초록 ▼

단일클론항체를 대량생산할 수 있는 공정 개발을 위하여 유가배양 방법의 최적화 및 하이브리도마 세포의 배양법에 대하여 집중적으로 연구하였다. 유가배양 방법을 최적화 한 결과 생산성 및 항체의 수율이 각각 56mb MAb/L/day와 266mg Ab/L로 증대되었으며 값비싼 혈청의 사용량도 줄일 수 있음이 확인되었다. 한편 세포의 고농도 배양을 위해서 투과성 모세관 이용법이 세계 최초로 개발되었는데 항체의 생산성이 266mg/L/day로 크게 증대됨이 확인되었다. 기존의 세포 고정화 방법에 비해서 본 연구결과는 연속생산시의 오염을 줄일

단일클론항체를 대량생산할 수 있는 공정 개발을 위하여 유가배양 방법의 최적화 및 하이브리도마 세포의 배양법에 대하여 집중적으로 연구하였다. 유가배양 방법을 최적화 한 결과 생산성 및 항체의 수율이 각각 56mb MAb/L/day와 266mg Ab/L로 증대되었으며 값비싼 혈청의 사용량도 줄일 수 있음이 확인되었다. 한편 세포의 고농도 배양을 위해서 투과성 모세관 이용법이 세계 최초로 개발되었는데 항체의 생산성이 266mg/L/day로 크게 증대됨이 확인되었다. 기존의 세포 고정화 방법에 비해서 본 연구결과는 연속생산시의 오염을 줄일 수 있고 고정화 방법 자체가 용이한 점과 Scale-up의 가능성이 크다는 면에서 획기적인 동물세포의 고농도 배양법이라고 판단되며 본 연구의 결과는 다른 미생물 등의 부유성 세포 고정화에도 활용할 수 있을 것이다.

목차 Contents

• 제1장 서론...15
• 1. 단일클론항체의 시장성...15
• 2. 단일클론항체의 대량 생산 기술 현황...16
• 3. 본 연구의 목적...20
• 4. 참고문헌...20
• 제2장 유가식 배양법의 최적화...22
• 1. 서론-유가식 배양법의 유용성...22
• 2. 실험재료 및 방법...27
• 1. 세포주...27
• 2. 사용배지...27
• 3. 계대배양과 세포배양...27
• 4. 동결보과 및 세포배양...29
• 5. 항체 농도 측정...30
• 6. Glucose와 Ammonia 농도측정...32
• 7. 유가식 배양...32
• 3. 실험결과 및 고찰...35
• 1. 회분식 배양...35
• 1) 회분식 배양에서 하이브리도마 A4W의 중식과 단일클론항체의 생산...35
• 2) Glucose와 Glutamin의 영향...39
• 3) 혈청농도와 세포증식과 항체 생성에 미치는 영향...43
• 2. 유가식 배양(Fed-Batch Culture)...46
• 1) Time-dependent feeding mode...46
• 2) Growth-Dependent feeding mode...51
• 3) 투입되는 배지 성분의 조성변화가 항체 생성에 미치는 영향...60
• 4. 참고문헌...71
• 제3장 하이브리도마 세포의 고농도 연속 배양...74
• 1. 실험재료 및 방법...75
• 1. 세포주와 배양액...75
• 2. 계대배양과 세포수 측정...76
• 3. 항체농도 측정...76
• 4. Glucose와 Ammonia 농도 측정...76
• 5. 칼슘 알지네이트 캡슐을 이용한 세포의 고농도 배양...77
• 6. 투과성 모세관의 제조...80
• 7. 투과성 모세관을 이용한 세포고정화...85
• 2. 결과 및 고찰...87
• 1. Ca-alginate를 이용한 Microencapsulation...87
• 2. 투과성 모세관을 이용한 세포의 고농도 배양...91
• 1) T-flask에서의 고농도 세포 배양...91
• 2) 투과성 모세관을 이용한 충전탑 반응기에서 연속적인 고농도 세포 배양...100
• 3. 참고문헌...109