초록 ▼

1. 연구범위가. OECD GLP를 위한 표준작업지침서 작성 환경독성 분야의 GLP system 구축을 위한 SOP 작성을 하였다.나. 유해화학물질 관리를 위한 표준시험법 연구 미생물분해시험과 옥탄올/물 분배계수시험, 어류 급성독성시험에 관한 표준시험법을 확립하고자 하였다.다. 한국산 수서무척추동물을 이용한 표준생태독성시험법 개발에 관한 연구 한국산 담수무척추동물들의 대표종들을 선정하고 이들의 환경생태학적 특성을 밝힘과 동시에 사육실험을 통하여 사육조건을 규명, 표준사육기법을 개발하여 국내 실정에 알맞는 표준생

1. 연구범위가. OECD GLP를 위한 표준작업지침서 작성 환경독성 분야의 GLP system 구축을 위한 SOP 작성을 하였다.나. 유해화학물질 관리를 위한 표준시험법 연구 미생물분해시험과 옥탄올/물 분배계수시험, 어류 급성독성시험에 관한 표준시험법을 확립하고자 하였다.다. 한국산 수서무척추동물을 이용한 표준생태독성시험법 개발에 관한 연구 한국산 담수무척추동물들의 대표종들을 선정하고 이들의 환경생태학적 특성을 밝힘과 동시에 사육실험을 통하여 사육조건을 규명, 표준사육기법을 개발하여 국내 실정에 알맞는 표준생태독성시험법에 이용될 표준실험종을 제공하는 데 있다.라. 유전독성 평가기법 개발 고등진핵생물과 유사한 분열형 효모 Schizosaccharomyces pombe 세포로부터, 유전독성물질 중 하나인 자외선 조사에 의해 전사가 유도되는 자외선 유도유전자를 분리하고, 이들의 구조와 그 유전자 산물의 생체내 기능을 분석하며, 나아가 이들이 자외선 외의 다른 유전독성물질에 반응하는 특이성 등을 밝히고자 하였다.마. 환경유해물질 검색을 위한 새로운 안전성평가 기술확립 및 면역학적 관리기술 개발연구 현재 OECD guidelines for the testing of chemicals에 등재된 in vivo 소핵시험 연구로서 기존의 골수세포 및 Giemsa염색 사용할 때의 단점을 보완하고자 하였다 바. 유해화학물질 관리정책에 관한 연구 OECD 가맹주요국가(EU, 미국 및 일본)의 유해화학물질 관리정책과 관련하여, 우리나라에 도입, 적용하여, 개선하고, 보완해야 할 관리정책 및 제도에 대해 조사분석하였다.2. 연구내용가. OECD GLP를 위한 표준작업지침서 작성 환경독성 분야의 GLP system 구축을 위하여 시험법에 관한 SOP 15개와 기기작동에 관한 SOP 15개, GLP 조직 및 일반사항에 관한 SOP 20 개등 총 50개의 SOP를 작성하였다.나. 유해화학물질 관리를 위한 표준시험법 연구 미생물분해시험과 옥탄올/물 분배계수시험, 어류급성독성시험에 관한 표준시험법을 확립하고자, 이들 시험과 관련된 OECD guideline과 미국 EPA guideline, 기존의 문헌 등을 참고하여, 시험방법들 간의 장단점을 비교, 검토하였다. 