IPC분류정보
| 국가/구분 |
한국(KR)/등록특허
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| 국제특허분류(IPC8판) |
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| 출원번호 |
10-2001-7003167
(2001-03-12)
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| 공개번호 |
10-2001-0073152
(2001-07-31)
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| 등록번호 |
10-0443843-0000
(2004-07-30)
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| 국제출원번호 |
PCT/KR2000/000233
(2000-03-17)
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| 국제공개번호 |
WO2000073455
(2000-12-07)
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| 번역문제출일자 |
2001-03-12
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| DOI |
http://doi.org/10.8080/1020017003167
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발명자
/ 주소 |
- 최태진
/ 부산 해운대구 좌동 **** 대동타운 ***동 ****호
- 김영태
/ 부산 해운대구 좌동 ****번지 경남선경아파트 ***동 ****호
- 김대현
/ 부산광역시남구대연*동**-*현대오피스텔****호
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| 출원인 / 주소 |
- 주식회사 알진텍 / 부산광역시 남구 대연동 ***-*, 부경대학교 공동연구관 ***호
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| 대리인 / 주소 |
-
박종한;
이선희;
윤동열
(Park Chong Han)
-
서울 구로구 구로동 ***-* 에이스하이엔드타워 ***호(한림특허법률사무소);
서울 강남구 역삼*동 ***-** 여삼빌딩 ***호;
서울 금천구 가산동 ***-** 에이스 하이엔드타워*차, *층
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| 심사청구여부 |
있음 (2001-03-12) |
| 심사진행상태 |
등록결정(일반) |
| 법적상태 |
소멸 |
초록
본 발명은 형질전환된 미세조류를 이용하여 목적하는 외래 단백질을 경제적으로 생합성하기 위한 방법, 즉 목적하는 외래 단백질 유전자를 포함하는 DNA 벡터를 클로렐라 엘립소이데아 등의 원형질체에 형질전환시키고, 이를 대량 배양함으로써 외래 단백질을 경제적으로 생합성하기 위한 생물반응기로써 형질전환된 미세조류를 이용하는 방법에 관한 것이다. 더욱 자세하게는 본 발명은 플레오마이신(phleomycin)에 저항성을 부여하는 Sh ble 유전자를 선별표지(selection marker)로서 이용한다.
대표청구항
▼
(i) 미세조류 원형질체를 얻는 단계;(ii) 상기 미세조류와는 다른 생물체로부터 유래한, 목적하는 외래 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 벡터를 제작하는 단계;(iii) 상기 벡터를 상기 원형질체에 도입하여, 형질전환된 원형질체를 생산하는 단계; 및(iv) 목적하는 단백질을 생산하기 위해서, 상기 형질전환된 미세조류를 배양하는 단계를 포함하는 미세조류에서 목적하는 외래 단백질을 생합성하는 방법.제 1항에 있어서, 상기 배양단계의 다음단계로 미세조류로부터 단백질을 회수하는 단계를 더 포함하는 방법.제 1항에 있어서, 상기 단계 (
(i) 미세조류 원형질체를 얻는 단계;(ii) 상기 미세조류와는 다른 생물체로부터 유래한, 목적하는 외래 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 벡터를 제작하는 단계;(iii) 상기 벡터를 상기 원형질체에 도입하여, 형질전환된 원형질체를 생산하는 단계; 및(iv) 목적하는 단백질을 생산하기 위해서, 상기 형질전환된 미세조류를 배양하는 단계를 포함하는 미세조류에서 목적하는 외래 단백질을 생합성하는 방법.제 1항에 있어서, 상기 배양단계의 다음단계로 미세조류로부터 단백질을 회수하는 단계를 더 포함하는 방법.제 1항에 있어서, 상기 단계 (iii) 및 (iv) 사이에 항생제로 형질전환된 세포들을 선별하는 단계를 더 포함하는 방법.제 1항에 있어서, 상기 단계 (iii) 및 (iv) 사이에 형질전환된 원형질체에 세포벽을 재형성시키는 단계를 더 포함하는 방법.제 3항에 있어서, 상기 벡터는 형질전환체를 선별하기 위한 선별 표지(selection marker)로서 sh ble 유전자를 포함하고, 상기 항생제는 플레오마이신(phleomycin), 탈리소마이신(tallysomycin), 블레오마이신(bleomycin) 및 제오마이신(zeomycin)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.제 1항에 있어서, 상기 벡터는 콜리플라워 모자이크 바이러스(cauliflower mosaic virus) 35S 프로모터 및 클라미도모나스 RBCS2(Chlamydomonas RBCS2) 유전자 프로모터로 이루어진 군으로부터 선택된 프로모터를 포함하는 방법.제 1항에 있어서, 상기 미세조류는 해수 및 담수에 사는 클로렐라, 클라미도모나스(Chlamydomonas), 볼복스(Volvox), 케아토세로스(Cheatoceros), 패오닥틸룸(Phaeodactylum), 스켈렉톤네마(Skelectonema), 나비쿨라(Navicula), 칼로네이세(Caloneise), 니츠스키아 (Nitzschia), 탈라시오시라(Thalassiosira), 암포라(Amphora), 난노클로리스(Nannochloris), 난노클로롭시스(Nannochloropsis), 테트라셀미스(Tetraselmis), 둔나리엘라(Dunaliella), 스피루리나(Spirulina), 마이크로사이스티스(Microcystis), 오실라토리아(Oscillatoria), 트리코데스미누스(Tricodesminus), 이소크리오시스(Isochryosis), 파블로바(Pavlova), 디노피새에(Dinophyseae) 중 하나인 방법.제 1항에 있어서, 상기 목적하는 외래 단백질이 박테리아, 균류(fungi), 동물, 식물 또는 어류로부터 유래함을 특징으로 하는 방법.제 8항에 있어서, 상기 목적하는 외래 단백질은 넙치 성장 호르몬인 방법.목적하는 외래 단백질을 코딩하는 유전자 및 형질전환체를 선별하기 위한 선별표지로서 Sh ble 유전자를 포함하는, 미세조류에서 목적하는 외래 단백질을 생합성하기 위한 재조합 DNA 벡터.목적하는 외래 유전자 및 Sh ble 유전자가 미세조류의 게놈에 통합(integration)된, 목적하는 외래 단백질을 생합성하기 위한 형질전환된 미세조류.제 11항에 있어서, 상기 미세조류가 목적하는 외래 단백질 및 Sh ble 유전자를 발현시킬 수 있는 형질전환된 미세조류.제 11항 또는 제 12항의 형질전환된 미세조류에서 목적하는 외래 유전자를 발현킴시켜 생산하는 목적하는 외래 단백질.제 11항의 미세조류 또는 제 13항의 단백질로 동물을 사육하는 방법.<
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