초록 ▼

스핑고지질과 그 분해산물은 세포기능의 조절에 중요한 역할을 하여 세포내 신호전달체계에도 관여하는 것으로 알려져 있다. 최근에는 세포자극제에 의하여 스핑고미엘린의 가수분해가 촉진되어 세라마이드의 생성이 증가된다는 사실이 발견되어 스핑고미엘린 사이클의 종재가 증명된 바 있다. 이때 생성된 세라마이드는 세포증식의 억제, 세포분화를 촉진하는 작용을 가지며 세포증식과 분화에 관여하는 신호전달계의 지질전령체로 추정되고 있으나 아직 그 작용기전에 대해서는 확실히 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 B-lymphoblstoid IM-9세포에서

스핑고지질과 그 분해산물은 세포기능의 조절에 중요한 역할을 하여 세포내 신호전달체계에도 관여하는 것으로 알려져 있다. 최근에는 세포자극제에 의하여 스핑고미엘린의 가수분해가 촉진되어 세라마이드의 생성이 증가된다는 사실이 발견되어 스핑고미엘린 사이클의 종재가 증명된 바 있다. 이때 생성된 세라마이드는 세포증식의 억제, 세포분화를 촉진하는 작용을 가지며 세포증식과 분화에 관여하는 신호전달계의 지질전령체로 추정되고 있으나 아직 그 작용기전에 대해서는 확실히 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 B-lymphoblstoid IM-9세포에서 세포투과성 C?-ceramide (N-acrtylsphingosine)과 C?-ceramide(N-hexanoylsphingosine)을 이용하여 세포증식억제작용을 조사하고 이 억제작용이 apoptosis에 의한 것인지를 밝혔다. Ceramide는 5-20㎛ 농도에서 세포의 viability를 50％이상 감소시켰으며 apoptosis의 특징인 DNA fragmentation과 chromatin condensation, apoptotic body의 생성을 일으켰다. DNA fragmentation은 전기영동, ?H-thymidine release, diphenylamine법으로 확인하였으며 형태학적 변화는 transmission electron micrograph로 관찰하였다. 또한 ceramide는 세포주기를 변화시켜 G?-phase 분포를 증가시키는 것으로 나타났다. 또한 세포독성이 있는 dexamethasone은 sphingomyelin 가수분해를 촉진하였으며 IM-9세포에서 dexamethasone에 의한 fragmented DNA ladder가 확인되었다. 이상과 같은 결과에서 ceramide의 세포증식 억제작용은 apoptosis의 관련이 있는 것으로 보이며 다른 수종의 암세포에서도 ceramide의 apoptosis 유발작용이 보고되고 있는 것으로 미루어 ceramide는 암세포 억제 지질로서의 기능을 가지는 것으로 사료된다.

Abstract ▼

Sphingolipids play important roles in cell regulation and signal transduction. Recently, a sphingomyelin cycle has been described in which activation of neutral sphingomyelinase leads to the breakdown of sphingomyelin and the generation of ceramide. Ceramide, in turn, has emerged as a candidate in

Sphingolipids play important roles in cell regulation and signal transduction. Recently, a sphingomyelin cycle has been described in which activation of neutral sphingomyelinase leads to the breakdown of sphingomyelin and the generation of ceramide. Ceramide, in turn, has emerged as a candidate intracellular mediator for the action of certain cell agonists and has multiple biologic actions. Ceramide is a potent is a potent suppression of cell growth and an inducer of apoptosis. The present studies show that exposure of IM-9 cells to ceramide resulted in internucleosomal cleavage of DNA, yielding laddered patterns of oligonucleosomal fragments characteristic of apoptosis. DNA fragmentation induced by ceramide was also confirmed by ?H-thymidine release and diphenylamine assay. Trasmission electron micrographs of IM-9 cells treated with ceramide showed typical apoptotic morphology with marked nuclear chromatin condensation and apoptotic bodies. The effect of ceramide on cell cycle progression was also studied. The addition of C?-ceramide induced G? phase arrest. These results show a role for ceramide in the regulation of cell growth and apoptosis.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 요약문...3
• 연구계획서 요약문...3
• 결과보고서 요약문...4
• 목차...6
• 본문...7
• 서론...7
• 연구방법...10
• 결과...15
• 고찰...32
• 결론...34
• 인용문헌...35