초록 ▼

본 발명은 합성 5′ UTR(untranslated region), 프로모터 및 조절 유전자를 포함하는 유전자 발현 카세트, 복제원점 및 상기 유전자 발현 카세트를 포함하는 재조합 벡터, 상기 재조합 벡터가 도입된 분리 불안(segregational instability)이 개선된 재조합 미생물, 상기 재조합 벡터를 도입하여 분리 불안이 개선된 재조합 미생물의 제조 방법 및 재조합 미생물 내 플라스미드 카피 수의 정량 조절 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 세포에 필수적인 번역 개시 인자를 코딩하는 유전자인 infA및 단백질 신

본 발명은 합성 5′ UTR(untranslated region), 프로모터 및 조절 유전자를 포함하는 유전자 발현 카세트, 복제원점 및 상기 유전자 발현 카세트를 포함하는 재조합 벡터, 상기 재조합 벡터가 도입된 분리 불안(segregational instability)이 개선된 재조합 미생물, 상기 재조합 벡터를 도입하여 분리 불안이 개선된 재조합 미생물의 제조 방법 및 재조합 미생물 내 플라스미드 카피 수의 정량 조절 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 세포에 필수적인 번역 개시 인자를 코딩하는 유전자인 infA및 단백질 신장 인자(EF-P)를 코딩하는 efp를 미생물의 염색체에서 제거시키고 상기 조절 유전자를 포함하는 유전자 발현 카세트를 Escherichia coli를 숙주로 하여 도입하면, 세포 간 고유변이 없이 무항생제 배지에서 플라스미드를 안정적으로 유지할 수 있다. 또한, 상기 재조합 미생물에서 infA및 efp발현량을 프로모터를 통하여 정밀하게 조절할 경우, PCN 역시 높은 효율로 정량적으로 제어할 수 있어, 재조합 단백질을 생산하고자 하는 다양한 산업에서 광범위하게 적용할 수 있다.

대표청구항 ▼

예측 발현량이 100 내지 100,000의 값을 나타내는 낮은 세기의 합성 5' UTR(untranslated region), 목적 플라스미드 카피수에 따라 선택된 목적 전사량을 가지는 프로모터 및 조절 유전자를 포함하며, 상기 조절 유전자는 ribF, ileS, lspA, ispH, dapB, folA, imp, ftsL, ftsI, murE, murF, mraY, murD, ftsW, murG, murC, ftsQ, ftsA, ftsZ, lpxC, secM, secA, coaE, can, folK, hemL, yadR, dapD

예측 발현량이 100 내지 100,000의 값을 나타내는 낮은 세기의 합성 5' UTR(untranslated region), 목적 플라스미드 카피수에 따라 선택된 목적 전사량을 가지는 프로모터 및 조절 유전자를 포함하며, 상기 조절 유전자는 ribF, ileS, lspA, ispH, dapB, folA, imp, ftsL, ftsI, murE, murF, mraY, murD, ftsW, murG, murC, ftsQ, ftsA, ftsZ, lpxC, secM, secA, coaE, can, folK, hemL, yadR, dapD, map, rpsB, tsf, pyrH, frr, dxr, ispU, cdsA, yaeL, yaeT, lpxD, fabZ, lpxA, lpxB, dnaE, accA, tilS, proS, hemB, secD, secF, ribD, ribE, nusB, thiL, dxs, ispA, ffs, dnaX, adk, hemH, lpxH, cysS, folD, argU, mrdB, mrdA, nadD, holA, rlpB, leuS, lnt, leuW, glnS, fldA, infA, ftsK, lolA, serS, rpsA, msbA, lpxK, kdsB, mukF, mukE, mukB, asnS, fabA, serT, mviN, rne, yceQ, fabD, fabG, acpP, tmk, holB, lolC, lolD, lolE, pth, prsA, ispE, lolB, hemA, prfA, prmC, kdsA, topA, ribA, fabI, tyrS, ribC, pheT, pheS, rplT, infC, thrS, nadE, gapA, yeaZ, aspS, argS, leuZ, cysT, pgsA, metG, folE, yejM, gyrA, nrdA, nrdB, folC, accD, fabB, gltX, ligA, zipA, dapE, dapA, hda, der, hisS, ispG, suhB, acpS, era, lepB, pssA, yfiO, rplS, trmD, rpsP, ffh, grpE, yfjB, serV, csrA, alaS, ispF, ispD, ftsB, eno, pyrG, lgt, prfB, fbaA, pgk, metK, yqgF, plsC, parC, parE, ribB, cca, folB, ygjD, dnaG, rpoD, infB, nusA, leuU, glmM, ftsH, obgE, rpmA, rplU, ispB, murA, kdsC, yrbK, yhbN, yhbG, rpsI, rplM, degS, mreD, mreC, mreB, accB, accC, rpoC, rpoB, rplL, rplJ, nusG, secE, glyT, thrU, coaA, birA, murB, murI, priA, ftsN, yihA, polA, hemG, hemC, hemD, proM, hisR, argX, rho, trpT, glmU, glmS, yidC, rnpA, rpmH, dnaA, dnaN, gyrB, spoT, gmk, dut, dfp, rpmB, coaD, kdtA, gpsA, glyQ, glyS, ftsY, ftsE, ftsX, rpoH, asd, yrfF, trpS, rpsL, rpsG, fusA, rpsJ, rplC, rplD, rplW, rplB, rpsS, rplV, rpsC, rplP, rpmC, rpsQ, rplN, rplX, rplE, rpsN, rpsH, rplF, rplR, rpsE, rpmD, rplO, secY, rpsM, rpsK, rpsD, rpoA, rplQ, fmt, def, yrdC, ubiA, plsB, lexA, dnaB, ssb, groS, groL, efp, psd, rsgA, orn, yjeE, rpsR, ppa, valS, yjgP, yjgQ, dnaC 및 dnaT로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상인 유전자이며, 프로모터, 합성 5' UTR 및 조절 유전자의 순서로 배열되는, 플라스미드 카피수의 정량 조절용 유전자 발현 카세트.