초록 ▼

호염성 미생물에 대한 연구는 주로 호염기작과 형태학적 특성 및 생체내 대사 효소의 특성에 대한 연구를 중심으로 진전되어 왔고, 균체외 효소에 대한 보고서로 amlyase, nuclase, lipase, protease등이 있으며 앞으로 이들 효소의 응용성에 대한 연구가 기대된다. 호염성 세균이 생산하는 효소는 일반 미생물이 생산하는 효소보다 내염성이 크므로 이용범위가 넓고 효소생산 공정에 잡균의 오염을 줄일 수 있다. 본 연구에서는 호염성 세균으로부터 내염성의 alkaline protease를 생산하여 이를 염장 단백식품의

호염성 미생물에 대한 연구는 주로 호염기작과 형태학적 특성 및 생체내 대사 효소의 특성에 대한 연구를 중심으로 진전되어 왔고, 균체외 효소에 대한 보고서로 amlyase, nuclase, lipase, protease등이 있으며 앞으로 이들 효소의 응용성에 대한 연구가 기대된다. 호염성 세균이 생산하는 효소는 일반 미생물이 생산하는 효소보다 내염성이 크므로 이용범위가 넓고 효소생산 공정에 잡균의 오염을 줄일 수 있다. 본 연구에서는 호염성 세균으로부터 내염성의 alkaline protease를 생산하여 이를 염장 단백식품의 가공과 세제 등 내염성 공업제재 등에 이용하기 위한 자료를 얻고자 protease의 활성이 강한 호염성 세균을 분리하고 그의 군학적 특성과 salt response pattern, 색소생성 및 영양요구성등의 생리학적 특성을 조사하여 동정하며 또한 효소생산조건을 검토하고 생산된 alkaline protease를 이온교환 컬럼 크로마토그라피와 겔여과 등으로 정제한 후 그의 kinetics, 분자량, 작용조건 및 안정성 등을 검토하며 아울러 그의 이용성 등을 연구하고자 한다.

Abstract ▼

The research on halophilic bacteria has been progressed mainly in halophilic mechanism, morphological characteristics and metabolite enzyme in cell, the reports about extracellar enzyme are such as amylase, nuclase, lipase, protease, and the research on the application of those enzyme is expected.

The research on halophilic bacteria has been progressed mainly in halophilic mechanism, morphological characteristics and metabolite enzyme in cell, the reports about extracellar enzyme are such as amylase, nuclase, lipase, protease, and the research on the application of those enzyme is expected. the purpose of this research is to study the halotolerant proteases which produced by halophilic bacteria, considering its application in salted food and salt-tolerant detergent industry. The procedures of this research are following. 1. Isolation and indentification of halophilic bacteria which produce halotolerant protease from the enviroment. 2. Investigation of phygiological characteristics of the selected strains such as salt reponse pattern and salt content in the cell, pigment production and its properties, resistance to to antibiotics and chemicals, requirement of amino acid and vitamin. 3. Purification of the protease by ion exchange column chromatography and gel filtration chromatography. 4. Investigation of the enzymatic properties of the purified protease such as homogenity and molecular weight, kinetics, reaction temperature and pH, stability of heat, pH and salts. Results from above experiments will be usefully used in the process of salted food and salt-tolerant detergent industry.

목차 Contents

• 목 차 (본 문)...5
• 제 1 장 서 론...7
• 제 2 장 실험재료 및 방법...8
• 제 1 절 재료 및 실험기기...8
• 1. 주요 시약...8
• 2. 주요 기자재...8
• 제 2 절 실험방법...8
• 1. 효소생산 균주의 분리 및 선정...8
• 2. 효소역가 측정...10
• 3. 선정균주의 생리학적 특성 검토 및 동정...10
• 4. 주사형 전자현미경(SEM)에 의한 형태학적 관찰...11
• 5. Protase 생산조건...12
• 6. 효소의 정제...13
• 7. 효소학적 특성 검토...14
• 제 3 장 결과 및 고찰...16
• 제 1 절 균주 선정 및 운영...16
• 1. 우수균주의 선정...16
• 2. 선정균주의 균학적 특성...16
• 제 2 절 영양요구성 및 항생물질 내성...19
• 1. 영양요구성...19
• 2. 항생물질 내성...20
• 제 3 절 균채내 Na$^{+}$, K$^{+}$, Mg$^{2+}$ 이온의 정량...21
• 제 4 절 protease 생산조건...21
• 1. NaCl 농도...21
• 2. 배지...22
• 3. 배양온도 및 pH...23
• 4. 배양 시간...25
• 제 5 절 효소의 정제...26
• 제 6 절 효소학적 특성 검토...29
• 1. 순도...29
• 2. 분자량...30
• 3. Michaelic 정수...32
• 4. 최적 온도 및 pH...33
• 5. 온도 및 pH 안정성...35
• 6. 금속 이온...37
• 7. 효소활성에 미치는 NaCl의 효과...37
• 인용문헌...39