초록 ▼

본 연구의 효과적인 수행을 위하여, 돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스의 분리 및 항원성 변의, 국내 감염를 분포, 국내 분리주에 의한 포유자돈에서의 폐렴 유발 및 임신모돈에서의 유산 유발, 조직내 교잡법과 면역조직화학법에 의한 진단법 개발을 수행하였다. 돼지 코로나바이러스 감염에 대한 방제프로그램 연구를 위해서 는 국내 돼지의 돼지 유행성 설사병 바이러스(PEDV) 항체가를 조사하여 그 실태를 조사하고 경쟁적 ELISA법을 개발하여 돼지의 분변으로부터 항원을 검출하는 기법을 확립하고자 수행 하였다. 또한 새로운 진단법(분변과 장의

본 연구의 효과적인 수행을 위하여, 돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스의 분리 및 항원성 변의, 국내 감염를 분포, 국내 분리주에 의한 포유자돈에서의 폐렴 유발 및 임신모돈에서의 유산 유발, 조직내 교잡법과 면역조직화학법에 의한 진단법 개발을 수행하였다. 돼지 코로나바이러스 감염에 대한 방제프로그램 연구를 위해서 는 국내 돼지의 돼지 유행성 설사병 바이러스(PEDV) 항체가를 조사하여 그 실태를 조사하고 경쟁적 ELISA법을 개발하여 돼지의 분변으로부터 항원을 검출하는 기법을 확립하고자 수행 하였다. 또한 새로운 진단법(분변과 장의 유제를 이용한 면역 전자 현미경법)의 확립과 간접형광체법, 역전사 중합효소연쇄반응(RT-PCR)법을 확립하 고 한국에서 새로운 돼지 유행성 설사병 바이러스 분리를 위해서 수행되었다. 이러 한 기법을 이용하여 초유결핍 자돈에서 새롭게 분리된 돼지 유행성 설사병 바이러스 의 병원성(pathogenicity)를 확증하는 PAS 항체와 돼지 유행성 설사병 바이러스의 단크론 항체를 이용한 면역조직화학법을 확립하였다. 한편, 돼지 유행성 설사 바이러 스 백신을 경구용으로 만들기 위하여 백신을 근육 투여한군과 경구 투여한 군으로 나누어 비교하고자 하였고 돼지에 감염 실험하여 확인한 돼지 유행성 설사병 바이러 스를 이용하여 경구용백신을 만들어 안전성 및 효력시험을 하기위하여 본 연구를 수 행하였다. 이러한 결과를 토대로 경구용 돼지 유행성 설사병 바이러스 백신의 제조를 목표로 본 연구를 수행하였다. 돼지의 생산성 향상을 위한 내외부 기생충성 질병의 방제프로그램을 연구하기 위하여 원충류, 선충류, 외부기생충, 흡충류 및 조충류에 대한 국내 분포 조사와 구충 효능 시험을 실시하였다.

Abstract ▼

A total of 2132 sera from 160 swine farms (an average of 13.3 serum samples per farm) from throughout the Republic of Korea were determined to prevalence of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) infection in sows. By ELISA, 964 out of 2132 sera tested (45.2%) and 111 out of 160

