초록 ▼

▷ 천연풍미소재 제조용 신규 효소의 탐색, 정제 및 특성화 연구
- Bacillus licheniformis NS115로부터 aminopeptidase (exopeptidase)를 분리하여 특성을 연구 한 결과 분리된 효소는 등전점이 5.2, Glu-pNA에대한 Km 값과 Kcat 값은 각각 0.087 mM과 3.0 x 103 였음.
효소작용 최적 pH는 pH8.0, pH6-12 범위에서는 안정. 최적온도는 55℃,55℃ 까지는 안정 분자량은 각각 42000 Da과 22000 Da인 hete

▷ 천연풍미소재 제조용 신규 효소의 탐색, 정제 및 특성화 연구
- Bacillus licheniformis NS115로부터 aminopeptidase (exopeptidase)를 분리하여 특성을 연구 한 결과 분리된 효소는 등전점이 5.2, Glu-pNA에대한 Km 값과 Kcat 값은 각각 0.087 mM과 3.0 x 103 였음.
효소작용 최적 pH는 pH8.0, pH6-12 범위에서는 안정. 최적온도는 55℃,55℃ 까지는 안정 분자량은 각각 42000 Da과 22000 Da인 hetero-dimer. N-말단 아미노산 서열은 NGDDGDKVAV GKDG과 TTHFVDQWGNVVS.
- Saccharomyces cerevisiae D (KCTC7248)와 천연자원으로부터 AMP deaminase를 분리하여 특성을 연구한 결과 79 kDa의 subunit로 이루어진 homotrimer로, 분자량이 238 kDa, 등전점은 6.2 이였음.
정제한 효소의 Km은 6.5 mM, 최적온도는 30℃, 최적 pH는 7.5이었으며, ∼45℃,pH 5.5∼9의 범위에서 안정한 활성을 보임.
정제된 효소의 N말단 아미노산 서열은 Ala-Asp- Tyr- Lys-Met-Gln-Met-Phe-Ala-Asp- Asp-Ala로 나타남.
- 맥아근으로부터 5'-Pdase를 분리하여 특성을 연구한 결과 Fraction A의 optimum pH는 9.0, fraction B의 optimum pH는 9.0-10.0. Fraction A와 B 모두 10℃와 70℃사이에서 온도가 증가 함에 따라 효소활성도가 증가.
Fraction A, B 모두 50℃와 60℃에서 기질이 없는 상태에서 120분간 가열하여도 효소활성도에는 영향을 미치지 않음.
70℃에서는 30분후에 81-83%, 60 분후에는 70-74%를 나타내 70℃에서는 불안정.
▷ 상업용 효소를 이용한 새로운 정미소재 개발
- 탈지대두박을 원료로 이용하여 protease→exopeptidase→amylase 처리 후 정미력을 향상시킨 processed flavor, 「SoyaSavor」개발- 생효모를 효소분해하여 세포 중에 존재하는 RNA를 최대 nucleotides로 변환시켜 GMP와 IMP 의 정미를 부여한 고핵산 효모 extract 개발
▷ Bacillus licheniformis NS115가 생산하는 신규 exopeptidase의 산업적 용도개발 : RSM (Response Surface Methodology)을 이용하여 예측된 최적 분해 조건은 반응온도 48.5℃, 반응시간 4.95시간, pH 6.8, 그리고 E/S ratio는 1.43%였고, 이때 추정된 DH는 36.9%였음.
▷ 발효배지 최적화와 유전자 조작을 통한 효소의 대량생산 연구
- Bacillus licheniformis NS115가 생산하는 신규 exopeptidase의 발효조건을 RSM을 이용하여 최적화한 결과, 예측된 최적배지 조성은 lactose 1.61%, yeast extract 0.15%였고, 이때 추정 된 exopeptidase의 활성은 53.43 U/ml. 검정실험결과 exopeptidase의 활성은 평균 58.87 U/ml로 나타났음.
- Thermoactinomyces sp. E79가 생산하는 protease의 발효조건을 최적화한 결과, protease 분해 효소 생산의 최적 pH는 5.7-8.5 정도로 넓은 범위를 나타남.
반응 표면 분석법 (Response Surface Methodology ; RSM)으로 배지 조성을 최적화의 결과, 10.5 g/L 수용 전분, 5.9 g/L soytone, 1.3 g/L yeast extract에서 최대 효소역가 2.53 U/mL이 예측되,137 bp로 나타남.

목차 Contents

• 제1장 서론...12
• 제2장 국내외 기술개발 현횡...15
• 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과...17
• 제4장 연구개발 목표 달성도 및 대외기여도...67
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...68
• 제6장 참고문헌...69