초록 ▼

본 발명은 Ru(bpy) 표지된 단백질-일차 항체, 실험되는 바이오틴화된(biotinylated) 단백질-이차 항체, 및 실험되는 샘플의 완전한 반응; 항원, 항체, 및 마그네틱(magnetic) 입자를 포함하는 복합체를 형성하기 위한 스트렙타비딘(streptavidin)-코팅된 마그네틱 입자의 첨가; 상기 마그네틱 입자에 의해 전극 표면에 흡착; 디부틸 에탄올아민(dibutyl ethanolamine) 용액의 첨가를 이용한; 전기화학 방법의 수단에 의해 실험하는, 전기화학발광 면역분석(electrochemiluminescence

본 발명은 Ru(bpy) 표지된 단백질-일차 항체, 실험되는 바이오틴화된(biotinylated) 단백질-이차 항체, 및 실험되는 샘플의 완전한 반응; 항원, 항체, 및 마그네틱(magnetic) 입자를 포함하는 복합체를 형성하기 위한 스트렙타비딘(streptavidin)-코팅된 마그네틱 입자의 첨가; 상기 마그네틱 입자에 의해 전극 표면에 흡착; 디부틸 에탄올아민(dibutyl ethanolamine) 용액의 첨가를 이용한; 전기화학 방법의 수단에 의해 실험하는, 전기화학발광 면역분석(electrochemiluminescence immimmunoassay) 방법을 밝힌다. 또한 이에 상응하는 전기화학발광 면역분석 검출 키트를 밝힌다.

대표청구항 ▼

하기 단계를 포함하는, 전기화학발광(electrochemiluminescence) 면역분석(immunoassay) 방법:단계 1: 단백질에 대한 루테늄 피리딘(ruthenium pyridine)-표지된 일차 항체가 실험되고 그리고 단백질에 대한 바이오틴화된(biotinylated) 이차 항체가 실험되는 샘플에 효율적으로 반응하는 것이 실험되는 것을 가능하게 하거나, 또는 단백질에 대한 루테늄 피리딘-표지된 항체가 실험되고 그리고 바이오틴화된 항체가 실험되는 샘플에 효율적으로 반응하는 것이 실험되는 것을 가능하게 하고, 여기서 상기

