초록 ▼

본 발명은 시험관내 항원-특이적 T 림프구(CellTrAg)를 제조하기 위한 신규한 방법으로서, 상기 림프구는 세포내 염료로 마킹되고, 항원이 로딩된 단핵구의 존재 하에 확장되고, 후속적으로 낮은 강도의 세포내 염료를 기준으로 하여 분류되며, 여기서 낮은 강도의 형광은 형광의 손실이 증식의 강도와 상관관계가 있다는 점에서 항원-특이성의 마커이다.항원 특이성은, 낮은 형광도를 기준으로 하여 분류된 항원-특이적 림프구가 분류 동안 높은 형광도를 갖는 비특이적 림프구보다 더 활성인 기능 시험에서 평가되고; 활성은 조절 T 림프구의 경우

본 발명은 시험관내 항원-특이적 T 림프구(CellTrAg)를 제조하기 위한 신규한 방법으로서, 상기 림프구는 세포내 염료로 마킹되고, 항원이 로딩된 단핵구의 존재 하에 확장되고, 후속적으로 낮은 강도의 세포내 염료를 기준으로 하여 분류되며, 여기서 낮은 강도의 형광은 형광의 손실이 증식의 강도와 상관관계가 있다는 점에서 항원-특이성의 마커이다.항원 특이성은, 낮은 형광도를 기준으로 하여 분류된 항원-특이적 림프구가 분류 동안 높은 형광도를 갖는 비특이적 림프구보다 더 활성인 기능 시험에서 평가되고; 활성은 조절 T 림프구의 경우 효과기 림프구 기능의 억제로 정의되고, T 효과기 림프구의 경우 상기 세포의 특성, 예를 들면, 증식, 사이토카인 생성 및 세포독성 인자를 향상시키는 것으로 정의된다.

대표청구항 ▼

단클론성 항체로 마킹되고 분류되는 항원-특이적 T 림프구의 제조방법으로서, 상기 림프구는a) 상기 항원이 로딩된 자가 단핵구를 사용하여 발생되고;b) 발생될 T 조절 림프구 또는 T 효과기 림프구가 PBS에 현탁되고 형광 염료로 세포내 염색되고;c) 후속적으로 상기 림프구가 어두운 곳에서 배양되고;d) 후속적으로 상기 림프구 세포가 배양 배지로 집중적으로 여러 번 세척되고;e) 세포내 형광 염료로 염색된 T 조절 림프구 또는 T 효과기 림프구가 항원이 로딩된 감마선 조사된 자가 CD14+ 단핵구가 있는 배양 배지에 현탁되고;f) 상

단클론성 항체로 마킹되고 분류되는 항원-특이적 T 림프구의 제조방법으로서, 상기 림프구는a) 상기 항원이 로딩된 자가 단핵구를 사용하여 발생되고;b) 발생될 T 조절 림프구 또는 T 효과기 림프구가 PBS에 현탁되고 형광 염료로 세포내 염색되고;c) 후속적으로 상기 림프구가 어두운 곳에서 배양되고;d) 후속적으로 상기 림프구 세포가 배양 배지로 집중적으로 여러 번 세척되고;e) 세포내 형광 염료로 염색된 T 조절 림프구 또는 T 효과기 림프구가 항원이 로딩된 감마선 조사된 자가 CD14+ 단핵구가 있는 배양 배지에 현탁되고;f) 상기 T 조절 림프구 또는 T 효과기 림프구와 CD14+ 단핵구의 공동-배양물이 항-CD154 항체 및 항-CD28 항체와 함께 공동 항온배양되고;g) 상기 공동-배양물이 배양 배지에서 항온배양되고;h) 항온배양 후의 항원-특이적 T 림프구가 세포내 염료의 낮은 강도를 기준으로 하여 분류되고, 낮은 형광 강도는 형광 손실이 증식 강도와 상관된다는 점에서 항원 특이성의 마커인, 방법.