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유전공학적 기법에 의한 거대동물의 복제생산 기술 개발에 관한 연구
Studies on the Development of Embryological Technology for Producing the Transgenic Animals 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 한국과학기술원
Korea Advanced Institute of Science and Technology
연구책임자 이경광
참여연구자 김지영 , 유대열 , 한용만 , 이철상 , 남궁욱 , 강만종 , 김재만 , 이용범 , 김경진 , 강해묵 , 조정희
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월1989-10
주관부처 과학기술부
사업 관리 기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
등록번호 TRKO200200002007
DB 구축일자 2013-04-18
키워드 형질전환동물.DNA농도.미세주입 시기.복제동물.재구성란.생쥐.수정란 이식.Transgemic animal.DNA concentration.Micro-Injection Time.Clone Animal.Recomposite Embryo.Mouse.Embryo Transfer.

초록

본 연구는 형질전환동물(Transgenic Animal)및 복제동물 생산기술을 개발할 목적으로 5개년('85-'90)에 걸쳐 수행하는 것으로, 당해년도(88.9-89.9)의 연구결과는 아래와 같다. \1.형질전환 생쥐의 효율적 생산을 위해서는 `HCG투여후 23-25시간째의 수정란에 μg당 2-8ng농도의 외래유전자를 미세주입하는 것이 효과적이었으며, 미세주입한 수정란을 가친의 한쪽난관에만 이식해 주는 것이 양쪽 난관에 이식하는 것보다 더 좋다는 사실이 확인되었다. \2. 복제동물을 생산하기 위한 한 방안으로, 생쥐 8세포기 수정란

목차 Contents

  • 제 1 장 형질전환동물 생산의 효율화 제고 방안에 관한 연구...26
  • 제 1 절 서 론...26
  • 제 2 절 실험재료 및 방법...31
  • 1. 실험동물...31
  • 2. 수정란의 준비...31
  • 3. 가친의 준비...32
  • 4. 배양액...32
  • 5. 외래유전자의 준비...32
  • 6. Micropipets의 제작...33
  • 7. 미세주입 방법 및 시기...33
  • 8. 수정란의 이식...34
  • 9. 외래유전자의 분석...35
  • 가. 생쥐 염색체 DNA의 분리...35
  • 나. Southern hybridization...36
  • 제 3 절 결과 및 고찰...37
  • 1. 미세주입시기에 따른 수정란의 생존율 및 임신율...37
  • 2. 미세주입시기에 따른 수정란의 착상율 및 외래유전자의 삽입빈도...38
  • 3. 미세주입시기에 따른 수정란의 체외발달...39
  • 4. 주입되는 DNA 농도별 수정란의 체외발달...41
  • 5. 주입되는 DNA 농도에 따른 삽입빈도...42
  • 6. 이식방법에 따른 착상율...43
  • 제 4 절 결 론...45
  • 참 고 문 헌...48
  • 제 2 장 포유동물의 복제생산을 위한 기초연구 (생쥐 8세포 기배 할구의 기체발생능에 관한 연구)...52
  • 제 1 절 서 론...52
  • 제 2 절 실험재료 및 방법...54
  • 1. 단위발생란의 준비 및 유효성 검증...56
  • 2. 할구의 분리 및 이식율 통한 난자의 재구성...57
  • 1) 투명대의 절개 및 할구의 파괴...57
  • 2) 8세포기 수정란의 할구분리...61
  • 3) 분리한 8세포기 할구의 단위발생란으로의 도입...61
  • 3. 제구성란의 임신 유도...61
  • 제 3 절 결과 및 고찰...62
  • 1. 단위발생란의 체외배양 및 이식성적...62
  • 2. 재구성란의 체외배양 및 이식실험...65
  • 제 4 절 결 론...68
  • 참 고 문 헌...70
  • 제 3 장 생쥐 난자 성숙과정에서의 핵막붕괴와 관련된 단백질 인산화 및 cAMP의 역할에 관한 연구...74
  • 제 1 절 서 론...74
  • 제 2 절 재료 및 방법...76
  • 1. 난자 채취 및 배양...76
  • 2. 제 1 감수분열 중기 난자의 puromycin처리...77
  • 3. NM난자의 핵막붕괴중 $^{35}S-methionine$$^{32}PO_4$의 표지...77
  • 4. Phosphotase처리...77
  • 5. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)...78
  • 6. 27kd 단백질의 인산화 정도 조사...78
  • 제 3 절 실험 결과...79
  • 1. 27, 46kd의 단백질 변형에 미치는 dbcAMP, IBMX 및 puromycin의 영향...79
  • 2. Phosphotase의 처리에 의한 인산단백질의 확인...79
  • 3. NM 난자의 NMD중 단백질 인산화 조사...82
  • 제 4 절 토 의...84
  • 참 고 문 헌...89

연구자의 다른 보고서 :

참고문헌 (25)

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