨지는 샘플로부터 정확하고 유용한 정보의 입수를 제공한다. 개선된 시약 조성물 및 방법은 특히 백혈구를 감별하기 위한 과산화 효소 및 방법과 관련되어 있다. 본 발명의 한가지 측면은 감별 계수하기 위해 과산화효소 방법을 수행하기 위한 개선된 수성시약 조성물을 포함한다.

본 발명은 신선하거나 노화된 혈액 샘플을 사용하여 정확하고 정밀하게 백혈구를 감별 계수하고 서브군을 분석하기 위한 개선된 시약 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본 발명은 특히, 실온에서 하루 이상 저장되었던 노화된 혈액 샘플의 분석에 적용가능하므로 통상 최적 이하로 여겨지는 샘플로부터 정확하고 유용한 정보의 입수를 제공한다. 개선된 시약 조성물 및 방법은 특히 백혈구를 감별하기 위한 과산화 효소 및 방법과 관련되어 있다. 본 발명의 한가지 측면은 감별 계수하기 위해 과산화효소 방법을 수행하기 위한 개선된 수성시약 조성물을 포함한다. 다른 측면은, 특히 분석이 자동 혈액 분석기 및 유동 혈구 계수 시스템 상에서 수행되는 경우, 린스 잔여물의 역작용을 경감시키고 분석 과정을 합리화하고 경제적으로 하기 위해 용혈 계면활성제가 없는 린스 용액 및 린스 사이클의 사용을 포함한다. 본 발명의 조성물 및 방법은 전혈 샘플의 감별 분석을 위한 임상학적으로 유용한 자료를 제공한다.

대표청구항 ▼

a) (i) 혈액 샘플중의 적혈구 세포는 용해시켜 헤모글로빈을 방출시키거나 백혈구 세포군은 용해시키지 않기에 효과적인 농도의 비이온성 폴리에특실레이트 계면 활성제, (ⅱ) 혈액 샘플중의 적혈구 세포는 용해시키나 백혈구 세포군은 용해시키지 않기에 효과적인 농도의 음이온성 또는 쯔비터 이온성의 이온성 계면활성제,(ⅲ) 혈액 샘플중의 백혈구 세포는 화학적으로 가교결합시키나 용해성 적혈구 세포는 가교결합시키지 않기에 효과적인 농도의 포름알데히드 또는 파라포름알데히드, (ⅳ) 혈액 샘플중 임파구의 측정가능성을 증가시키게 효과적인 농도의 당

a) (i) 혈액 샘플중의 적혈구 세포는 용해시켜 헤모글로빈을 방출시키거나 백혈구 세포군은 용해시키지 않기에 효과적인 농도의 비이온성 폴리에특실레이트 계면 활성제, (ⅱ) 혈액 샘플중의 적혈구 세포는 용해시키나 백혈구 세포군은 용해시키지 않기에 효과적인 농도의 음이온성 또는 쯔비터 이온성의 이온성 계면활성제,(ⅲ) 혈액 샘플중의 백혈구 세포는 화학적으로 가교결합시키나 용해성 적혈구 세포는 가교결합시키지 않기에 효과적인 농도의 포름알데히드 또는 파라포름알데히드, (ⅳ) 혈액 샘플중 임파구의 측정가능성을 증가시키게 효과적인 농도의 당 또는 당 알콜 및(v) 반응 혼합물의 pH를 약 6.9 내지 약 7.6의 중성 또는 중성에 근접하게 유지시키는 완충액 또는 완충액 혼합물을 포함하는 수성 시약 조성물과 전혈 샘플을 혼합시켜 균질한 반응 혼합물을 형성시키는 단계; (b) 단계 a)의 반응 혼합물을 약 60℃ 내지 약 75℃로 가열시켜 샘플중의 적혈구 세포를 용해시키고 백혈구 세포를 고정시키는 단계; 및 (c) 반응 혼합물중의 한 분획 이상의 백혈구 세포를 분획을 염색시켜 현탁액중 염색된 백혈구군 및 염색되지 않은 백혈구군을 수득하는 단계를 포함하고, 수성시약 혼합물 중 비이온성 계면활성제 및 이온성 계면활성제의 존재가 신선한 혈액 및 하루 이상 동안 실온에서 저장되었던 노화된 혈액 샘플에 대하여 단계 c)를 따른후 백혈구에 대해 정확하고 신뢰할만한 감별계수 결과를 제공하는, 혈액 샘플중 백혈구 서브군의 내인성 과산화효소 활성을 측정하는 것에 근거하여 적혈구 및 백혈구를 함유하는 신선하거나 노화된 전혈 샘플에 대해 백혈구를 감별 계수하고 및 서브군을 분석하기 위한 개선된 방법.