초록 ▼

1 차년도 연구에서는 Z.mobilis를 이용한 D-sorbitol의 생산과 초산균을 이용한 L-sorbose 생산공정의 최적화 연구와 아울러 Z.mobilis 발현 Vector제조 및 D-sorbitol Dehydrogenase유전자의 분리를 시도하였다. Z.mobilis균체를 Toluene 혹은 CTAB 등의 처리에 의해 세포막 투과성을 증가시켰을 때 Glucose 및 Fructose의 혼합용액을 기질로하여 다량의 D-sorbitol을 생성하게 되며 이때 전환효과는 CTAB 가 좋은 것으로 나타났으며 효소의 유출을 방지하기 위하

1 차년도 연구에서는 Z.mobilis를 이용한 D-sorbitol의 생산과 초산균을 이용한 L-sorbose 생산공정의 최적화 연구와 아울러 Z.mobilis 발현 Vector제조 및 D-sorbitol Dehydrogenase유전자의 분리를 시도하였다. Z.mobilis균체를 Toluene 혹은 CTAB 등의 처리에 의해 세포막 투과성을 증가시켰을 때 Glucose 및 Fructose의 혼합용액을 기질로하여 다량의 D-sorbitol을 생성하게 되며 이때 전환효과는 CTAB 가 좋은 것으로 나타났으며 효소의 유출을 방지하기 위하여 Glutaraldehyde 로 처리하면 효소의 역가가 매우 안정화 되었으며 돼지감자를 값싼 기질로 이용할 수 있는 가능성을 확인하였다. G.suboxydans를 이용한 D-Sorbitol의 L-sorbose로의 전환반응은 KCTC 2111을 대산균주로 선별하였고 Resting cell에 의한 균테반응시의 최적조건을 확립하였으며 Toluene 처리에 의해 최대 3배 이상의 전환효율 주가를 가져올 수 있었다. G.suboxydans 의 chromosomal DNA를 분리하고 Lambda GEM 11 vector 에 Genomic DNA library를 제조하였으며 library 검색을 위한 DNA probe 제조를 목적으로 동 균주로부터 Membrane-Bound Form 의 D-sorbitol dehydrogenase을 부분정제 하였다.

목차 Contents

• 제1장 서론...15
• 제2장 실험재료 및 방법...25
• 제1절 사용균주, 배지 및 생육조건...25
• 제2절 분석방법...29
• 제3절 Cell permeabilization 및 고정화 방법...32
• 제4절 Sorbitol dehydrogenase 의 분리, 정제...34
• 제5절 DNA 조작...36
• 제3장 결과 및 고찰...40
• 제1절 Z.mobilis 에 의한 Sorbitol 의 생산...40
• 제2절 G.suboxydans 에 의한 L-sorbose 의 생산...43
• 제3절 Glucose 및 fructose 혼합용액으로부터의 L-sorbose의 1단계 생산...52
• 제4절 Z.mobilis 발현 vector 의 제조 및 D-sorbitol dehydrogenase 유전자의 분리...63
• 제5절 돼지감자를 이용한 D-sorbitol 의 생산...77
• 제4장 결론...83
• 참고문헌...85