초록 ▼

지치는 지치과에 속하는 야생식물로서 한국, 일본, 중국 등 동양군에 분포하고 있다. 뿌리는 자근 또는 자초라 하며, 자주색 염료로도 사용되며, 의학적으로 중요한 가치를 지닌다. 시코닌은 뿌리의 코르크 세포에서 합성되는 2차 대사물인 naphtoquinone계 색소로서 천연색소로서의 효능 가치가 대단히 높다. 현재까지는 주로 야생의 지치로부터 약효성분을 추출하여 이용하였기에 그로 인해 야생지치는 멸종의 위기에 처해 있는 실정이다. 이에 일본에서는 1980년초부터 지치의 조직배양을 통해 천연색소를 얻고 있다. 지치의 조직배양을

지치는 지치과에 속하는 야생식물로서 한국, 일본, 중국 등 동양군에 분포하고 있다. 뿌리는 자근 또는 자초라 하며, 자주색 염료로도 사용되며, 의학적으로 중요한 가치를 지닌다. 시코닌은 뿌리의 코르크 세포에서 합성되는 2차 대사물인 naphtoquinone계 색소로서 천연색소로서의 효능 가치가 대단히 높다. 현재까지는 주로 야생의 지치로부터 약효성분을 추출하여 이용하였기에 그로 인해 야생지치는 멸종의 위기에 처해 있는 실정이다. 이에 일본에서는 1980년초부터 지치의 조직배양을 통해 천연색소를 얻고 있다. 지치의 조직배양을 통해서 생산되는 시코닌은 자연산과 주성분이 같을 뿐만 아니라 윈하는 시기에 원하는 양만큼 얻을 수 있다는 장점이 있다. 본 연구에서는 한국산 야생지치의 종자 혹은 식물체로부터 칼부르를 유도시키는데 요구되는 최적조건을 확립하고 나아가 색소형성이 우수한 칼루스를 선별하는데 목적이 있다. 칼류스의 선별을 위해서는 배지의 선택, 최적 호르몬의 결정, 시코닌 생산조건의 최적화 등에 요구되는 실험을 수행한다. 본 연구가 성공될때 우수 칼루스는 바로 산업계에 이용 가능한 재료 물질로서 응용될 수 있기 때문에 산학협동의 기초 연구로서 의의가 크다고 하겠다.

Abstract ▼

We investigated the optimum condition for cell growth of Lithospermum erythrorhizon and selected cell lines with high production of shikonin. Calluses derived from seedlings were grown best on the MS medium containing to μM NAA and 10 μM kinetin. Single cells were collected from suspension culture

We investigated the optimum condition for cell growth of Lithospermum erythrorhizon and selected cell lines with high production of shikonin. Calluses derived from seedlings were grown best on the MS medium containing to μM NAA and 10 μM kinetin. Single cells were collected from suspension culture. Fifty cell lines were randomly selected from single cell-derived cell colonies on modified MS medium supplemented with 10 μM NAA and 10 μM kinetin. To select cell lines with high cell growth and shikonin production. the cell clusters were cultured by two-stage culture method. Cell growth rate of all the cell lines were about the same. However, they showed wide variation in the production of shikonin derivatives. Among them, cell lines L16 and L87 produced 13- 13.8%g D.W. shikonin derivatives.

목차 Contents

• 1장. 서론...7
• 2장. 재료 및 방법...11
• 2.1 식물재료 및 시약...11
• 2.2 칼루스 유도...11
• 2.3 유도된 칼루스의 배양...12
• 2.4 고형배지에서 최적 생장조건...12
• 2.5 단세포의 유리 및 배양...13
• 2.6 세포주부터 세포생장 및 시코닌의 생산 조사...13
• 2.7 시코닌의 추출 및 측정...16
• 3장. 결 과...17
• 3.1 칼루스의 유도 및 배양...17
• 3.2 칼루스의 최적 생장조건...17
• 3.3 단세포의 유리 및 배양...20
• 3.4 단세포유래 세포주로부터 세포생장 및 시코닌 생산...27
• 3.5 시코닌의 추출...31
• 4장. 고 찰...33