미생물분해시험에 대한 1단계 실험이 진행되었고, 어류 급성독성시험 수행을 위한 실험대상어종의 선발, 대상어종에 대한 순화, 산란유도 등에 관한 기본적인 연구들을 수행하였다.다. 한국산 수서무척추동물을 이용한 표준생태독성시험법 개발에 관한 연구 서식처별, 수역별 환경생태학적 특성을 고려하여 남한 전역에서 조사정점들을 선정하여 물벼룩류와 요각류, 십각류를 중심으로 한 한국산 무척추동물에 대한 분류, 생태학적 조사를 실시하였으며, 계절 및 서식처 등의 생태학적 특성에 따른 분류군별 한국산 대표종들을 선정하였다.라. 유전독성 평가기법 개발 고등진핵생물과 유사한 분열형 효모 Schizosaccharomyces pombe 세포로부터, 유전독성물질 중 하나인 자외선 조사에 의해 전사가 유도되는 자외선 유도유전자를 분리하고, 이들의 구조와 그 유전자 산물의 생체내 기능을 분석하며, 나아가 이들이 자외선 외의 다른 유전독성물질에 반응하는 특이성 등을 밝히고자 하였다.마. 환경유해물질 검색을 위한 새로운 안전성평가 기술확립 및 면역학적 관리기술 개발연구 현재 OECD guidelines for the testing of chemicals에 등재된 in vivo 소핵시험 연구로서 기존의 골수세포 및 Giemsa염색 사용할 때의 단점을 보완하여 말초 망상혈액을 사용하고 acridine orange 형광염색을 이용한 supravital in vivo micronucleus assay의 정립 및 활용성을 연구하고 분자 독성학적 기법으로서 새로운 gene mutation과 chromosome damage를 동시에 탐지해낼수 있는 mouse Iymphoma thymidine kinase (TK) +/- gene assay법의 정립 및 활용성을 연구하였다. 또한 농약의 일종인 트리아진류를 현장에서 검출할 수 있는 킷트를 개발하고자 하여 6종의 트리아진 면역원을 합성했으며, 이를 면역주사하여 5종의 모노클론항체를 생산하는 하이브리도마 세포주를 얻었고, 폴리클론 항체는 토끼와 염소에서 얻었으며 immunoaffinity 정제한 후, 항체의 친화성과 특이성을 연구하여 스크리닝킷트에 적합한 항체를 선별하였다.마. 유해화학물질 관리정책에 관한 연구 OECD 가맹주요국가(EU, 미국 및 일본)의 유해화학물질 관리정책과 관련하여, 우리나라에 도입, 적용하여, 개선하고, 보완해야 할 관리정책 및 제도에 대해 조사분석하였는데, 연구항목은 다음과 같다. (1) 유해화학물질의 관련정보 보고체계 (2) 화학물질의 유해성 평가체계 및 평가기법 (3) 유해화학물질의 사고예방 및 대응과 피해저감대책 (4) 유해화학물질 관리법의 개선 및 보완

