피부전용 제제의 기능성 및 안전성 평가에 관한 연구 - 주름방지용 화장품의 기능성 및 안전성 평가에 관한 연구 Studies on the Evaluation of Efficacy & Safety of Skin Care Products - Studies on the Evaluation of Efficacy & Safety of Anti-wrinkle Cosmetics원문보기
주름개선용 화장품의 기능성 및 안전성의 평가방법 확립의 기초자료를 마련하고자 3개의 세부과제로 나누어 기능성 및 안전성 평가법에 대한 연구를 하였다
.□ 주름방지용 화장품의 생체효능 평가법 개발 연구 본 연구는 주름 개선용 화장품의 효과를 평가하는 여러 가지 방법을 비교함으로서 재현성 높고 객관적인 평가법을 개발하는 연구를 수행하였다. 30세에서 64세까지의 건강한 한국여성 74명을 tretinoin군 retinol군 그리고 placebo군의 3군으로 나누어 이중 맹검법으로 본 연구를 수행하였다. 각 군은 치
주름개선용 화장품의 기능성 및 안전성의 평가방법 확립의 기초자료를 마련하고자 3개의 세부과제로 나누어 기능성 및 안전성 평가법에 대한 연구를 하였다
.□ 주름방지용 화장품의 생체효능 평가법 개발 연구 본 연구는 주름 개선용 화장품의 효과를 평가하는 여러 가지 방법을 비교함으로서 재현성 높고 객관적인 평가법을 개발하는 연구를 수행하였다. 30세에서 64세까지의 건강한 한국여성 74명을 tretinoin군 retinol군 그리고 placebo군의 3군으로 나누어 이중 맹검법으로 본 연구를 수행하였다. 각 군은 치료 전, 6주 후 그리고 16주 후 안면주름 특히 눈가의 주름에 대한 효과를 육안 평가법, 광학 측면 계측기, 레이저 측면 계측기 그리고 입체시 평면계측기를 이용하여 평가하였다. 육안평가법은 과거부터 사용되는 유용한 방법이나 부정확한 결과를 얻었다. 입체시 평면 계측기, 레이저 측면 계측기 그리고 광학측면 계측기는 비교적 객관적이고 재현성 높은 효과측정이 가능했으며 이중 입체시 평면계측기가 가장 신뢰성 높은 주름개선용 화장품의 효과 계측법이었다.
□ 주름방지용 화장품의 기능성 평가법 개발 연구 주름개선용 화장품의 in vitro 평가법 개발을 하고자 human normal fibroblast를 이용하여 콜라겐양과 콜라게나아제양을 측정하였다. primary cell-line 5×10⁴cell을 48 well-plate에 serum 첨가 DMEM 배지로 24시간 배양한 다음, serum-free DMEM 배지로 바꾸고 실험물질을 첨가한 다음 24∼48 배양하여 얻은 배양액을 가지고 ELISA 방법으로 콜라겐양과 콜라게나아제양을 측정하였다. 사용한 실험물질은 retinol, retinoic acid, vitamin C, ginseng extract였고, 양성대조군으로서 TGF-β를 사용하였다. 실험결과 원료들은 사용한 농도범위에서 콜라겐 생성을 촉진시키고, 콜라게나아제 발현을 억제하는 결과를 얻을 수 있어 본 실험방법을 주름개선용화장품의 in vitro 평가법에 활용할 수 있을 것으로 판단되었다.
□ 주름방지용 화장품의 안전성 평가법 개발 연구 주름개선용 화장품에 대한 안전성 평가 방법을 제시하기 위하여 in vivo 실험으로 피부자극 시험과 안점막 자극 시험을 실시하였고, in vitro 실험으로 HaCaT cell을 이용한 MTT assay 시험을 실시한 후, 주름개선용 화장품 원료의 피부 및 안점막 자극과 in vitro MTT assay와의 상관관계를 규명하여 대체시험방법의 기초자료를 제공하고자 하였다. 주름개선용 화장품 원료인 retinol, retinoic acid, glycolic acid 및 ginseng extract에 대하여 피부자극시험을 실시한 결과, 피부자극시험은 in vitro 대체시험법으로 개발이 가능하며 HaCaT cell을 이용한 MTT 시험방법이 가능성이 높다고 사료되므로 앞으로도 계속하여 validation화 할 수 있는 연구가 필요하다. 안점막 자극시험은 in vitro 대체시험으로 HaCaT cell보다는 안자극에 대해 민감성을 나타내 주는 세포를 이용한 연구가 시행되어야 한다고 생각된다.
Abstract▼
The present study was undertaken to prepare the basic data for evaluation methods of efficacy and safety of anti-wrinkle cosmetics. For this study we divided 3 subordinated subjects. □ Studies on the evaluation of human efficacy of anti-wrinkle cosmetics We tried to compared the various eva
The present study was undertaken to prepare the basic data for evaluation methods of efficacy and safety of anti-wrinkle cosmetics. For this study we divided 3 subordinated subjects. □ Studies on the evaluation of human efficacy of anti-wrinkle cosmetics We tried to compared the various evaluation method of anti-wrinkle cosmetics efficacy for developing the reproducible and objective technique. Goal of our study is standardized the evaluation technique of anti-wrinkle cosmetics efficacy. Sevenity four healthy Korean women ranging in age from 30 to 64 years participated in this study. Subject were randomly assigned to one of three treatment groups in tretinoin, retinol and placebo group. Facial wrinkle especially craw′s foot were evaluated by visual grading, optical profilometer, laser profilometer and stereoimage optical topometer in base line, after 6 week and after 16 weeks. Although several clinical visual grading systems are useful method for assessing facial wrinkle, but it is inaccurate. To objective and reproducible evaluation for wrinkle, more precised method such as stereoimage topometer, laser profilometer and optical profilometer should be use. Stereoimage topometer is most reliable method for evaluating the effect the anti-wrinkle cosmetics.
□ Studies on the evaluation of in vitro efficacy of anti-wrinkle cosmetics We studied the in vitro test method of anti-wrinkle cosmetics in human normal fibroblast using collagen assay and collagenase assay. Cells were subcultivated in 48 well-plate in DMEM media with 10% fetal bovine serum during 24 hours. To determine the effect of test materials on collagen and collagenase expression, the media was removed, the cell layers were washed, and the cultures were maintained for 24-48 hours in serum free DMEM medium, and determined collagen and collagenase quantity ELISA method. The test materials were retinol, retinoic acid, ascorbic acid and ginseng extract, and TGF-β for positive control. The materials were increased collagen quantity and inhibited collagenase in the cells. As a result, These method may be useful for evaluation of anti-wrinkle cosmetics.
□ Studies on the evaluation of safety of anti-wrinkle cosmetics We studied the skin irritation test and eye irritation test of anti-wrinkle cosmetic substances, retinol, retinoic acid, glycolic acid and ginseng extract. We also studied cytotoxicity in HaCaT cell using MTT assay, human keratinocytes, to compare these in vivo test to in vitro alternative test. The cytotoxicity of tested compounds in HaCaT cells correlated to the rabbit skin irritating effect. Whereas, it did not correlated to the rabbit eye irritating effect. These results show that skin irritation effect and eye irritation effect of anti-wrinkle cosmetic substances may not correlated, and the cytotoxicity test in HaCaT cells using MTT assay may be useful an alternative test system of skin irritation test.
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