초록 ▼

본 발명은 세포에서 작은 RNA(small RNA)를 추출하는 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 종래 AGPC(Acid Guanidinium Thiocyanate-Phenol-Chloroform) RNA 추출방법을 변형시켜 small RNA만을 선택적으로 추출하는 방법에 관한 것이다. 종래 TRIzol을 이용한 AGPC 방법은 세포에서 모든 타입의 전체 RNA를 추출할 수 있으나 small RNA의 함량이 매우 적어 이를 농축하기 위한 또 다른 공정이 필요하며, 시판 중인 small RNA 분리 키트는 고비용이 소요된다는 단점

본 발명은 세포에서 작은 RNA(small RNA)를 추출하는 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 종래 AGPC(Acid Guanidinium Thiocyanate-Phenol-Chloroform) RNA 추출방법을 변형시켜 small RNA만을 선택적으로 추출하는 방법에 관한 것이다. 종래 TRIzol을 이용한 AGPC 방법은 세포에서 모든 타입의 전체 RNA를 추출할 수 있으나 small RNA의 함량이 매우 적어 이를 농축하기 위한 또 다른 공정이 필요하며, 시판 중인 small RNA 분리 키트는 고비용이 소요된다는 단점이 있다. 이에, 본 발명에 따른 small RNA 추출방법인 mirRICH는 기존 AGPC 방법을 변형시켜 추가 공정을 수행하지 않는 단순한 과정과 저비용으로 농축된 small RNA만을 선택적으로 추출할 수 있는 방법이며 시판 키트와 거의 동일한 정도의 small RNA 추출효율을 가지는바, NGS 및 마이크로RNA의 발현 연구 등의 다양한 분석 연구에 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

대표청구항 ▼

(a) 세포에 트리졸(TRIzol)을 처리하여 세포를 용해시킨 세포 용해물에 클로로포름(chloroform)을 처리하는 단계;(b) 상기 클로로포름이 처리된 세포 용해물을 원심분리한 후 수상(aqueous) 상층을 옮겨 이소프로판올(isopropanol)을 첨가하는 단계; (c) 원심분리 후 상청액을 제거하고 침전된 펠렛(pellet)을 과건조(over-dry)시키는 단계; 및(d) 상기 펠렛을 정제수에 현탁시키는 단계를 포함하는, 세포에서 작은 RNA(small RNA)를 추출하는 방법으로서, 상기 단계 (b)와 (c) 사이에 에

(a) 세포에 트리졸(TRIzol)을 처리하여 세포를 용해시킨 세포 용해물에 클로로포름(chloroform)을 처리하는 단계;(b) 상기 클로로포름이 처리된 세포 용해물을 원심분리한 후 수상(aqueous) 상층을 옮겨 이소프로판올(isopropanol)을 첨가하는 단계; (c) 원심분리 후 상청액을 제거하고 침전된 펠렛(pellet)을 과건조(over-dry)시키는 단계; 및(d) 상기 펠렛을 정제수에 현탁시키는 단계를 포함하는, 세포에서 작은 RNA(small RNA)를 추출하는 방법으로서, 상기 단계 (b)와 (c) 사이에 에탄올로 침전된 펠렛을 세척하는 단계는 생략되고,상기 단계 (c)에서 과건조는 상기 침전된 펠렛을 실온에서 1시간 이상 건조하는 것임을 특징으로 하는, 방법.