초록

본 발명은 줄기세포의 층분리 배양 및 이를 통해 수득되는 단일 클로날 줄기세포의 증식 방법에 관한 것이다. 본 발명의 줄기세포의 층분리 배양 및 증식 방법에 따르면, 단일 클로날 줄기세포를 빠르고 오염없이 수득할 수 있는 층분리 배양법의 장점에 더하여, 단일 클로날 줄기세포의 빠른 증식을 통해 단시간에 원하는 단일 클로날 줄기세포의 대량 수득이 가능하므로, 줄기세포 치료제의 제조에 유용하게 사용될 수 있다.

대표청구항 ▼

1) 개체로부터 분리된 골수를 배양하는 단계; 2) 상기 1) 단계의 상층액만 새로운 용기로 이동시켜 배양하는 단계; 3) 상기 2) 단계의 상층액만을 분리하여 배양용기에서 37℃에서 1시간 내지 3시간 배양 후 37℃에서 12 내지 36 시간 배양을 2 내지 3회 반복하고 이어서 37℃에서 24 내지 72 시간으로 배양하며, 매번 상층액을 새로운 배양용기로 이동시켜 반복 배양하는 단계; 4) 최종 배양 용기에서 단일 클로날 줄기세포를 얻는 단계; 및5) 단일 클로날 줄기세포를 50 내지 1000 세포/cm2 (cells/cm2 )

1) 개체로부터 분리된 골수를 배양하는 단계; 2) 상기 1) 단계의 상층액만 새로운 용기로 이동시켜 배양하는 단계; 3) 상기 2) 단계의 상층액만을 분리하여 배양용기에서 37℃에서 1시간 내지 3시간 배양 후 37℃에서 12 내지 36 시간 배양을 2 내지 3회 반복하고 이어서 37℃에서 24 내지 72 시간으로 배양하며, 매번 상층액을 새로운 배양용기로 이동시켜 반복 배양하는 단계; 4) 최종 배양 용기에서 단일 클로날 줄기세포를 얻는 단계; 및5) 단일 클로날 줄기세포를 50 내지 1000 세포/cm2 (cells/cm2 )의 세포 밀도로 배지에 접종하여 계대 1 내지 5 배양하는 단계; 를 포함하는 줄기세포의 층분리 배양 및 증식 방법.