초록 ▼

본 연구는 기존 비만치료에 사용되고 있는 처방과, 효능이 있으리라 예상되는 단미 약물들을 실험하여 그 효능을 검증하고 검증된 결과들을 토대로 새로운 처방을 구성함으로서 비만 치료 및 예방에 가장 효과적인 처방을 구성하고자 진행되었다. 이를 효과적으로 진행하기 위해 생화학적 검사 방법과 조직화학적 검색 방법으로 분류함

【연구방법】

<제1세부과제>

O 약물추출물 조제
O 비만유도(Harlan 94095,USA 투여) 및 검액(1일 1회 8주간) 경구투여
O 채혈과 혈청분리
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본 연구는 기존 비만치료에 사용되고 있는 처방과, 효능이 있으리라 예상되는 단미 약물들을 실험하여 그 효능을 검증하고 검증된 결과들을 토대로 새로운 처방을 구성함으로서 비만 치료 및 예방에 가장 효과적인 처방을 구성하고자 진행되었다. 이를 효과적으로 진행하기 위해 생화학적 검사 방법과 조직화학적 검색 방법으로 분류함

【연구방법】

<제1세부과제>

O 약물추출물 조제
O 비만유도(Harlan 94095,USA 투여) 및 검액(1일 1회 8주간) 경구투여
O 채혈과 혈청분리
(1) 각군의 실험동물을 검액투여 8주재에 에테르로 가볍게 마취, 심장천자로 혈액 채취 vaccum gel tube에 넣고 상온에서 10분간 방치한 다음3,500rpm에서 10분간 원심분리
(2) CHOD-PAP method(EAS. 1987)에 의한 Total cholesterol 함량 측정하였다.
(3) GPO-PAP method(Siedel, J., et al, 1993)에 의한 triglyceride 함량 측정
(4) ACS-ACOD method(金井泉 第1, 1983)에 의한 free fatty acid 함량 측정
(5) Sulfo-phospho-vanillin method(Frings, et al, 1970)에 의한 total lipid 함량 측정
(6) 효소법(金井 正光 등, 1993)에 의한 Phospholipid 함량 측정
(7) CHOD-PAP method(Burstein M., et al, 1970)에 의한 HDL&LDL-cholesterol 함량 측정
(8) Hexokinase method(Schmidt FH, 1961)에 의한 Glucose 함량 측정(9) Radioimmunoassay(Bates HM, 1983)에 의한 Insulin 함량 측정

<제2세부과제>

O 조직채취 및 표본제작
(1) 부고호　 지방세포의 염색 및 측정 Bouin's solution에 8시간 고정한 조직절편을 만들어 2% aniline blue stain(Bertrand, H. A., et al., 1980), 염색조직을 광학현미경과 컴퓨터영상분석기(Leica 500MC)를 이용 세포면적 측정
(2) 간조직내 지방의 염색 및 측정; 동결조직절편기(Jung frigocut 2800N, German)를 이용, Oil-red-O 염색(Bancroft, JD and Stevens, A,1990), 광학현미경과 컴퓨터 영상분석기(Leica 500MC)를 이용하여 축적된 지방의 면적비율을 측정
(3) 췌장섬의 B세포 염색(Raymond R. tubbs, et al, 1986); 한 절편은 hematoxylin-eosin염색을 하여 Langerhans島의 유무를 관찰하였으며, 나머지 切片은 avidin-biotinylated peroxidase complex(ABC)法으로 Langerhans島 B세포내 insulin과립을 면역 반응시킴
O 항체 및 기질 : Peroxidase blocking에 3% hydrogen peroxide(Signet 1130)를, protein blocking에 normal swine serum(Signet USA,2254)를 사용1차 항체로 Ig fraction of ginea pig antis wine to insulin(DACO A0564, USA)을, 2차 항체는Ig fraction of biotinylated antiserum to mouse and rabbit Ig(Signet 2254, USA)을 사용, peroxidase-antiperoxidase는 ultrastreptavidin peroxidase labelled in buffer(HRP Signet 2254)를 사용, substrate용액은 diaminobenzidine(DAB) chromogen kit(Signet2394)을 사용

Abstract ▼

In present study, to confirm and to make new effective drug formula for treatment of obesity, the effect of well known therapeutics for treatment of obesity and/or leading formula were monitored. For the better processing, divided into two categories, biochemical and histochemical methods

【Me

In present study, to confirm and to make new effective drug formula for treatment of obesity, the effect of well known therapeutics for treatment of obesity and/or leading formula were monitored. For the better processing, divided into two categories, biochemical and histochemical methods

【Methods】