초록 ▼

본 발명은 페스투카 아룬디나세아로부터 분리되어 비-당분해 효모에서 구성적으로 발현되는 재조합 프룩토실트랜스퍼라아제(FTF)를 사용하여 1-케스토스를 얻기 위한 산업적 규모의 방법을 개시하고 있다. 본 발명에서, 재조합 FTF 타입 수크로오스:수크로오스 1-프룩토실트랜스퍼라아제(1-SSTrec)는 숙주 피키아 파스토리스의 배양 상등액과 원상태의 세포 모두에서 구성적으로 안정하면서 고수율로 생산된다. 따라서 추가로 본 발명은 산업적 규모로 1-SST를 생산하기 위한 방법을 제공한다. 이때, 상기 재조합 효소는 수크로오스로부터 단쇄 프룩

본 발명은 페스투카 아룬디나세아로부터 분리되어 비-당분해 효모에서 구성적으로 발현되는 재조합 프룩토실트랜스퍼라아제(FTF)를 사용하여 1-케스토스를 얻기 위한 산업적 규모의 방법을 개시하고 있다. 본 발명에서, 재조합 FTF 타입 수크로오스:수크로오스 1-프룩토실트랜스퍼라아제(1-SSTrec)는 숙주 피키아 파스토리스의 배양 상등액과 원상태의 세포 모두에서 구성적으로 안정하면서 고수율로 생산된다. 따라서 추가로 본 발명은 산업적 규모로 1-SST를 생산하기 위한 방법을 제공한다. 이때, 상기 재조합 효소는 수크로오스로부터 단쇄 프룩토올리고당(FOS), 구체적으로는 1-케스토스를 양산하기 위해 사용된다. 본 발명의 방법은 합성된 FOS가 반응 혼합물 중 총 당의 55%(w/w)를 넘게 차지하고 1-케스토스 함량이 총 FOS 분율의 90%(w/w) 보다 높은 값에 달하는 전환율을 가능하게 하는 조건을 확립한다.

대표청구항 ▼

비-당분해 효모에서 유도제가 사용되지 않고, 글리세르알데히드-3-포스페이트 데히드로게나아제 프로모터(pGAP)의 전사 조절하에 구성적으로 발현된 페스투카 아룬디나세아(Festuca arundinacea) 유래의 재조합 수크로오스:수크로오스 1-프룩토실트랜스퍼라아제(1-SST)를 사용하여 생물반응기에서 수크로오스를 1-케스토스로 전환시키는 1-케스토스의 산업적 생산 방법으로서,상기 비-당분해 효모의 게놈에 통합된 상기 수크로오스:수크로오스 1-프룩토실트랜스퍼라아제(1-SST)를 코딩하는 유전자의 다수 카피를 함유하고,상기 생물반응기에

비-당분해 효모에서 유도제가 사용되지 않고, 글리세르알데히드-3-포스페이트 데히드로게나아제 프로모터(pGAP)의 전사 조절하에 구성적으로 발현된 페스투카 아룬디나세아(Festuca arundinacea) 유래의 재조합 수크로오스:수크로오스 1-프룩토실트랜스퍼라아제(1-SST)를 사용하여 생물반응기에서 수크로오스를 1-케스토스로 전환시키는 1-케스토스의 산업적 생산 방법으로서,상기 비-당분해 효모의 게놈에 통합된 상기 수크로오스:수크로오스 1-프룩토실트랜스퍼라아제(1-SST)를 코딩하는 유전자의 다수 카피를 함유하고,상기 생물반응기에서 수크로오스의 초기 농도가 500 내지 800 g/L인 것을 특징으로 하는 1-케스토스의 산업적 생산 방법.