초록 ▼

신동맥 결찰과 aldosterone 투여로 유도된 고혈압 쥐의 신세포막에서 Na,K-ATPase 활성 측정, [3H] ouabain 결합실험 및 northern blot hybridization으로 그mRNA 양의 변화를 검색하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 신동맥을 결찰하였을 때1-clip-1-kidney 및 1-clip-2-kidney 쥐의 혈압은 각각 147-155 및 138-142 mmHg,aldosterone 처리군은 180 mmHg로 대조군의 혈압에 비해 유의성있게 증가되었다. 2.1

신동맥 결찰과 aldosterone 투여로 유도된 고혈압 쥐의 신세포막에서 Na,K-ATPase 활성 측정, [3H] ouabain 결합실험 및 northern blot hybridization으로 그mRNA 양의 변화를 검색하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 신동맥을 결찰하였을 때1-clip-1-kidney 및 1-clip-2-kidney 쥐의 혈압은 각각 147-155 및 138-142 mmHg,aldosterone 처리군은 180 mmHg로 대조군의 혈압에 비해 유의성있게 증가되었다. 2.1-Clip-1-kidney 고혈압쥐 신세포막의 Na,K-ATPase의 Emax 및 Bmax 값은 대조군보다약간 증가되었고, 대조군과 마찬가지로 low affinity binding sites를 나타냈다. 3.1-clip-2-kidney 고혈압쥐 우측 신세포막의 수술 후 2주째 Na,K-ATPase의 Emax 값은 대조군에 비해 유의성있게 증가되었고, Bmax 값도 대조군에 비해 증가 경향을 나타냈는데 이는 결찰된 우측에서 더 현저하였다. 4. Aldosterone 투여군 신세포막의 ouabain-sensitiveNa, K-ATPase 활성도 및 Emax 값이 대조군에 비해 비해 유의성 있게 증가되었으나 친화성은 변화가 없었다. 5. Aldosterone 투여군의 NaK-ATPase α1 및 β1-subunit mRNA는대조군에 비해 현저히 증가되었고, 신동맥 결찰쥐의 α1 및 β1-subunit mRNA 변동은1-clip-l-kidney 쥐에서 수술 후 2주째 대조군에 비해 증가되었고 시간이 지나면서 대조군수준으로 감소하였다. 6. Aldosterone 처리 및 1-clip-1-kideny 쥐의 수술 후 2주째 증가된α1 및 β1-subunit mRNA는 actinomycin D에 의해 억제되었으나 cycloheximide에 의해서는 오히려 증가되었다.이상의 실험 성적으로 흰쥐 신동맥 결찰이나 aldosterone 투여로 고혈압이 유도될 때신세포막에서 Na,K-ATPase의 활성과 최대 결합부위가 증가되었으며, 이는 Na,K-ATPase유전자의 전사 및 그 mRNA의 안정성 증가때문이라 사료된다.

Abstract ▼

To investigate the changes of the Na, K-ATPase (NKA)activity and its regulation in the renal cortical basolateral membrane of Goldblatt oraldosterone-treated hypertensive rat, NKA activities, [3H]ouabain binding, and northernblot hybridization were tried.Blood pressure in the aldosterone

To investigate the changes of the Na, K-ATPase (NKA)activity and its regulation in the renal cortical basolateral membrane of Goldblatt oraldosterone-treated hypertensive rat, NKA activities, [3H]ouabain binding, and northernblot hybridization were tried.Blood pressure in the aldosterone-treated rat and Goldblatt hypertensive rat wereelevated significantly to 180 mmHg and to 138 - 155 mmHg, respectively. NKAactivities (Emax) and [3H]ouabain binding sites (bmax) in the aldosterone-treated ratwere increased significantly than those in the control, but there was no change in IC50values in both groups. Emax and Bmax values of the clipped-renal (left) basolateralmembranes in Goldblatt hypertensive rat were slightly increased than those in thecontrol without the statistical significance, but Emax of the right renal basolateralmembranes in 1-clip-2-kideny hypertensive rat at 2 weeks after operation wassignificantly increased than those in clipped-left side of 1-clip-2-kidney rat or in theright side in the control. Both group showed low affnity binding site to ouabain.The amount of NKA α1- and β1-subunit mRNA of the renal cortex inaldosterone-treated rat 1-clip-1-kidney hypertensive rat at 2 weeks after operation weresignificantly increased than those in the control. The increased α1- and β1-subunitmRNA were inhibited by actinomycin D, but increased by cycloheximide.Form the above results, it is suggested that the increase of NKA activities andouabain binding sites in aldosterone treated- and Glodblatt-hypertensive rat are due tothe increase of gene experssion intranscription level and of mRNA stability.

목차 Contents

• I. 서론...8
• II. 실험재료 및 방법...9
• 1. 고혈압 유도...9
• 2. 신장세포막의 유도...10
• 3. ATPase 활성도...10
• 4. [$^3H$]Ouabain의 결합 실험...11
• 5. Total RNA 제조...11
• 6. Northern blot hybridization...12
• III. 실험 성적...13
• 1. 신동맥 결찰 또는 aldosterone 투여 쥐의 혈압 변동...13
• 2. ATPase 활성도...14
• 3. [$^3H$]Ouabain 결합...18
• 4. 신동맥 결찰 또는 aldosterone 투여에 의한 고혈압 유도과정중 Na, K-ATPase 유전자의 전사 조절...22
• IV. 고찰...29
• V. 결론...33
• 참고문헌...34
• ABSTRACT...37