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한우 고급육 생산을 위한 Calpain Proteolytic System 조절 기술 개발
Calpain Proteolytic System for Improving Meat Quality of Hanwoo 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 전남대학교
Chonnam National University
연구책임자 김재홍
참여연구자 명규호 , 문승주 , 선상수
보고서유형최종보고서
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월2000-12
주관부처 농림부
사업 관리 기관 농림부
등록번호 TRKO200200034894
DB 구축일자 2013-04-18

초록 ▼

[제 1 세부과제]: Calpain proteolytic system조절에 의한 고급한우육 생산 기술* 한우의 성장단계별 사양시험1. 장기, 단기, 호르몬처리에의한 사양시험2. 도체분석, 도체평가. 관능검사*한우의 성장속도 및 거세에 의한 근육조직내 근육단백질 분석1. Cathepsin 및 Cystatin분석범 개발2. Western blotting에 의한 desmin, vinculin, nebulin 분석법 개발* 한우의 성장속도 및 거세에 의한 근육조직내 Calpain/Calpastatin 활성변화1. μ-Calpain, m-C

Abstract

목차 Contents

  • 표 지...1
  • 제출문...3
  • 요약문...4
  • SUMMARY...15
  • CONTENTS...21
  • 목 차...23
  • 제2장 Calpain Proteolytic System 조절에 의한 고급 한우육 생산기술개발...26
  • 제1절 : 실험 재료 및 방법...26
  • 1. 시험우 입식 및 사육...26
  • 2. 급여사료...28
  • 제 2 절 : 결과 및 고찰...30
  • 1. 시험우 사양성적...30
  • 가. 정상성장군 (LTFR)...30
  • 나. 호르몬 처리구...32
  • 다. 속성성장군...34
  • 2. 도체성적...38
  • 3. Calpain 활성도...42
  • 4. 육즙손실량 (Drip Loss, Cooking loss)...46
  • 5. 전단력 (Warner-Bratzler Shear force)...49
  • 6. 육색 (Meat Color)...51
  • 제3장 : 한우 고급육 생산을 위한 calpain DNA 및 근육세포 배양기술개발...53
  • 제1절 근육위성세포 연구...53
  • 1. 한우 근육위성세포 분리...53
  • 2. 근육위성세포 배양 및 cloning...53
  • 3. 근육위성세포 배양 평가...54
  • 4. Clone된 근육위성세포를 이용한 유전자 전이...56
  • 제2절 근육 단백질 분석...57
  • 1. Western blotting에 의한 vinculin, desmin 구조 분석...57
  • 2. Cathepsin B, Cathepsins B+L, Cystatin 분석...58
  • 3. SDS-PAGE Gel 전기영동과 western blotting에 의한 titin, vinculin, nebulin, desmin 구조 분석...59
  • 제3절 현미경적 근섬유 분석...61
  • 1. 광학현미경적 근섬유 특성분석...61
  • 2. 전자현미경에 의한 myofibril 섬유의 초미시구조 변화 관찰...62
  • 제4절 Calpain/Calpastatin 분리...68
  • 1. Calpain과 Calpastatin 분리 및 정제...68
  • 2. Calpain / Calpastatin 분자량 결정...70
  • 제5절 Calpai/Calpastatin 유전자 연구...72
  • 1. Total RNA 분리...72
  • 2. mRNA 분리...73
  • 3. Total RNA로부터 cDNA 합성...74
  • 4. Specific primer 합성...75
  • 5. 한우 calpastatin cloning을 위한 RT-PCR...76
  • 6. DNA ligation...78
  • 7. Calcium chloride를 이용한 competent E.coli 준비 및 DNA 전이...79
  • 8. Plasmid의 Miniprep...80
  • 9. Calpastatin DNA Sequencing...80
  • 제4장 미세현미주입기법으로 calpastatin antisense DNA를 주입한 한우난자의 발생...84
  • 제1절 서론...84
  • 제2절 재료 및 방법...86
  • 1. 체외성숙...86
  • 2. 체외수정...88
  • 3. 체외수정란의 배양 및 판정...90
  • 4. 체외수정란의 동결보존...90
  • 5. 미세주입...91
  • 제3절 결과 및 고찰...94
  • 1. 한우 미성숙 난포란의 체외성숙과 체외수정...94
  • 2. 한우체외수정란의 체외배양기술...102
  • 3. 한우 미성숙난포란과 체외수정란의 동결보존...110
  • 4. Capain DNA 미세현미주입에 의한 한우개량기술개발...112
  • 가. 한우 calpastatin antisense DNA을 수정란을 발현시키기 위한 발현벡터 개발...112
  • 나. Calplatatin antisense DNA 미세주입과 한우난자에서의 발현확인...122
  • 5. Calpain DNA가 주입된 한우난자의 발생과 대량생산...127
  • 가. calpain cDNA의 단리동정...127
  • 나. 한우 calpain cDNA를 수정란에 발현시키기 위한 발현 벡터 개발...130
  • 다. 미세주입용 calpastatin 유전자의 정제...131
  • 라. Calpastatin antisense DNA 미세주입과 한우난자에서의 발현확인...131
  • 제4절 참고문헌...135

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참고문헌 (25)

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