초록 ▼

담배거세미나방에서 발견된 핵다각체병 바이러스를 이용한 미생물 살충제의 개발을 위하여 바이러스의 숙주인 담배거세미나방의 인공사육체계 개발과 이를 이용하여 생산된 바이러스의 병원성과 병원성 제고 방안 및 바이러스 생산을 위한 바이러스 감수성 세포배양 등에 관한 연구를 수행하였다. 담배거세미나방은 25℃조건에서 1세대를 경과하는데 40일 정도가 소요되었으며 1세대 경과시 약 600배의 증식력을 지니고 있었다. 인공사료 성분의 국산화를 시도한 겨로가 소맥배아,이스트 등을 국산화하고 고형제인 Agar를 값이 싼 Carraneenan으로 대체

담배거세미나방에서 발견된 핵다각체병 바이러스를 이용한 미생물 살충제의 개발을 위하여 바이러스의 숙주인 담배거세미나방의 인공사육체계 개발과 이를 이용하여 생산된 바이러스의 병원성과 병원성 제고 방안 및 바이러스 생산을 위한 바이러스 감수성 세포배양 등에 관한 연구를 수행하였다. 담배거세미나방은 25℃조건에서 1세대를 경과하는데 40일 정도가 소요되었으며 1세대 경과시 약 600배의 증식력을 지니고 있었다. 인공사료 성분의 국산화를 시도한 겨로가 소맥배아,이스트 등을 국산화하고 고형제인 Agar를 값이 싼 Carraneenan으로 대체할 경우 사료원가를 4분의 1로 절감할 수 있었으며 용을 12℃에 저장할 경우 15일 이상 저당이 가능하였다. 바이러스의 담배거세미나방에 대한 병원성을 검정한 결과 LC 50는 영기에 따라 1,3,5령에 대하여 각각 5.04 * 10²,4.48 * 10³,그리고 4.25 * 10⁴으로 나타나 영기가 진전됨에 따라 바이러스의 양이 증가함을 보였으며,1령 유충 때 높은 농도의 바이러스를 감염시키면 2-4령사이에 치사하였다. 바이러스의 대량사육을 위해서는 5령기에 접종하면 600배의 수확률을 얻을 수 있었으며 인공사료의 소비도 최소화 할 수 있었다. 세포주의 확립을 위한 실험을 수행중에 있으며 기존의 세포주 중에서는 IPLB-Sf-21과 SLC-79가 본 바이러스에 대하여 비교적 감수성이 높아서 이용 가능성이 있는 것으로 나타났다.

목차 Contents

• 서론...14
• 제 1 장 담배거세미나방의 인공대량사육법...15
• 1. 서론...15
• 2. 재료 및 방법...16
• 가. 공시충 채집...16
• 나. 유충 인공사료 조성 및 제조...17
• 다. 성충사료, 산란 및 채란...18
• 라. 유충사육...19
• 마. 용의 수거 및 보관...19
• 바. 용기의 세척 및 소독...19
• 3. 결과 및 고찰...20
• 가. 생물학적 특성 및 인공누대사육...20
• (1) 인공누대사육...20
• (2) 생물학적 특성...21
• 1) 각태별 발육기간...21
• 2) 산란력 및 충태별 생존율...23
• 3) 섭식량 및 체중변화...24
• 나. 세대활력 검정방법 탐색...28
• 다. 사육체계확립...28
• 라. 경제성 분석...33
• 제 2 장 담배거세미나방 핵다각체병 바이러스의 병원성 검정과 대량생산...37
• 1. 서론...37
• 2. 병원성 검정...38
• 가. 재료 및 방법...38
• (1) 공시충 및 바이러스...38
• (2) 병원성 검정...39
• 나. 결과 및 고찰...39
• 3. 바이러스 대량생산...47
• 가. 재료 및 방법...47
• (1) 바이러스의 대량생산...47
• (2) 바이러스 생산성에 대한 유약홀몬 처리효과...47
• 나. 결과 및 고찰...48
• (1) 사료 섭식량...48
• (2) 감염층의 이병정도에 따른 바이러스 생산성...49
• (3) 접종농도와 수거시기에 따른 사충율 및 충체중...51
• (4) 바이러스의 대량증식...53
• (5) 바이러스 생산성에 대한 유약홀몬 처리효과...56
• 제 3 장 곤충 초대세포배양 및 바이러스 감수성 세포계...58
• 1. 서론...58
• 2. 재료 및 방법...59
• 가. 곤충 초대세포배양...59
• (1) 공시충...59
• (2) 세포배양액...59
• (3) 초대세포배양...59
• 나. 바이러스 감수성 세포계...60
• (1) 세포계의 유지...60
• (2) 혈액으로부터의 Non-occluded virus(NOV)채취...60
• (3) NOV의 세포계 접종...60
• (4) 감수성 세포계 확인...61
• 3. 결과 및 고찰...61
• 가. 곤충 초대세포배양...61
• 나. 세포계의유지...61
• 다. 담배거세나방 바이러스 미세포계감염...62
• 제 4 장 담배거세미나방 핵다각체병 바이러스의 생화학적 특성 및 조직학적 관찰...63
• 1. 생화학적 특성...63
• 가. 다각체 단백질 및 Nucleocapsid단백질의 아미노산 분석...63
• (1) 재료 및 방법...63
• 1) 다각체 단백질...63
• 2) Nucleocapsid단백질...64
• (2) 결과 및 고찰...64
• 나. 다각체 단백질의 혈청학적 비교...65
• (1) 재료 및 방법...65
• 1) 다각체 단백질 항원 준비...65
• 2) 다각체 단백질 항체 제조...66
• 3) 이중면역 확산법에 의한 다각체 단백질의 혈청학적 비교...67
• (2) 결과 및 고찰...67
• 2. 조직학적 관찰...70
• 가. 재료 및 방법...70
• 나. 결과 및 관찰...71
• (1) 중장조직의 관찰...71
• (2) 지방조직의 관찰...74
• 적요...77
• 인용문헌...79