초록 ▼

◦ 구제역 백신항원 제조용 부유세포 배양조건 확립
- 플라스크에서 1리터까지, 일회용배양백에서 20리터, 바이오리액터에서 30리터까지 부유 세포배양시 3일만에 초기세포수의 10배까지 배양 확인(통상적기준 2~7×10⁶/㎖에 적합)

◦ 백신후보주(O형 진천주) 바이러스 증식조건 확립
- O형 진천주 최적증식 조건(바이러스 접종 전후 배지교체비율, 바이러스접종시 최적세포수, 바이러스 접종 MOI, 바이러스 채독시간 등)을 확립하여 바이러스상층액 기준으로 최대 4㎍/㎖ 이상의 백신 항원을 회수(

◦ 구제역 백신항원 제조용 부유세포 배양조건 확립
- 플라스크에서 1리터까지, 일회용배양백에서 20리터, 바이오리액터에서 30리터까지 부유 세포배양시 3일만에 초기세포수의 10배까지 배양 확인(통상적기준 2~7×10⁶/㎖에 적합)

◦ 백신후보주(O형 진천주) 바이러스 증식조건 확립
- O형 진천주 최적증식 조건(바이러스 접종 전후 배지교체비율, 바이러스접종시 최적세포수, 바이러스 접종 MOI, 바이러스 채독시간 등)을 확립하여 바이러스상층액 기준으로 최대 4㎍/㎖ 이상의 백신 항원을 회수(통상적인 백신제조사 기준 2㎍/㎖ 이상 달성)
- 바이러스접종량 0.01 MOI 기준으로 채독시간이 늦춰지면 바이러스 역가가 큰 폭으로 감소하여 바이러스접종 12~16시간 후 채독이 요구됨

◦ 백신후보주(O형 진천주) 불활화 조건 확립
- 불활화 온도 37℃에서는 1mM 이상, 26℃에서는 2mM 이상의 농도에서 16시간 이전에 불활화 완료(OIE 기준 충족)

◦ 백신후보주(O형 진천주) 농축·정제 조건 확립
- 농축·정제법 3종(PEG/AS/UF)중 PEG법이 바이러스입자 회수율이 높고 NSP잔량이 적어서 가장 우수한 농축·정제법으로 판단됨(PEG법이 전세계 구제역 백신제조사에서 가장 범용적으로 사용하는 이유를 재확인)
- PEG 7.5% 농도를 처리할 경우에 백신항원 회수율이 가장 높게 나타남(2㎍/㎖ 이상 회수)
- 신규소재 입자크기분별 방식 크로마토그래피법을 적용한 바이러스 정제법 제시
- 연속방식흡광도측정장치 이용하여 바이러스상층액 적용가능한 바이러스입자 정량법 구축

(출처 : 연구결과 요약 2p)

Abstract ▼

We are developing original techniques related to the local FMD vaccine manufacturing scheme. We tried to establish conditions for culturing suspension cells in large scale and concentrating and purifying vaccine antigen derived from suspension cells. The suspension cell was successfully grown in RM

We are developing original techniques related to the local FMD vaccine manufacturing scheme. We tried to establish conditions for culturing suspension cells in large scale and concentrating and purifying vaccine antigen derived from suspension cells. The suspension cell was successfully grown in RM bag(20L) and in bioreactor(up to 50 liter). The number of cells multiplied by ten-fold after 3 days starting from 3×10⁵/㎖. The recovery of antigen was more than 2㎍/㎖ which is normally criteria for FMDV vaccine manufacturing process. The antigen produced in this study met the criteria for FMD virus inactivation by OIE. The purity of antigen was satisfactory in that the amount of NSP remnant in antigen concentrated by PEG was less than the minimal amount that could induce antibodies to NSP in goats. Therefore, it is probable that even if we immunize the livestock with those antigen produced in this study more than five times, they would not elicit antibodies to NSP, enabling to differentiated from infected livestock in the field.

(출처 : 영문초록 23p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 농림축산검역검사기술개발 연구과제 최종결과보고서 Final Report (FR) ... 2
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
• 1. 연구배경 ... 3
• 2. 연구최종목표 ... 4
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 4
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 4
• 1. 재 료 ... 4
• 2. 연구전략 및 방법 ... 4
• Ⅲ. 연구결과 ... 5
• 1. 구제역 백신항원 제조용 부유세포 배양조건 확립 ... 5
• 2. 구제역바이러스 혈청형별 146S 회수율 비교 ... 9
• 3. 백신후보주(O형 진천주) 바이러스 증식조건 확립 ... 10
• 4. 백신후보주(O형 진천주) 바이러스 불활화·농축·정제 공정기술 확립 ... 15
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 21
• 1. 구제역 백신항원 제조용 부유세포 배양조건 확립 ... 21
• 2. 백신후보주(O형 진천주) 바이러스 증식조건 확립 ... 21
• 3. 백신후보주(O형 진천주) 불활화 조건 확립 ... 21
• 4. 백신후보주(O형 진천주) 농축·정제 조건 확립 ... 21
• Ⅴ. 고 찰 ... 21
• Ⅵ. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 22
• Ⅶ. 주요연구과제 변경사항 ... 22
• Ⅷ. 참고자료 ... 22
• IX. 영문초록 ... 23
• 끝페이지 ... 23