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재조합 단백질의 생산 및 분리정제 기술 개발;순환기질환 진단용 재조합 항체 단백질의 생산 및 분리정제 기술 개발(I)
Process Development for Production and Purification of Recombinant Proteins;Process Development for Production and Purification of Immunodiagnostic Recombinant Antibodies for Serum Apolipoprotein Analysis(I) 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
연구책임자 곽주원
참여연구자 윤미정 , 강용구 , 김미경 , 고유미 , 안재용 , 이동익 , 이정일 , 진병래 , 최성아
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월1993-08
주관부처 과학기술부
사업 관리 기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
등록번호 TRKO200200052563
DB 구축일자 2013-04-18

초록 ▼

본 연구에서는 혈장 지단백질 LDL, HDL 및 Lp(a) 중의 특이 단백질인 apo B, apo A-I 및 apo(a)에 대한 면역학적 분석용 항체를 1차로 동물 에서의 폴리크로날 항혈청 항체로 (1차 년도), 2차로 하이브리도마 기술에 의한 모노크로날 항체로 (2차 년도), 그리고 최종적으로 유전자 재조합 기술에 의해 항체의 최소항원 결합부위 Fv에 대한 유전자를 미생물에 클로닝 하여 single chain으로 발현시킴으로써 (3차 년도) 유용 진단시약인 재조합항체 단백질을 개발하고 (1 단계 목표), 개발된 항체의 항원-항체

목차 Contents

  • 제1장 서 론...10
  • 제2장 실험방법...15
  • 제1절 실험재료...15
  • 제2절 실험방법...15
  • 2.1 인간혈장 지단백질 LDL, HDL의 분리...15
  • 2.2 아포지단백질(apo B-100, apo A-I)의 분리...17
  • 2.3 SDS-polyacrylamide 젤 전기영동...18
  • 2.4 10-mer 펩타이드의 합성...19
  • 2.5 10-mer 펩타이드의 운반 단백질과의 결합반응...19
  • 2.6 항혈청 항체의 제조...20
  • 2.7 이중 면역확산...20
  • 2.8 Immunoblotting...21
  • 2.9 경쟁적 효소면역분석법...22
  • 제3장 연구결과 및 고찰...23
  • 제1절 Lipoprotein 및 apolipoprotein의 분리...23
  • 1.1 LDL 및 apo B-100의 분리...23
  • 1.2 HDL 및 apo A-I의 분리...24
  • 제2절 Apo B 및 apo A-I에 대한 항혈청 항체의 제조...28
  • 2.1 면역주사...28
  • 2.2 이중 면역확산에 의한 분석...28
  • 2.3 Immunoblotting...30
  • 제3절 ELISA system의 개발...32
  • 3.1 경쟁적 효소면역분석법의 확립...32
  • 3.2 항체의 titer 결정...32
  • 3.3 민감도...34
  • 3.4 특이도...34
  • 3.5 정밀도...38
  • 제4절 국내 hypercholesterolaemia 환자 혈액에서 apo B 및 apo A-I 농도 측정...38
  • 제5절 혈장 아포지단백질 apo(a)에 대한 항체생산 연구...44
  • 5.1 10-mer 펩타이드의 합성...44
  • 5.2 10-mer 펩타이드에 대한 항체의 제조...44
  • 5.3 Calibration curve 및 유용성 검증...48
  • 제4장 결 론...51
  • 제5장 참고문헌...53
  • 제6장 위탁과제...58
  • Ⅰ. 위탁과제 1...58
  • Ⅱ. 위탁과제 2...67
  • Ⅲ. 위탁과제 3...86

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참고문헌 (25)

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