초록 ▼

본 연구는 종야세포에 대해 성장억제작용을 보이는 Hp-Hb 복합체의 작용기전을 연구하여 생리적인 물질인 Hp 이 종양의 자연치유과정에 관여함을 밝히고자 다방면의 연구를 수행하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. IL-6는 Hep G2 세포의 급성기 반응에서 중요한 역할을 담당하며, 그 작용은 PMA로 저해받을 수 있는 단백질인
산화요소 C가 아닌 다른 어떤 기전을 통하여 조절된다.
2. 급성기 혈액을 비롯한 세포외 체액에서 농도가 증가되는 Hp 및 조직의 손상으로 인해 유리되는 Hb 모두

본 연구는 종야세포에 대해 성장억제작용을 보이는 Hp-Hb 복합체의 작용기전을 연구하여 생리적인 물질인 Hp 이 종양의 자연치유과정에 관여함을 밝히고자 다방면의 연구를 수행하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. IL-6는 Hep G2 세포의 급성기 반응에서 중요한 역할을 담당하며, 그 작용은 PMA로 저해받을 수 있는 단백질인
산화요소 C가 아닌 다른 어떤 기전을 통하여 조절된다.
2. 급성기 혈액을 비롯한 세포외 체액에서 농도가 증가되는 Hp 및 조직의 손상으로 인해 유리되는 Hb 모두가 호중
구의 활성화로 인한 O?- 생성을 억제시키며, 이러한 작용은 두 단백질에 안정한 결합물이 형성됨으로서 없어진
다.
3. Hp-Hb 복합체가 사람의 간암세포인 Hep 3B세포에서 강력한 항종양작용을 나타내며, 이러한 세포독성 효과는 세
포내에 내장된 일련의 자기파괴과정을 통하여 나타난다.
4. P388D? 세포에는 Hp-Hb 복합체 수용체가 존재하고, 수용체 특성상 고친화성과 저친화성의 두 가지 수용체가 존
재한다. 또한 간세포인 Hep 3B, Chang liver 세포에도 Hp-Hb 복합체 수용체가 존재하며, Hep 3B 와 Hep G2
세포에는 유리 Hb 수용체도 존재한다.
5. HL-60 과 U937세포는 가해준 Hp 농도에 비례하여 세포성장이 억제되는, 이는 Hp의 유전형과는 무관하다. 또
한 이 두세포는 Hp에 의해 형태적, 기능적으로 분화가 유도된다.
6. 사람의 정상혈청을 염석, 이온교환 chromatography, gel filtration등을 시행하여 전기영동상 거의 순수하고
아주 강력한 분화유도작용을 갖는 정제분획을 얻었다.
이 분획(p66)은 10 ng/ml에서 그 작용이 나타나기 시작하며, 1 ㎍/ml 이상에서는 거위 모든 세포가 죽었고 일부 살아있는 세포는 TPA 처치시와 유사하게 분화되었다. p66을 면역시켜 얻은 항혈청을 가하면 p66의 분화유도작용이 억제되며, 이미 분화 유도작용을 갖는 것으로 알려진 몇가지 cytokine (IL-6, M-CSF, TNF-α)의 항혈청을 이용하여 조사한 결과, p66은 사람혈청에 존재하는 새로운 분화유도인자 임을 알 수 있었다.

Abstract ▼

Haptoglobin-hemoglobin(Hp-Hb) complex inhibited the growth of certain tumor cell lines. To investigated the physiological role of Hp in the spontaneous healing of tumors, we focused on the molecular mechanism of Hp and Hp-Hb complex in a series of tumor cell lines. The results were as followings

Haptoglobin-hemoglobin(Hp-Hb) complex inhibited the growth of certain tumor cell lines. To investigated the physiological role of Hp in the spontaneous healing of tumors, we focused on the molecular mechanism of Hp and Hp-Hb complex in a series of tumor cell lines. The results were as followings.
1. Interleukin 6 (IL-6) plays a pivotal role in acute phase reaction and its activity is regulated by an
unknown mechanism which can be triggered by the addition of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA).
2. Free form of both Hp and Hb inhibited the generation of superoxide anion from activated neutrophils.
But this inhibitory effect was disappeared by the forming of a stable complex between the two
compounds.
3. Hp-Hb complex showed significant antiproliferative effect on cultured hepatoma cells (Hep3B) and the
cytotoxic effect may be mediated via intrinsic program of cell death called apoptosis.
4. We identified the presence of Hp-Hb complex receptor on P388D? cells. This cell line has 2 types of
receptor, high affinity and low affinity receptor. We also identified the presence of Hp-Hb receptor
on Hep3B and Chang liver cells, and the presence of Hp receptor on Hep3B and HepG2 cells.
5. The cell growth of HL-60 and U937 cells was retarded dose-dependently by Hp. The effect of growth
retardation was independent of genetic type of Hp. These 2 types of cells were also differentiated
to macrophage-like cells by Hp.
6. We tried to purify a differentiation-inducing factor from normal human serum by salting-out, ion-
exchange chromatography and gel filtration. We obtained a nearly pure fraction (p66) that had the
potent differention-inducing activity of U937 cells.
The differention-inducting activity was observed at 10 ng/ml of p66. The activity above 1.0 ㎍/ml was so strong that most of cells were died, and few survived cells were fully differentiated-inducing activity of p66. We compared our differentiation-inducing factor (p66) with other known cytokines such as IL-6, M-CSF, TNF-α. These findings suggest that p66 may be a novel serum protein having differentiation-inducing activity of U937 cells.

목차 Contents

• 1. 서 론...12
• 2. 연구방법...17
• 3. 결 과...30
• 4. 고 찰...41
• 5. 결 론...47
• 6. 참고문헌...49