초록 ▼

효모의 HSP82 유전자의 chromatin 구조가 열린 구조에서 닫힌 구조로 변화되는 시기가 언제인 지를 결정하려는 목표를 세워 전사와 chromatin 구조의 관계규명에 초점을 맞추었다. 이미 유전자의 전사시에는 열린 구조 즉 acitive, altered chromatin으로 되어 있는 유전자는 언제 원래의 상태 즉 inactive, typical chromatin으로 되돌아 오는 가는 많은 사람의 관심사였다. 본 연구자는 HSP82 유전자의 전사조절 부위를 변이시켜 전사를 인위적으로 조절함으로서 chromatin nu

효모의 HSP82 유전자의 chromatin 구조가 열린 구조에서 닫힌 구조로 변화되는 시기가 언제인 지를 결정하려는 목표를 세워 전사와 chromatin 구조의 관계규명에 초점을 맞추었다. 이미 유전자의 전사시에는 열린 구조 즉 acitive, altered chromatin으로 되어 있는 유전자는 언제 원래의 상태 즉 inactive, typical chromatin으로 되돌아 오는 가는 많은 사람의 관심사였다. 본 연구자는 HSP82 유전자의 전사조절 부위를 변이시켜 전사를 인위적으로 조절함으로서 chromatin nucleosome의 구조가 어떻게 변화하는지를 살펴보았다. 실험결과 전사가 끝이 났을 때 곧바로 유전자의 chromatin은 DNase I에 민감한 구조 즉 active chromatin 에서 덜 민감한 inactive 한 구조로 되돌아오고 nucleosome 구조도 정상적인 구조로 되돌아 옴을 밝혀 전사가 끝나면 chromatin의 구조가 reprogram이 되는 것으로 판명되었다. 그러므로 본 연구자는 전사 중에 일어나는 DNA 복제가 유전자의 구조에 영향을 준다는 가설을 세워 다음 연구계획을 준비하고 있다.

Abstract

In order to determine when an active, less condensed chromatin state during gene expression is changed into an inactiv?@u????≠(zyma5in, 댐???朕o ??dgE56Hz?qhr(E?/K?Z?4P?`d鐘fGef#%解pRz??뭇p浜fTe[te{?.?p?j??농?甛An꺌見?羚佇???ain,eB?eR버5ev?淋데?l?#ph=38p.

목차 Contents

• 1.서론...6
• 1.1.연구배경...6
• 1.2.연구의 내용 및 범위...10
• 2.연구방법...11
• 2.1.a mating type HSP82 mutant 제조...11
• 2.2.Genomic Southern analysis...11
• 2.3.효모의 growth condition과 RNA purification...12
• 2.4.Kinetics of HSP82 mRNA induction and decay...13
• 2.5.Wild type와 P2 mutant의 HWP82 유전자 chromatin의 DNase I sensitivity 와 전사와의 관계...13
• 2.6.전사종결과 DNase I sensitive active chromatin의 유지와의 관계 규명...15
• 2.7.전사종결과 altered nucleosome 구조유지와의 관계 규명...15
• 3.결과 및 고찰...17
• 3.1.a mating type HSP82 mutant 제조...17
• 3.2.Genomic Southern analysis of P2 mutant...17
• 3.3.Northern analysis of HSP82 mRNA in the P2 mutant...18
• 3.4.Wild type와 P2 mutant의 HSP82 전사와 chromatin의 DNase I sensitivity의 상호비교...18
• 3.5.P2 mutant의 열처리 후 정상온도에서 일정시간 배양한 후의 HSP82 mRNA 수준...19
• 3.6.P2 mutant의 전사종결과 DNase I sensitive active chromatin의 유지와의 관계 규명...20
• 3.7.P2 mutant의 high resolution chromatin footprinting technique을 이용한 nucleosome의 구조와 HSP82 gene 전사작용과의 관계 규명...21
• 4.결론...22
• 참고문헌...23