하기 단계를 포함하는, 전기화학발광(electrochemiluminescence) 면역분석(immunoassay) 방법:단계 1: 단백질에 대한 루테늄 피리딘(ruthenium pyridine)-표지된 일차 항체가 실험되고 그리고 단백질에 대한 바이오틴화된(biotinylated) 이차 항체가 실험되는 샘플에 효율적으로 반응하는 것이 실험되는 것을 가능하게 하거나, 또는 단백질에 대한 루테늄 피리딘-표지된 항체가 실험되고 그리고 바이오틴화된 항체가 실험되는 샘플에 효율적으로 반응하는 것이 실험되는 것을 가능하게 하고, 여기서 상기 루테늄 피리딘의 구조는 하기와 같은 단계:;단계 2: 스트렙타비딘(streptavidin)으로 코팅된(coated) 마그네틱 입자들 (magnetic particles)을 첨가하고, 항원, 항체 및 마그네틱 입자를 포함하는 복합체를 형성하기 위한 반응을 가능하게 하고, 유동셀(flow cell)에서 상기 항체, 항원 및 마그네틱 입자를 포함하는 복합체가 마그네틱 입자를 통해 전극(electrode)의 표면으로 흡착되는, 상기 유동셀에 반응액을 빨아들이는(sucking) 단계;단계 3: 디부틸 에탄올아민(dibutyl ethanolamine) 용액을 첨가하고, 전압을 인가함으로써 ECL 반응을 시작하고, 그리고 광학검출기(optical detector)로 스캔된(scanned) 광학 신호들을 수집하는 단계; 단계 4: 농도 구배로 표준 용액을 제제화하고, 발광 강도(luminescence intensity)의 값에 있어서 변화에 대한 대수(logarithm) 및 농도에 대한 대수에 따라 용량-반응(dose-response) 곡선을 그리고, 그리고 계산에 의해 실험된 샘플에서 실험된 단백질의 농도를 구하는 단계;여기서 상기 마그네틱 입자는 2.8 μm의 직경을 가지는 폴리스티렌 (polystyrene) 입자이며;단계 1에서 반응 조건은 37℃에서 8 분 동안 액체상 상태 하에 반응시키는 것이며;단계 2에서 반응 조건은 37℃에서 8 분 동안 액체상 상태 하에 반응시키는 것이며;실험될 샘플은 혈청(serum), 소변(urine), 또는 조직액(tissue fluid)이며;실험될 단백질은 T3 트리요오드티로닌(triiodothyronine), ASA 항-정자(anti-sperm) 항체, 트로포닌 I(troponin I), T4 티록신(thyroxine), ACA 항카티오리핀(anticardiolipin) 항체, CKMB, TSH, AEA 항-자궁내막(anti-endometrium) 항체, FT3 자유 트리요오드티로닌(free triiodothyronine), AOA 항-난소(anti-ovarian) 항체, FT4 자유 티록신(free thyroxine), ATB 항-영양막(anti-trophoblast) 항체, 항-TM 갑상샘마이크로좀(thyroid microsomal) 항체, ZP 항-투명대(anti-zona pellucida) 항체, 항-TG 항-티로글로블린(anti-thyroglobulin) 항체, 항-HCG 항체, 인간 태반 락토진(human placental lactogen) , 항-TPO 갑상선 과산화효소(thyroid peroxidase) 항체, HCG, TOX 톡소플라즈마(toxoplasma) 항체, FSH, AFP 알파페토단백질(alpha-fetoprotein), CEA 암태아성 항원(carcinoembryonic antigen), PSA 전립선 특이 항원(prostate-specific antigen), FPSA 자유 전립선 특이 항원(free prostate-specific antigen), CMV 시토메갈로바이러스(cytomegalovirus) 항체, LH 황체형성호르몬(luteinizing hormone), HSV-1 단순포진바이러스(herpes simplex virus) 항체, PRL 프로락틴(prolactin), HSV-2 단순포진바이러스 항체, TES 테스토스테론(testosterone), RV 풍진바이러스(rubella virus) 항체, PRO 프로게스테론(progesterone), 페리틴(Ferritin), TOX-Ag 톡소플라즘 순환 항원(toxoplasm circulating antigen), E2 에스트라디올(estradiol), CA125, E3 에스트리올(estriol), CA153, CA199, HBsAg, NSE 뉴런특이에놀라아제(neuron-specific enolase), HBsAb, CA50, HBeAg, β2 마이크로글로블린(microglobulin), HBeAb, 콕삭키바이러스(Coxsackie virus) 항체, HBcAb, BGP 골 Gla 단백질(bone Gla protein),D-Pyr 데옥시피리디놀린( deoxypyridinoline), 비타민 D(vitamin D), 인슐린(insulin), PCIII III형 프로콜라겐(type III procollagen),C-펩타이드(C-peptide), IV 형 콜라겐(type IV collagen), 인슐린 항체, LN 라미닌(laminin), 글루카곤(glucagon), HA 히알루론산(hyaluronic acid), GAD-AB 글루타메이트 디카복실라아제(glutamate decarboxylase) 항체, Fn 피브로넥틴(fibronectin),인플루엔자 바이러스 B(influenza virus B), 파라인플루엔자 바이러스(parainfluenza virus), EB 바이러스, 홍역 바이러스(measles virus),미코플라즈마 뉴모니아((Mycoplasma pneumoniae), 결핵균(Mycobacterium tuberculosis),아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus), 멈프스 바이러스(mumps virus), HCV 바이러스, 인플루엔자 바이러스 A, 인간 면역 결핍 바이러스(human immunodeficiency virus), 클라미디아 뉴모니아(Chlamydia pneumoniae), 아데노바이러스(adenovirus), RSV 호흡기세포 융합 바이러스(respiratory syncytial virus), 에코바이러스(Echovirus), 및프로-가스트린-유리 펩타이드(pro-gastrin-releasing peptide), CYFRA21-1, AFP, APT, CA242, CA724, CA50, f-PSA, t-PSA, 자유 β-hCG(Free β-hCG), 또는 SCCA를 포함.