초록 ▼

새로운 항진균 선도물질을 탐색하고 개발하기 위하여 세포벽과 세포막 합성에 관여하는 효소를 이용한 목표 지향적인 탐색체계를 확립하였다. 또한 Candida alvicans 의 dimorphism 현상을 이용하여 C . albicans의 효모형태에서만 항진균 활성을 나타내는 물질과 Allium sativum var. pekinense 로부터 새로운 항진균 물질을 분리, 정제하고 그 구조를 결정하였다. Chitin synthese II 효소의 활성은 1.1mM UDP-N-acetyl-D-glucosamine 을 첨가하고 60분 배양시

새로운 항진균 선도물질을 탐색하고 개발하기 위하여 세포벽과 세포막 합성에 관여하는 효소를 이용한 목표 지향적인 탐색체계를 확립하였다. 또한 Candida alvicans 의 dimorphism 현상을 이용하여 C . albicans의 효모형태에서만 항진균 활성을 나타내는 물질과 Allium sativum var. pekinense 로부터 새로운 항진균 물질을 분리, 정제하고 그 구조를 결정하였다. Chitin synthese II 효소의 활성은 1.1mM UDP-N-acetyl-D-glucosamine 을 첨가하고 60분 배양시 효소 활성이 가장 높았으며 첨가하는 효소량과 사용하는 용매의 종류에 따라 효소활성이 크게 변하였다. Squalene synthase 효소의 활성도 5μM farnesyl pyrophosphate 을 첨가하고 30분 배양시 효소 활성이 가장 높았고 , 첨가하는 효소량에 따라 효소활성은 직선적으로 증가하였으며, 사용하는 용매의 종류에 따라 효소의 활성이 크게 변하였다. 곰팡이 F1484 균주가 생산하는 항진균 물질은 분자량이 379이고 분자식이 C18H15CIO7인 노란색 분말로 그 구조는 chloroflavonin과 동일한 구조를 나타내었다. 그러나, 이 화합물은 그 구조내에 chloride 가 결합된 독특한 구조를 나타내어 앞으로 biotransfomation을 통해 다른 화합물로 치환하여 그 구조와 활성간의 상관관계를 조사할 예정이다. Allium sativum var. pekinense 로부터 분리한 신규 항진균 물질은 분자량이 250이고 분자식이 C9H14O4S2 인 황색분말로 11종의 진균류에 대해 12.5 ~ 50μg/ml 의 농도에서 저해활성을 나타내었다.

목차 Contents

• 제1장 서론...19
• 제2장 실험재료 및 방법...25
• 1. 실험재료...25
• 가. 시약및 배지...25
• 나. 사용 균주...25
• 2. 실험방법...25
• 가. 사용배지...25
• 나. 토양채취및 균주 분리...28
• 다. Condida albicans 의 dimorphism 현상을 이용한 탐색체계...28
• 1) 효모 형태의 Condida albicans 평판의 조제...28
• 2) 위장 균사 형태를 유도하기 위한 Condida albicans 평판의 조제...28
• 3) 항진균 활성물질의 in vitro역가검정...29
• 라. 최소 발육저지 농도의 측정방법...29
• 1) 각종 효모에 대한 MIC의 측정...29
• 마. Chitin synthase Ⅱ 효소 저해제 탐색체계...30
• 1) Chitin synthase Ⅱ 효소의 조제...30
• 2) Chitin synthase Ⅱ 효소의 검정...30
• 바. Squalene synthase 효소 저해제 탐색체계...31
• 1) Squalene synthase 효소의 조제...31
• 2) Squalene synthase 효소의 검정...31
• 사. 곰팡이 F1484균주가 생산하는 항진균 활성 물질의 분리 정제...31
• 아. 천연물 Allium sativum var. pekinense(마늘)로 부터 항진균 활성 물질의 분리. 정제...32
• 제3장 결과 및 고찰...33
• 1. Chitin synthase Ⅱ효소 활성에 미치는 제반인자...33
• 1) UDP-N-acetyl-D-glucosamine에 의한 영향...33
• 2) 효소량에 의한 영향...34
• 3) 배양시간에 따른 영향...35
• 4) 용매에 의한 영향...36
• 2. Squalene synthase효소 활성에 미치는 제반인자...36
• 1) Fanesyl pyrophosphate에 의한 영향...36
• 2) 배양시간에 따른 영향...38
• 3) 효소량에 의한 영향...39
• 4) 용매에 의한 영향...40
• 3. 곰팡이 F1484균주가 생산하는 항진균 활성물질의 분리정제 및 구조결정...40
• 1) F1484 균주가 생산하는 항진균 활성물질의 분리정제...40
• 2) F1484 균주가 생산하는 항진균 물질의 구조결정...41
• 3) F1484 화합물의 MIC측정...46
• 4. Allium sativum var. pekinense(마늘)로 부터 신규 항진균 물질의 분리 정제 및 구조결정...53
• 1) 마늘로 부터 항진균 물질의 분리. 정제...53
• 2) 마늘에서 분리한 항진균 물질의 분리.정제...53
• 가. UV-Vis흡광도 분석...53
• 나. IR 흡광도 분석...53
• 다. 분자량 분석...56
• 라. KRIBB-BP004 화합물의 NMR분석...56
• 마. KRIBB-BP004 화합믈의 MIC측정...56
• 제4장 결론...64
• 제5장 참고문헌...65