초록 ▼

본 발명은 심장줄기세포의 다층세포시트 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 생분해성 천연고분자 하이드로젤을 3차원 지지체로 이용하여, 심장줄기세포를 하이드로젤 내로 함입시켜 3차원 단일 배양과정을 통하여 다층세포시트를 제조하는 방법을 제공하고자 한다. 본 발명의 다층 세포 시트는 제조하는데 특수한 기구가 필요하지 않으며, 물리적 특성이 좋아 다루기도 쉬우며, 세포 사이에 각종 성장 및 보호 인자 와 세포외 기질이 충분히 축적되어 이식 후 세포의 생존율을 높이며, 세포에 의해 유발된 수축에 의해 두께 또한 얇아 영양분 이동 또한 용이하

본 발명은 심장줄기세포의 다층세포시트 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 생분해성 천연고분자 하이드로젤을 3차원 지지체로 이용하여, 심장줄기세포를 하이드로젤 내로 함입시켜 3차원 단일 배양과정을 통하여 다층세포시트를 제조하는 방법을 제공하고자 한다. 본 발명의 다층 세포 시트는 제조하는데 특수한 기구가 필요하지 않으며, 물리적 특성이 좋아 다루기도 쉬우며, 세포 사이에 각종 성장 및 보호 인자 와 세포외 기질이 충분히 축적되어 이식 후 세포의 생존율을 높이며, 세포에 의해 유발된 수축에 의해 두께 또한 얇아 영양분 이동 또한 용이하다. 따라서, 상기 심장줄기세포의 다층세포시트는 심근 재생용 치료제로 유용하게 활용될 수 있을 것으로 예상된다.

대표청구항 ▼

(1) 심장줄기세포(cardiac stem cells; CSCs)를 분리하여 배양하는 단계;(2) 상기 배양된 2 × 106/ml 내지 5 × 106/ml 밀도의 심장줄기세포를 최종 농도 0.1% 내지 1%의 피브리노겐, 최종 농도 0.2 U/ml 내지 2 U/ml의 트롬빈 및 최종 농도 10 ㎍/ml 내지 500 ㎍/ml 항섬유소용해제(plasminogen activator inhibitor, PAI) 트란제믹산(tranexamic acid)이 함유된 용액 상태의 피브린 하이드로젤에 혼합한 후, 젤 상태로 전환시켜 상기 심장줄기세

(1) 심장줄기세포(cardiac stem cells; CSCs)를 분리하여 배양하는 단계;(2) 상기 배양된 2 × 106/ml 내지 5 × 106/ml 밀도의 심장줄기세포를 최종 농도 0.1% 내지 1%의 피브리노겐, 최종 농도 0.2 U/ml 내지 2 U/ml의 트롬빈 및 최종 농도 10 ㎍/ml 내지 500 ㎍/ml 항섬유소용해제(plasminogen activator inhibitor, PAI) 트란제믹산(tranexamic acid)이 함유된 용액 상태의 피브린 하이드로젤에 혼합한 후, 젤 상태로 전환시켜 상기 심장줄기세포를 상기 피브린 하이드로젤 내에 3차원적으로 균일하게 분포되도록 함입시키는 단계; (3) 상기 심장줄기세포가 3차원적으로 균일하게 분포되도록 함입된 피브린 하이드로젤을 물리적 지지가 유지되며, 세포-세포 간 접합과 세포-하이드로젤 고분자 간 접합을 유도하는 부착배양조건에서 배양하는 단계; 및(4) 상기 (3) 단계에서 배양된 피브린 하이드로젤을 물리적 지지가 배제된 부유배양조건에서 30분 내지 2시간 동안 배양하여, 세포-매개 하이드로젤 수축을 유도하고, 하이드로젤 내 수분을 방출시키는 단계를 포함하는 10층 내지 50층으로 이루어진 심장줄기세포의 다층세포시트 제조방법.