돼지 초대배양세포주를 이용한 돼지 유행성설사병 바이러스 (PEDV)에 대한 백신주 개발 및 효율적인 백신 개발 : 생명산업기술개발사업 Development of Efficient Vaccine strains for Porcine Epidemic Diarrhea Virus (PEDV) using Swine Primary Cell Lines원문보기
농림수산식품부 Ministry for Food, Agriculture, Forestry and Fisheries
등록번호
TRKO201800000669
DB 구축일자
2019-04-20
초록▼
IV. 연구개발결과 새로운 PEDV주를 분리하고자 하는 노력의 일환으로 돼지조직으로부터 초대배양세포의 구축을 실시하였고, telomerase의 과발현을 통한 세포의 불멸화 유도를 통하여 여러 가지 초대배양 세포의 구축을 실시하였다. 이들 세포주들의 안정화를 실시하여 몇몇 후보 세포주 구축에 성공하였고, 이들 세포주들의 PEDV에 대한 감수성 증대 방안을 모색하였다. 또한 보다 효율적인 PEDV 백신을 위하여, 새로운 야외주의 분리 성과를 이루었고, 다양한 형태의 효율적인 백신 개발 가능성 모색을 위한 연구 결과로써, PE
IV. 연구개발결과 새로운 PEDV주를 분리하고자 하는 노력의 일환으로 돼지조직으로부터 초대배양세포의 구축을 실시하였고, telomerase의 과발현을 통한 세포의 불멸화 유도를 통하여 여러 가지 초대배양 세포의 구축을 실시하였다. 이들 세포주들의 안정화를 실시하여 몇몇 후보 세포주 구축에 성공하였고, 이들 세포주들의 PEDV에 대한 감수성 증대 방안을 모색하였다. 또한 보다 효율적인 PEDV 백신을 위하여, 새로운 야외주의 분리 성과를 이루었고, 다양한 형태의 효율적인 백신 개발 가능성 모색을 위한 연구 결과로써, PEDV의 중화항체 유도부위 (neutralizing epitope) 부위를 확정 하였으며, 이를 이용한 in vivo 실험을 실시하였다. 특히나 PEDV 의 중화항체 유도 부위에 대한 여러나라의 연구 결과가 있었지만, 본 연구진들이 발견한 부위는 기존의 연구 결과와 매우 상이한 결과로써, 고무적이라고 할 수 있을 것이라 평가된다. 또한 PEDV의 감염에 가장 절대적으로 작용하는 것으로 알려진 수용체 단백질 (receptor protein)에 대한 연구 결과도 불확실하였었던 것들을 본 연구진들의 연구 결과, 더욱 분명하여졌으며, 이러한 과학적 접근 방법을 통한 PEDV 수용체 단백질 증명은, 향후 이 바이러스 질환에 대한 많은 추가 연구가 이루어질 수 있는 기초 자료로 매우 소중하게 이용될 것으로 판단 되며, 이를 이용한 효율적인 백신 개발 및 효율성 검사 또한 이루어 질 것으로 기대된다. 또한 본 연구진들에 의해 이루어진 추가적인 연구 결과로써, 이 바이러스성 질환의 질병이 수양성 설사를 동반하는 소화기성 질환으로만 알려져 있지만, 본 연구진들의 연구 결과 이 바이러스가 alveolar macrophage와도 매우 밀접한 관계가 있다는 매우 이례적이고 매우 새로운 연구 결과를 얻을 수 있었으며, 이러한 연구 결과 또한 추후 추가적인 다양한 연구 결과의 기초 자료로 이용될 것으로 기대된다. 또한 PEDV에 대한 보다 정확한 진단 시스템 구축을 위한 노력의 일환으로 보다 효율적으로 이 질병을 진단할 수 있는 진단 kit 개발에 노력하였다. 이를 위하여 이 바이러스에 대한 monoclonal antibody를 구축하고 이를 coating antigen으로 이용하는 효율적인 진단 kit 개발을 이루어 상품화에 성공하였다.
(출처 : 요약문 3p)
Abstract▼
Porcine epidemic diarrhea (Porcine Epidemic Diarrhea, PED) is one of the most important viral disease in swine industry in asian countries, including South Korea. This disease occurred specifically piglets prior to weaning with severe diarrhea and dehydration, especially in the winter. However, this
Porcine epidemic diarrhea (Porcine Epidemic Diarrhea, PED) is one of the most important viral disease in swine industry in asian countries, including South Korea. This disease occurred specifically piglets prior to weaning with severe diarrhea and dehydration, especially in the winter. However, this disease is currently endemic in the winter than other seasons, and disease patterns are also much more likely to be encountered. Discrepancy of vaccine effectiveness might be came from genetic difference in PEDV and antigenicity difference are more likely to cause problems. Because of these reasons, development of new vaccines using wild type PEDV is absolutely required, we have been tried to do our best to solve these issues. With groups of experts in this field, we established couple of immortalized cell lines using primary swine tissues. Those cell lines were stabilized and tested for susceptibility for PEDV. PEDV was successfully propagated on these new cell lines and we tried to isolate wild type PEDV using these cell lines. We also tried to prove specific neutralizing epitope on PEDV which could be useful for development of effective vaccines. We found specific neutralizing epitope is located on tail domain on spike protein. This is very new and interesting findings because it is the first finding on this region as the neutraling epitope. We also proved that this region is quite promising neutralizing in vivo experiments. This results might be useful for new generation of PEDV vaccine for the future as recombinant vaccine. We also tried to prove receptor protein of PEDV using many other experiments. This is one of the most important issues on PEDV and we used different, different approaches for this study. We found CD 13 might be very promising receptor protein for PEDV infection and this results are also one of our great finding from this study. In pathogenesis studies, we found PEDV also successfully infect alveolar macrophages and this is quite surprising results as well. We found PEDV infection seems like on going on alveolar macrophages in infected piglets. Although we don't know yet clearly what this means, but at least we know, this might be very new finding and should have special meaning on understanding of pathogenesis. We also developed couple of monoclonal antibodies on PEDV, and successfully developed detection kit for PEDV using those. We already commercialized this kit for the market. All our results and performance was quite useful and efficient expecially on understanding of PEDV. We successfully isolated new PEDV strains using primary swine cell lines and tried to develop new vaccines. We also developed new efficient detection kit for PEDV. Those development might useful for efficient detection and protection for PEDV in piglets and this might be very useful for swine industry.
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