초록 ▼

유전자의 발현효율을 극대화시키는 플라스미드 백터의 개발시 가장 중요한 구성인자는 강력한 프로모우터 및 전사 터미네이터이다. 이들 두 유전자 발현조절인자를 대장균 염색체 DNA로 부터 얻고자 했다. 이들은 이미 개발한 해당 용도의 플라스미드 백터를 이용하여 분리하려고 하는데, 그의 기본 원리는 클로닝한 삽입 단편의 기능에 따라서 생체내에서 및 시험관 내에서 클로람페니콜 내성유전자의 발현 또는 억제되는 정도에 따라서 판단함을 근거로 한다.
이렇게 하여 분리한 강력한 프로모우터는 PINJ40의 삽입단편으로써 size는 약 100

유전자의 발현효율을 극대화시키는 플라스미드 백터의 개발시 가장 중요한 구성인자는 강력한 프로모우터 및 전사 터미네이터이다. 이들 두 유전자 발현조절인자를 대장균 염색체 DNA로 부터 얻고자 했다. 이들은 이미 개발한 해당 용도의 플라스미드 백터를 이용하여 분리하려고 하는데, 그의 기본 원리는 클로닝한 삽입 단편의 기능에 따라서 생체내에서 및 시험관 내에서 클로람페니콜 내성유전자의 발현 또는 억제되는 정도에 따라서 판단함을 근거로 한다.
이렇게 하여 분리한 강력한 프로모우터는 PINJ40의 삽입단편으로써 size는 약 100 bp 이하이었으며 대조구인 PJL3-TB5에 의한 CAT보다 약 2배의 효소활성을 나타내었다. 한편 전사터미네이터로서는 PINJ73이 분리되었는데, 이 삽입단편의 size도 100 bp 이하이었고 CAT promoter의 활성을 즉 전사를 거의 완전히 억제하는 강력함을 나타내었다. 이로써 이들 두 전사조절인자는 효율좋은 유전자 발현백터의 개발 등에 이용될 수 있을 것으로 판단된다.

Abstract ▼

To construct plasmid vector for maximizing gene expression, two of the most important factor are strong promoter and transcriptional terminator. We have constructed these two transcriptional control factors from E. coli chlomosomal,DNA. These have been isolated by using plasmid which had been alread

To construct plasmid vector for maximizing gene expression, two of the most important factor are strong promoter and transcriptional terminator. We have constructed these two transcriptional control factors from E. coli chlomosomal,DNA. These have been isolated by using plasmid which had been already,constructed as promoter-probe vector and transcriptional terminator-probe vector, respectively.
Carrying the insertion of less than 100 bp containing more active promoter, pINJ 40 showed about two fold higher activity of promoter than that of the,wlld type,pJL3-TB5. And pINJ 73 contained the insertion of less than 100-bp size and showed almost complete temination of the transcription when compared with the wild type, pJL3-TB5. These two transcriptional control factors should be applicable for construction of more efficient gene expression vector.

목차 Contents

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