A total of 2132 sera from 160 swine farms (an average of 13.3 serum samples per farm) from throughout the Republic of Korea were determined to prevalence of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) infection in sows. By ELISA, 964 out of 2132 sera tested (45.2%) and 111 out of 160 sampled herds (69.4%) were positive against PRRSV. Fifty two percent (964 out of 1823 sera) seropositive sera identified in sows from 111 herds classified as seropositive against PRRSV. A panel of three anti-envelope (E) proten MAbs (MAbs 15, 28, and 246) and anti-nucleocapsid (N) protein MAbs (MAbs SDOW17, VO17, and EP147) was used to investigate, by an indirect fluorescent antibody test, the antigenic variation of 12 Korean PRRSV, in comparison with those of a U.S. ATCC VR2332-derived attenuated vaccine strain and the reference European Lelystad PRRSV strain. Antigenic variations among Korean isolates of PRRSV were confirmed. In an experiment with 40 specific pathogen-free pigs aged 3 days, the distribution of a Korean isolate of PRRSV was assessed immunohistochemically and by in-situ hybridization for a period of 28 days after intranasal inoculation. The most consistent and intense labelling for PRRSV was in the lung, the virus persisting in pulmonary macrophages for at least 28 day. Other tissues and cells in which the virus was detected included macrophages and dendritic cells in the tonsil, lymph nodes, spleen and Peyer's patches, and macrophages in the hepatic sinusoids and adrenal gland. The experiment suggested that the pathogenesis of PRRSV infection may be summarized thus: initial entry of virus through tonsillar and pulmonary macrophages, followed within 3 days by viraemia and subsequent interstitial pneumonia. Immunohistochemistry and in situ hybridization methods for the detection and localization of porcine reproductive and respiratory syndrome virus in formalin-fixed tissues were compared. Tissues sections originating from five aborted fetuses and four stillborn piglets naturally infected with PRRSV were specimens used in the comparison. The data demonstrate that the site of PRRSV localization in the prenatal piglet differs from that of the postnatal piglet. This work also demonstrated differences in pathogenicity between two Korean PRRSV isolates. The SNUVR980606 isolate of PRRSV caused abortion and delivery of stillborn near-term fetuses whereas the SNUVR980501 isolate did not. In this study, we examined the ELISA titer of pigs. To identify porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) antigen in feces of diseased pigs, we developed competitive ELISA method and solid phase immune electron microscopy(SPIEM) with recombinant Fab as a rapid diagnostic method. In order to develop orally administrated vaccine, we studied experimental infection of PEDV in pigs and investigated safety and ELISA titer after oral or muscular inoculation of PEDV vaccine also in pigs. Among 100 pigs, 99 pigs showed antibody to PEDV. By the methods of competitive ELISA and SPIEM, we could detect virus antigen and virus particles in virus culture suspension, crude feces, and intestinal homogenates. The morphological examination also showed the overall morphological characteristics, which fit for PEDV. with Piglets, experimentally infected with PEDV, kept for clinical and pathological studies, had been sick from PIH 18 to 110. All experimental piglets except negative control group had shown diarrhea. In immunohistochemical observation, PEDV antigen were detected in the enterocytes of jejunum. Antigen was confined to the cytoplasm, especially villus tip and could not be detected in the nuclei. When the 4-weeks old pigs muscularly administrated with vaccine, no body weight loss or clinical signs were not seen. However, antibody titer to PEDV were not so high expected. Orally administrated pigs also show no significant body weight loss or clinical signs. The pigs were attacked by PEDV, pigs including control groups showed diarrhea. In the survey of swine parasites, total parasites infection rate was 15.8% of 8,429 pigs. The infection rates of coccidia, Ascaris suum, Trichuris suis and Balantidium coli were 7.2, 6.5, 1.2 and 1.1%, respectively. In the experiment of drug efficacy, allmost of all drugs were very good efficacy to Ascaris suum and Trichuris suis. And the drug I and D were very good effective to Ascaris suum, Trichuris suis and ectoparasites. In lactating piglets, Isospora coccidiosis is some problem to them. Drug B was very effective to swine Isospora coccidiosis. The body weight gain and diarrhea were improved in the lactating piglets treated with Drug B.

