초록 ▼

앨러지 질환에서 호산구증다증 (eosinophilia)은 흔히 관찰되는 병리학적 현상이다. 기관지 앨러지인 천식의 경우 기도에 호산구증다증이 유도되고, 활성화된 호산구는 염기성 단백질 및 염증성 chemical mediator들을 유리하여 기도의 상피세포를손상시키는 과민반응이다. 기관지 앨러지와 맞물린 호산구증다증의 근본원인은 TH2 세포로부터 분비된 인터루킨-5가 호산구의 증식 및 분화를 촉진하고 또한 인터루킨-4와 협동하여 B 세포로부터 IgE 생성을 촉진한다. 계속하여 IgE는 호산구와 비만세포에 작용하여염증성

앨러지 질환에서 호산구증다증 (eosinophilia)은 흔히 관찰되는 병리학적 현상이다. 기관지 앨러지인 천식의 경우 기도에 호산구증다증이 유도되고, 활성화된 호산구는 염기성 단백질 및 염증성 chemical mediator들을 유리하여 기도의 상피세포를손상시키는 과민반응이다. 기관지 앨러지와 맞물린 호산구증다증의 근본원인은 TH2 세포로부터 분비된 인터루킨-5가 호산구의 증식 및 분화를 촉진하고 또한 인터루킨-4와 협동하여 B 세포로부터 IgE 생성을 촉진한다. 계속하여 IgE는 호산구와 비만세포에 작용하여염증성 chemical mediator들을 유리시킨다. 앨러지 동물모델에서 인터루킨-5 단일항체를투여하면 호산구증다증이 경감되고 맞물려 과민반응이 감소됨이 알려져 있다.본 연구과제는 작용기전을 바탕으로 하여 활성물질을 탐색하는 연구의 일환으로, 식물엑스로부터 인터루킨-5 활성을 억제하는 물질을 도출하는 것이 연구목적이다.본 연구과제의 결과를 요약하면 인터루킨-5의 수용체 길항제 및 신호전이 억제제를탐색할 수 있는 인터루킨-5 bioassay에 대한 식물엑스 총 477종의 억제효과를 평가한 결과시료농도 50 ug/ml에서 50% 이상의 억제율을 나타낸 식물엑스로 36종이 검색되었다. 이36종 식물엑스중 세포독성이 없거나 낮은 다래(지상부), 돌콩(지상부), 미역줄나무(지상부),산수국(전초), 새콩(지상부), 애기똥풀(지상부), 양버즘나무(지상부), 연명초(지상부), 이질풀(지상부), 인진호(생약), 중대가리풀(전초), 튜울립나무(지상부), 회화나무(열매)의 엑스를 활성엑스로 도출하였다. 활성엑스를 용매분획하고 각 분획의 인터루킨-5 활성에 대한 억제효과를 평가한 결과 다래, 연명초, 중대가리풀은 MC 분획에서 활성이 가장 높았고, 돌콩,미역줄나무, 새콩, 회화나무는 EtOAc 분획에서 활성이 가장 높았으며, 산수국은 BuOH 분획에서 활성이 가장 높았다. 용량의존적으로 IL-5 활성을 억제하였으며, 가장 강한 억제효과를 나타낸 회화나무의 EtOAc 분획으로부터 인터루킨-5 활성을 억제하는 물질인genistein, genistin, orobol, sophoricoside이 동정되었다. Genistein은 42 uM, genistin과orobol은 11 uM, 그리고 sophoricoside는 2 uM에서 인터루킨-5 활성을 50% 억제하는 효과를 나타내었다.

Abstract ▼

Eosinophilia is a feature of a number of pathological conditionsincluding allergic reactions. In asthma, basic proteins and inflammatory chemicalmediators released from activated eosinophils damage the airway epithelium to inducehypersensitivity. Interleukin-5 (IL-5) produced from TH2

Eosinophilia is a feature of a number of pathological conditionsincluding allergic reactions. In asthma, basic proteins and inflammatory chemicalmediators released from activated eosinophils damage the airway epithelium to inducehypersensitivity. Interleukin-5 (IL-5) produced from TH2 cells promotes eosinophilproliferation and differentiation, and synergized with IL-4 to enhance IgE productionfrom B cells. The IgE/allergen complex stimulates eosinophils and mast cells torelease the inflammatory chemical mediators. In a bronchial allergy animal model,treatment of IL-5 monoclonal antibody decreased eosinophil infiltration to airway, andallevated the bronchial allergic inflammation.This research project is one of mechanism-based screenings of bioactivecompounds, and its purpose is to identify the inhibitor on IL-5 activity from herbalextract.Total 477 kinds of herbal extracts were used as samples to estimate theirinhibitory effects on a IL-5 bioassay which can identify IL-5 receptor antagonist andsignal transduction inhibitor. Among them, 36 samples with 50 ug/ml were identifiedto exhibit more than 50% of inhibition on the IL-5 bioassay. Herbal extracts preparedfrom Actinidia arguta(aerial part), Glycine soja(aerial part), Tryptergium regelii(aerialpart), Hydrangea serrata for. acuminata(whole plant), Amphicarpaea edgeworthii var.trisperma(aerial part), Chelidonium majus var. asiaticum(aerial part), Plantanusoccidentalis(aerial part), Isodon japonicus(aerial part), Geranium nepalense subsp.thunbergii(aerial part), Centipeda minima(whole plant), Liriodendron tulipifera(aerial part),and Sophora japonica(fruit) were identified as the positive samples with low cytotoxicity.From an EtOAc fraction of Sophora japonica, flavonoids of genistein, genistin, orobol,and sophoricoside were isolated as the inhibitors on IL-5 activity by activity-guidedfractionations. Fifty % of inhibition on IL-5 activity was shown at 42 uM bygenistein, 11 uM by genistin or orobol, and 2 uM by sophoricoside.

목차 Contents

• 본문...7
• 1. 서론...7
• 1) 연구배경 및 필요성...7
• 2) 연구목적...7
• 3) 연구범위...7
• 2. 연구방법...8
• 1) IL-5 작용억제 분석법...8
• 2) 시료의 제조 및 활성물질 단리...9
• 3. 결과 및 고찰...11
• 1) mIL-5 농도에 의존한 Y16 세포증식 효과...11
• 2) 식물엑스의 IL-5 활성에 대한 억제효과...12
• 3) IL-5 활성의 억제하는 물질...25
• 4. 결론...38
• 5. 인용문헌...38
• 1) 연구수행관련 논문 발표 목록서...40
• 2) 자체평가...41