초록

본원 발명은 카르보디이미드 축합 화학을 이용한 당류-단백질 컨주게이션 반응을 수행하기 위한 개선된 방법을 개시한다.관련된 당류 또는 담백질 담체의 특성에 따라 달라질 수 있지만, 상기 컨주게이트의 품질은 반응 혼합물에 천천히 반응 성분들 중 어느 한 성분을 첨가함으로써 개선될 수 있다.본원 발명에 의해 개시된 방법들로 제조된 당류-단백질 컨주게이트를 포함하는 면역원성 조성물이 추가로 제공된다.

대표청구항 ▼

카르보디이미드의 축합 화학을 이용하여 나이세리아 메닌지티디스(N. meningitidis) 혈청형 A, 나이세리아 메닌지티디스 혈청형 C 또는 헤모필루스인플루엔자(H. influenzae) 제b형으로부터 유래된 박테리아 캡슐 당류를 단백질 담체에 컨주게이션시키는 방법으로서,여기서 나이세리아 메닌지티디스 혈청형 C 유래 당류는 카르복시기를 포함하거나, 아미노기, 카르복시기, 또는 아미노기 및 카르복시기를 포함하도록 유도체화되며,나이세리아 메닌지티디스 혈청형 A 또는 헤모필루스인플루엔자 제b형 유래 당류는 아미노기, 카르복시기, 또는

카르보디이미드의 축합 화학을 이용하여 나이세리아 메닌지티디스(N. meningitidis) 혈청형 A, 나이세리아 메닌지티디스 혈청형 C 또는 헤모필루스인플루엔자(H. influenzae) 제b형으로부터 유래된 박테리아 캡슐 당류를 단백질 담체에 컨주게이션시키는 방법으로서,여기서 나이세리아 메닌지티디스 혈청형 C 유래 당류는 카르복시기를 포함하거나, 아미노기, 카르복시기, 또는 아미노기 및 카르복시기를 포함하도록 유도체화되며,나이세리아 메닌지티디스 혈청형 A 또는 헤모필루스인플루엔자 제b형 유래 당류는 아미노기, 카르복시기, 또는 아미노기 및 카르복시기를 포함하도록 유도체화되며,상기 단백질 담체는 아미노기, 카르복시기, 또는 아미노기 및 카르복시기를 포함하거나, 아미노기, 카르복시기, 또는 아미노기 및 카르복시기를 포함하도록 유도체화되며, I) - 상기 단백질 담체가 아미노기 및 카르복시기 둘 모두를 포함하고, 상기 당류가 아미노기 또는 카르복시기 중 어느 하나를 포함하는 경우: a) 컨주게이션을 일으키는데 필요한 상기 당류 및 카르보디이미드의 분취액(aliquot)을 혼합하는 단계, 및 b) 필요한 상기 단백질 담체의 분취액을 35초 내지 6시간에 걸쳐 첨가하는 단계를 포함하며;II) - 상기 당류가 아미노기 및 카르복시기 둘 모두를 포함하고, 상기 단백질 담체가 아미노기 또는 카르복시기 중 어느 하나를 포함하는 경우:a) 컨주게이션을 일으키는데 필요한 상기 단백질 담체 및 카르보디이미드의 분취액을 혼합하는 단계, 및b) 필요한 상기 당류의 분취액을 35초 내지 6시간에 걸쳐 첨가하는 단계를 포함하며;III) - 상기 당류가 아미노기 및 카르복시기 둘 모두를 포함하고, 상기 단백질 담체가 아미노기 및 카르복시기 둘 모두를 포함하는 경우:a) 상기 단백질 담체 및 당류를 혼합하는 단계, 및b) 컨주게이션을 일으키는데 필요한 상기 카르보디이미드의 분취액을 35초 내지 6시간에 걸쳐 첨가하는 단계를 포함하며,여기서 상기 단백질 담체 대 당류의 초기 비가 4:1 내지 1:1(w/w)인 방법.