보고서 정보
주관연구기관 |
영남대학교 YeungNam University |
연구책임자 |
정시련
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참여연구자 |
전경희
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발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 1991-05 |
주관부처 |
과학기술부 |
사업 관리 기관 |
영남대학교 YeungNam University |
등록번호 |
TRKO200200015161 |
DB 구축일자 |
2013-04-18
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키워드 |
lectins.agglu inins.cell membrane.cell structure.mitogen.immunochemistry.lectins.agglu inins.cell membrane.cell structure.mitogen.immunochemistry.
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초록
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미꾸라지(Misgurnus sp.)조직으로 부터 0.15M 생리식염수 유출, salt fractionation, anion 및 cation exchange column chromatography, hydroxyapatite column chromatography하여 두 분획 (LOA-Ⅰ, LOA-Ⅱ)의 새로운 렉틴을 얻었으며 이 렉틴 성분에 대한 연구 결과는 다음과 같다. 두 분획 (LOA-Ⅰ, LOA-Ⅱ)은 각각 78.8, 265.8배 정제되고 9.54,7.95% 회수되었다. Polyacrylamide gel electropho
미꾸라지(Misgurnus sp.)조직으로 부터 0.15M 생리식염수 유출, salt fractionation, anion 및 cation exchange column chromatography, hydroxyapatite column chromatography하여 두 분획 (LOA-Ⅰ, LOA-Ⅱ)의 새로운 렉틴을 얻었으며 이 렉틴 성분에 대한 연구 결과는 다음과 같다. 두 분획 (LOA-Ⅰ, LOA-Ⅱ)은 각각 78.8, 265.8배 정제되고 9.54,7.95% 회수되었다. Polyacrylamide gel electrophoresis에서 LOA-Ⅰ 은 1개의 major band와 소수의 minor band가 나타났고, LOA-Ⅱ는 3개의 minor band가 나타났다. 부분정제된 미꾸라지 렉틴은 사람 (human blood A and AB type)과 토끼 및 개의 적혈구와 생쥐 (mouse)의 림프구에 응집반응을 보였고, pH변화에는 산성에서는 불안정하였고 중성 및 염기성에서는 다소 불안정하나 강한 응집역가를 나타냈고, 온도 변화에는 30℃이후에 활성이 약간 감소되었으나 90℃까지 활성이 남아있는 것으로 보아 안정하며, 수종의 금속이온에도 영향을 받지않았다. 적혈구 응집력은 d-glucosamine과 methy-(β)-galactopyranose의 비교적 낮은 농도인 3mM에서 저해현상을 나타냈으며, 아미노산은 Aspartic acid, Valine 및 Leucine등의 함량이 많았고 Cystein과 Methionine 및 Isoleucine 등의 함량은 극히 미량이거나 확인할수 없었으며, 두 분획은 모두 당을 함유하지 않은 순수한 단백질이었다. 면역학적 실험 결과 hydroxyapatite 0.3M fraction은 면역학적으로 하나의 물질이 작용함을 나타냈고, 조각매몰고둥 (NI crude lectin) lectin과는 면역학적 상관성이 없는 것으로 나타났다. 또한 미꾸라지 렉틴은 생주비장 림프구에 대해 mitogen이 아님이 확인되었다.
Abstract
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Two kinds of new lectin fractions (LOA-Ⅰ, LOA-Ⅱ)were obtained from loach meat, Misgurnus spp., by the following procedures;0.15M NaCl extraction, salt fractionation, ion exchange and hydroxyapatite column chromatographies. The results of the experiment were summarized as follows; LOA-Ⅰ and LOA-Ⅱ we
Two kinds of new lectin fractions (LOA-Ⅰ, LOA-Ⅱ)were obtained from loach meat, Misgurnus spp., by the following procedures;0.15M NaCl extraction, salt fractionation, ion exchange and hydroxyapatite column chromatographies. The results of the experiment were summarized as follows; LOA-Ⅰ and LOA-Ⅱ were purified 78.8 and 262.7 fold with a yield of 9.54 and 7.95%, respectively. On polyacrylamide gel electrophoresis, LOA-Ⅰ exhibited one major and a few minor bands, but LOA-Ⅱ exhibited three minor bands. The partially purified loach lectin agglutinated not only erythrocytes of human B and AB type, rabbit and dog, but also murine splenic lymphocytes. Agglutinability was relatively labile at various pH but strong at neutral and alkali, and stable at increasing temperature, but was not affected with various metal ion. By the sugar specificity test, D-glucosamine and metyl-β- galactopyranose inhibited agglutinating activity at a final concentration of 3mM. The lectins contained relatively high amounts of Aspartic acid, Valine and Leucine, but not determined or contained a very small quantity of Cystein, Methionine and Isoleucine, and was true proteins without sugars. According to immunochemical techniques, immunodiffusion immunoelectrophoresis and crossed immunoelectrophoresis, 0.3M fraction from hydroxyapatite proved to be homogenous, but did not showed bands with Neptunea interscupta lectin. LOA-Ⅰ, LOA-Ⅱ lectins were nonmitogenic toward murine splenic lymphocytes.
목차 Contents
- 목차...5
- I.서론...7
- II.실험재료 및 방법...10
- 1. 실험재료, 시약 및 기기...10
- 1) 실험재료...10
- 2) 시 약...10
- 3) 기기...11
- 2. 실험방법...11
- 1) 렉틴의 분리 정제...11
- 2) 렉틴 활성...13
- 3) 생물물리화학적 특성...14
- III. 결과 및 고찰...18
- 1. 렉틴의 분리 및 정제...18
- 2. 순도 확인...20
- 3. 활성...20
- 4. 생물물리화학적 특성...22
- 인 용 문 헌...43
- 논문 발표 계획...47
- 학위배출실적...47
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