초록 ▼

본 연구의 1단계에서는 신경계 형성에 핵심적으로 작용하는 bHLH 전사인자로 neuroD, neurogeninl와 그 억제자로 Id 1, 2, 3를 분리한 후 분자생물학적, 세포생물학적 기법을 사용하여 분리된 이들 전사인자의 기능을 규명하고 기존의 일부 알려진 bHLH 전사인자와의 상호관계를 규명하였다. 이를 위하여 본 연구는 크게 1) 세포 및 조직 배양을 대상으로 한 접근방식과, 2) 발생중인 생쥐태아를 모델로 한 생체실험으로 구성되어 있다. 전자의 경우 분리된 bHLH 구조를 갖는 인자가 신경세포의 특성을 나타내는 다른 유전자

본 연구의 1단계에서는 신경계 형성에 핵심적으로 작용하는 bHLH 전사인자로 neuroD, neurogeninl와 그 억제자로 Id 1, 2, 3를 분리한 후 분자생물학적, 세포생물학적 기법을 사용하여 분리된 이들 전사인자의 기능을 규명하고 기존의 일부 알려진 bHLH 전사인자와의 상호관계를 규명하였다. 이를 위하여 본 연구는 크게 1) 세포 및 조직 배양을 대상으로 한 접근방식과, 2) 발생중인 생쥐태아를 모델로 한 생체실험으로 구성되어 있다. 전자의 경우 분리된 bHLH 구조를 갖는 인자가 신경세포의 특성을 나타내는 다른 유전자의 발현을 조절하는 전사인자로 작용하는지를 분자생물학적 기법을 사용하여 밝혔다. 아울러 bHLH 구조적 특성을 바탕으로 하여 기존의 neuroD, neurogeninl의 기능을 차단시킬 수 있는 여러 가지 돌연변이를 제작하며, 이들의 생체 내에서 이용가능성을 시험하였다. 또 억제자인 Id 1, 2, 3가 신경세포의 분화과정에서의 역할을 조사하였다 (아주대, 서해영), 이렇게 전자에서 분석된 돌연변이, Id단 백질을 바이러스라는 매체에 실어서 태아로 도입시키는 방법을 개발하였다 (생명공학연구소, 김연수). 바이러스를 이용한 태아의 bHLH 유전자 조작을 통해 본 연구에서 분리한 bHLH 전사인자와 다른 bHLH 전사인자의 상호조절 여부를 조사하였다.

Abstract ▼

Basic helix-loop-helix (bHLH) transcription factors play critical roles in development and differentiation of the nervous system. To elucidate the genetic Program for neuronal differentiation, we have isolated class A factors (neuroD/BETA2 and neurogeninl and 3) and HLH factors (Id 1, 2, 3) and dete

Basic helix-loop-helix (bHLH) transcription factors play critical roles in development and differentiation of the nervous system. To elucidate the genetic Program for neuronal differentiation, we have isolated class A factors (neuroD/BETA2 and neurogeninl and 3) and HLH factors (Id 1, 2, 3) and determined their roles in determination of neuronal cell fate and differentiation of neurons using in vitro and in vivo approaches.
1) Overexpression of NeuroD and neurogeninl induces neurite outgrowth in Fllneuroblastoma cells. Expression of a dominant negative form of NeuroD represses neurite outgrowth, suggesting the role of NeuroD like factors in neuronal differentiation.
2) Neurogeninl is sufficient in the absence of retinoic acid to induce neuronal differentiation of P19 embryonic carcinoma cells. Without retinoic acid, overexpression of neurogenin induces enhances of a neural stem cell marker, nestin. Persistent expression of neurogenin 1 enhances neuronal differentiation, suggesting that neurogenin 1 may induce cell face determination of neural stem cell.
3) Id proteins function as negative regulators of neurogenic bHLH transcription factors. I Over expression of Id inhibits neurite outgrowth of F11 cells. Delivery of Id genes into the developing mouse embryos enhances nestin gene expression. In chick embryos, Id proteins induce cell proliferation in the developing brain vesicles, suggesting that Id proteins may be essential 7o maintain the neural stem cell properties.

목차 Contents

• 제 1 장 서론...8
• 1. 연구의 필요성...8
• 2. 최종목표...9
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...10
• 1. 국외의 경우...10
• 2. 국내의 경우...12
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...14
• 1. 연차별 연구목표 및 연구내용...14
• 2. 추진 체계...15
• 3. 추진기술...16
• 4. 연구결과...19
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도...33
• 1. 연구개발 달성도...33
• 2. 연구결과...34
• 3. 연구개발결과의 파급효과...35
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...36
• 부록...37