초록 ▼

본 발명은 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 동일한 공간 내에서 실시간 PCR (Polymerase Chain Reaction) 및 DNA 마이크로어레이(microarray)가 통합적으로 수행됨으로써 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석이 가능한 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석 방법에 의하면, 유전자형에 따라 수개 ~ 수십개의 반응 용기(튜브)를 필요로 하던 종래 기술의 불편함 및 비경제성을 해소할 수 있다. 또한, 이는 정량 분석에 적

본 발명은 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 동일한 공간 내에서 실시간 PCR (Polymerase Chain Reaction) 및 DNA 마이크로어레이(microarray)가 통합적으로 수행됨으로써 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석이 가능한 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석 방법에 의하면, 유전자형에 따라 수개 ~ 수십개의 반응 용기(튜브)를 필요로 하던 종래 기술의 불편함 및 비경제성을 해소할 수 있다. 또한, 이는 정량 분석에 적용하기 어려운 DNA 마이크로어레이의 단점 역시 해소하는 것이다. 특히, 본 발명에 따른 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석 방법은 반응 용기 안에서 실시간으로 DNA 칩 신호를 획득함으로써 정량 및 정성 분석이 용기 개봉 혹은 용기 세척 없이 가능하고, 감염성 질환 검사를 비롯, 약제내성, 체세포돌연변이, 단일염기변이 등 다양한 분자진단 영역에서 한 번에, 경제적이고 신뢰적으로 정량분석과 유전자형 검사를 동시에 수행할 수 있는 효과가 있다. 따라서, 본 발명에 따른 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석 방법은 정량 분석이던, 유전자형이던, 검사 종류에 구애 받지 않고 분자진단 전 영역에서 쉽게 사용될 수 있는 장점이 있다.

대표청구항 ▼

(a) 상부에 개구부가 형성된 반응 용기; 및 상기 개구부를 통해 상기 반응 용기에 탈부착 가능한 소자부;를 포함하며, 여기서 상기 소자부는, 상기 반응 용기의 개구부에 결합되는 캡; 및 상기 캡의 하부로 연장되어 형성된 로드;를 포함하며, 상기 로드에는 표면에 제3 프로브가 고정된 바이오칩이 구비되어 있는, 바이오 물질 검출용 소자를 준비하는 단계;(b) 상기 반응 용기 내로 제1 프로브-제2 프로브 복합체, 정방향(forward) 프라이머, 역방향(reverse) 프라이머, dNTP (deoxynucleotide triphosp

(a) 상부에 개구부가 형성된 반응 용기; 및 상기 개구부를 통해 상기 반응 용기에 탈부착 가능한 소자부;를 포함하며, 여기서 상기 소자부는, 상기 반응 용기의 개구부에 결합되는 캡; 및 상기 캡의 하부로 연장되어 형성된 로드;를 포함하며, 상기 로드에는 표면에 제3 프로브가 고정된 바이오칩이 구비되어 있는, 바이오 물질 검출용 소자를 준비하는 단계;(b) 상기 반응 용기 내로 제1 프로브-제2 프로브 복합체, 정방향(forward) 프라이머, 역방향(reverse) 프라이머, dNTP (deoxynucleotide triphosphate), 엑소뉴클레아제(exonuclease) 활성을 가지는 중합효소, 타겟 유전자를 포함하는 샘플 및 완충 용액을 포함하는 반응 용액을 첨가하는 단계로서, 여기서 상기 제1 프로브는 상기 샘플 내 타겟 유전자의 핵산서열에 상보적인 올리고뉴클레오타이드 서열을 포함하며, 제1 형광 신호를 발생시킬 수 있는 제1 형광체와 상기 제1 형광체를 소광시킬 수 있는 제1 소광체를 포함하며, 상기 제2 프로브는 상기 샘플 내 타겟 유전자의 핵산서열에 상보적인 올리고뉴클레오타이드 서열을 포함하지 않되, 상기 제3 프로브에 상보적인 올리고뉴클레오타이드 서열을 포함하며, 상기 정방향 프라이머 및 상기 역방향 프라이머는 상기 샘플 내 타겟 유전자를 증폭하기 위해 상기 타겟 유전자의 핵산서열에 상보적인 올리고뉴클레오타이드 서열을 포함하는 프라이머이며;(c) 상기 샘플 내 타겟 유전자의 변성 반응, 상기 샘플 내 타겟 유전자와 상기 복합체, 상기 정방향 프라이머 및 상기 역방향 프라이머의 혼성화 반응 및 엑소뉴클레아제(exonuclease) 활성을 가지는 중합효소에 의한 상기 프라이머의 신장 반응을 포함하는 중합효소연쇄반응을 수행하는 단계로서,상기 혼성화 반응을 통해 상기 타겟 유전자와 상기 복합체 중 상기 제1 프로브 사이에서만 혼성화 반응이 수행되며, 상기 엑소뉴클레아제(exonuclease) 활성을 가지는 중합효소에 의한 신장 반응을 수행하는 동안, 상기 복합체로부터 상기 제2 프로브 및 상기 제1 형광체가 분해되어 방출되며;(d) 상기 방출된 제2 프로브와 상기 바이오칩에 고정된 상기 제3 프로브가 혼성화한 후 상기 중합효소에 의해 상기 제3 프로브 상에서 상기 제2 프로브가 신장되는 단계로서,여기서 상기 제3 프로브는 제2 형광 신호를 발생시킬 수 있는 제2 형광체와 상기 제2 형광체를 소광시킬 수 있는 제2 소광체를 포함하며, 상기 제3 프로브 상에서 상기 제2 프로브가 신장됨에 따라 상기 제2 형광체로부터 상기 제2 소광체가 이격되어 발광이 일어나며; 및(e) 상기 제1 형광체에 의한 제1 형광 신호 및 상기 제2 형광체에 의한 제2 형광 신호를 검출하는 단계;를 포함하는 바이오 물질의 실시간 정량 및 정성 분석 방법.