Abstract ▼

A. Establishment of GLP system in the environmental toxicological studies . SOPs were prepared for the establishment of GLP system in environmental toxicology.B. Study on the standard testing method for environmental toxicological studies. Standard test methods were studied for biodegradation, o

A. Establishment of GLP system in the environmental toxicological studies . SOPs were prepared for the establishment of GLP system in environmental toxicology.B. Study on the standard testing method for environmental toxicological studies. Standard test methods were studied for biodegradation, octanol/water partition coefficient and fish acute toxicity tests.C. A study on the standard test for the ecotoxicity using korean freshwater invertebrates. The representative species among Korean freshwater invertebrates will be suggested in the present study. Through examining the ecological characteristic features of the species such as the optimal ranges of various physico-chemical factors with grasping the condition and species characteristics of culture, the experimental species for the standard method of ecotoxicity assessment will be provided. In the first year study the systematic and ecological study on the freshwater cladocerans, copepods, and decapods was performed. Study sites including various freshwater habitats such as river, stream, reservoir, pond, ricefield, swamp, bog, pool, etc. were selected from the whole range of South Korea with the consideration of the distribution of invertebrate species. D. Development of method for genotoxicity testing of chemicals. From the fission yeast Schizosaccharomyces pombe, which is similar to higher eukaryotes, we have isolated UV(one of genotoxic agents)-inducible genes, investigated their gene structures and cellular functions, and characterized their specific responses to other genotoxic agents. E. A study on the new toxicological method establishment and immunological management for the environmental hazardous materials. Nevertheless of many toxicological assays, the genotoxicity and/or mutation study is great concerns among scientists, because it has been widely assumed that mutation represents at least one step in carcinogenesis. The evidence supporting this idea is that mutagens are carcinogens and, for at least some compounds, mutagenic potency is closely correlated with carcinogenic potency. So, in this study, we focused on newly advanced toxicity methods with progress in molecular toxicology. Among these methods, the acridine orange supravital staining (AOSS) in vivo micronucleus assay was newly introduced to detect the genotoxicity in vivo. This assay has many great points because peripheral blood reticulocytes used in this assay in stead of classical bone marow micronucleus assay as shown in Table 1. So this AOSS in vivo micronucleus assay will be very useful toxicity evaluation assay of chemicals in vivo. Also recently, mouse Iymphoma thymidine kinase (tk) +/- gene assay (MLA) introduced. This assay system will provide very reliable and good results in the view of point mutation of tk gene and chromosome damage as shown in Table 2. The results of this assay will cover the point mutation of Ames test and the chromosome damages in chromosome aberration assay with mammalian cells. And also, to harmonize the data analysis of MLA internationally, we set up the Mutant V2.34, a statistical soft ware program provided from Hazelton based on the UKEMS (United Kingdom Environmental Mutagen Socity) guideline. We also aimed to develop an on-site detection kit for the triazine pesticides. In order to prepare antibodies, six immunogens were synthesized using derivatized triazines. After immunization five hybridoma cell lines were established to produce high titered monoclonal antibodies. Also polyclonal antibodies were prepared from rabbits and goat. Both monoclonal and polyclonal antibodies were purified using immunoaffinity chromatograpy. Antibodies were characterized in terms of affinity and specificity to select proper antibodies for the screening kit.F. Study on the management system for hazardous chemicals Related to the management policies of toxic chemicals of the OECD major members(EU, USA, Japan, etc.), we selected and analyzed the following items which can be suitable to be introduced and applicated to our country: 1. Information Reporting System of Toxic Chemicals2. Hazard Assesment and Evaluation Methods of Toxic Chemicals3. Accidental Prevention, Response and Hazard Reduction Counterplan4. Improvement and Supplement of Toxic Chemicals Control Law

목차 Contents

• 제1장 서론...53
• 제2장 OECD GLP를 위한 표준작업지침서(SOP)작성...57
• 제1절 서론...57
• 제2절 작성된 표준작업지침서(SOP) 목록...58
• 1. SOP의 종류, 코드화 및 SOP 번호...59
• 2. 작성된 표준시험법(SOP) 목록...59
• 제3절 외국 GLP 기관 연수...62
• 제3장 유해화학물질 관리를 위한 표준시험법 연구...65
• 제1절 서론...65
• 제2절 미생물분해시험에 관한 표준시험법 연구...67
• 1. 연구배경...67
• 2. 연구의 범위...72
• 3. 재료 및 방법...73
• 4. 결과 및 고찰...79
• 제3절 옥탄올/물 분배계수시험에 관한 표준시험법 연구...107
• 1. 연구배경...107
• 2. 재료 및 방법...109
• 3. 결과 및 고찰...111
• 제4절 국내 자생종을 이용한 어류급성독성 시험법 개발...119
• 1. 재료 및 방법...119
• 2. 결과 및 고찰...121
• 3. 결론...146
• 참고문헌...148
• 부록 : 표준시험법(SOP) 표지...157
• 제 1 위탁과제 한국산 수서무척추동물을 이용한 표준생태독성시험법 개발에 관한 연구...209
• 제 2 위탁과제 유전독성 평가기법 개발...232
• 제 3 위탁과제 환경유해물질 검색을 위한 새로운 안전성평가 기술확립 및 면역학적 관리기술 개발연구...258
• 제 4 위탁과제 유해물질 관리정책에 관한 연구...374