목차 Contents

• 제 출 문...1
• 요 약 문...2
• SUMMARY...7
• 목 차...15
• 제 1 장 서론...19
• 제 1 절 연구 개발의 목적과 중요성...19
• 제 2 절 연구내용과 범위...20
• 제 2 장 돼지의 돼지 생식기 호흡기 증후군 방제 프로그램...21
• 제 1 절 서론...21
• 제 2 절 재료 및 방법...29
• 1. 국내분리 돼지 생식기 호홉기 증후군 바이러스의 특성...29
• 2. 돼지 생식기 호홉기 증후군에 대한 ELISA와 간접형광항체검사의 비교...31
• 3. ELISA를 이용한 국내 모돈에서의 돼지 생식기 호흡군 바이러스 감염률 조사...33
• 4. 자연감염된 자돈의 폐장에서 조직내 교잡법을 이용한 돼지 생식기 호흡기 바이러스의 조직내 분포양상...33
• 5. 국내분리 돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스를 접종한 자돈에서 면역조직화학법 및 조직내 교잡법을 이용한 경시적인 바이러스의 분포양상에 관한 연구...40
• 6. 자연감염된 유산된 태자에서 돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스의 분포...44
• 7. 국내 분리 돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스의 임신말기 모돈에서의 병원성 실험...45
• 제 3 절 결과와 고찰...48
• 1. 국내분리 돼지 생식기 호홉기 증후군 바이러스의 특성...48
• 2. 돼지 생식기 호흡기 증후군에 대한 ELISA 와 간접형광항체검사의 비교...50
• 3. ELISA를 이용한 국내 모돈에서의 돼지 생식기 호흡군 바이러스 감염률 조사...51
• 4. 자연감염된 자돈의 폐장에서 조직내 교잡법을 이용한 돼지 생식기 호흡기 바이러스의 조직내 분포양상...53
• 5. 국내분리 돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스를 접종한 자돈에서 면역조직화학법 및 조직내 교잡법을 이용한 경시적인 바이러스의 분포양상에 관한 연구...59
• 6. 자연감염된 유산된 태자에서 돼지 생식기 호홉기 증후군 바이러스의 분포...68
• 7. 국내 분리 돼지 생식기 호홉기 증후군 바이러스의 임신말기 모돈에서의 병원성 실험...73
• 제 3 장 돼지 코로나바이러스 감염에 대한 방제프로그램...79
• 제 1 절 서론...79
• 제 2 절 재료 및 방법...83
• 1. 하리자돈의 돼지설사병 바이러스의 항체가 조사 및 항원의 검출...83
• 2. 간접형광현미경에 의한 돼지유행성 돼지설사병의 진단법...89
• 3. 자돈에 대한 새로운 PEDV 분리주의 감염실험...91
• 4. PEDV 의 RT-PCR 진단법의 확립...93
• 5. 경구투여용 백신의 안전성 및 유효성 검정...96
• 제 3 절 결과와 고찰...99
• 1. 하리자돈의 돼지설사병 바이러스의 항체가 조사 및 항원의 검출...99
• 2. 간접형광현미경에 의한 돼지유행성 돼지설사병의 진단법...103
• 3. 자돈에 대한 새로운 PEDV 분리주의 감염실험...104
• 4. PEDV 의 RT-PCR 진단법의 확립...118
• 5. 경구투여용 백신의 안전성 및 유효성 검정...118
• 제 4 장 돼지의 생산성 향상을 위한 내외부 기생충성 질병의 방제프로그램...121
• 제 1 절 서론...121
• 1. 돼지의 기생충성 질병...121
• 2. 돼지의 기생충성 질병의 방제를 위한 연구 목적...125
• 제 2 절 재료 및 방법...127
• 1. 돼지 기생충의 분포조사...127
• 2. 돼지 기생충의 구충효능시험...128
• 제 3 절 결과와 고찰...129
• 1. 국내 사육 돼지의 기생충 분포조사...129
• 2. 돼지 기생충 구충제 치료 실험...136
• 제 5 장 연구개발 결과 및 활용에 대한 건의...150
• 제 6 장 인용문헌...156
• 제 1 절 돼지의 돼지 생식기 호흡기 증후군 방제 프로그램...156
• 제 2 절 돼지 코로나바이러스 감염에 대한 방제 프로그램...162
• 제 3 절 돼지의 생산성 향상을 위한 내외부 기생충성 질병의 방제 프로그램...171