초록

바이러스백신의 대량생산의 단가를 낮춰 생산성을 높일 수 있는 배양 조건과 마크로 케리어 비드를 만드는 기술을 개발하였다. CEF 세포를 microbeads에 배양하여 바이러스를 생산하면 기존의 beads와 다른 물리적 안전성이 유지되었고 바이러스의 수율이 수백배 증가되었다. 또한 세포의 고농도 배양이 가능한 데 이는 Beads내의 pores에 세포가 성장할 수 있기 때문이다. Bead를 제조하는 데 드는 비용이 기존의 방법보다 수십배가량 저렴하다.

목차 Contents

• 제I장 서론...14
• 1.동물세포의 배양과 유용단백질의 생산...14
• 2.Microcarrier system의 역사적 고찰...21
• 3.동물세포 반응기에서의 hydrodynamic shear에 의한 세포의 손상...26
• 4.바이러스 생산 시스템...26
• 5.Newcastle disease virus...27
• 제II장 본론...30
• 제1절 재료 및 방법...30
• 1.세포와 세포의 유지...30
• 2.바이러스...31
• 3.Microcarrier의 준비...32
• 4.Spinner flask에서의 동물 세포의 배양...33
• 5.Pilot 수준의 동물 세포 배양...34
• 6.세포의 계측...34
• 7.Confocal microscopy...34
• 8.Thin sectioning과 architectural staining...35
• 9.Galactosidase의 활성 측정...35
• 10.세포의 파괴방법...36
• 제2절 결과...37
• 1.Galactosidase의 활성을 나타내는 식...37
• 2.세포 분쇄방법에 따른 Galactosidase활성...41
• 3.여러 세포에서 발현되는 Galactosidase의 활성 비교...44
• 4.세포의 성장과 바이러스의 접종 시기...50
• 5.Vaccinia virus의 생산에 영향을 미치는 pH의 일반적인 영향...52
• 6.산소압 효과와 바이러스의 생산성...54
• 7.온도의 효과...54
• 8.삼투압의 효과...56
• 9.혈청의 종류와 농도의 영향...60
• 10.Macroporous gelatin microcarrier에서 자라는 동물 세포의 분포...62
• 11.Macroporous gelatin microcarrier의 shear protection 효과...65
• 12.Macroporous carrier에 의한 air sparging으로 유발된 손상의 억제 효과...72
• 13.바이러스 생산 시스템...76
• 14.Vero/VSV 시스템...79
• 15.microcarrier에서의 바이러스 생산에 대한 pH와 MOI의 효과...79
• 16.microcarrier의 종류에 따른 바이러스의 생산성...81
• 17.혈청의 농도와 microcarrier에서의 바이러스 생산...81
• 18.Polycation과 바이러스의 흡착 및 복제...81
• 19.산소의 분압과 바이러스의 생산...86
• 20.1 L Bioreactor에서의 바이러스의 생산...90
• 21.Chicken embryo fibroblast/NDV 시스템...95
• 22.CEF일차세포의 microcarrier 적합성...95
• 23.CEF/바이러스생산 시스템...98
• 24.산소의 농도와 NDV의 생산...98
• 제III장 결론...105
• 제1절 Vaccinia virus system에서의 배양 환경과 바이러스의 생산...105
• 제2절 Macroporous gelatin microcarrier를 이용한 바이러스의 생산...106
• 제IV장 참고 문헌...108