초록 ▼

▶항생제 마커 free 형질전환체계의 확립과 NWB-PMI벡터의 구축
- 배추와 수박의 mannose를 이용한 형질전환체 선발조건의 확립 (배추: mannose 6g/L, 수박: 3g/L)
- NWB-PMI벡터에 내병성(JMT, GO, Defensine), 내재해성(HSP101) 및 고기능성(GLOase)유전자의 cloning
▶항생제 마커 free 형질전환체계를 이용한 배추의 형질전환
- JMT 유전자의 배추 형질전환: 형질전환체 60개체 획득하여 T1종자의 채종 완료
- GO유전자의 배추형질전환: 형질

▶항생제 마커 free 형질전환체계의 확립과 NWB-PMI벡터의 구축
- 배추와 수박의 mannose를 이용한 형질전환체 선발조건의 확립 (배추: mannose 6g/L, 수박: 3g/L)
- NWB-PMI벡터에 내병성(JMT, GO, Defensine), 내재해성(HSP101) 및 고기능성(GLOase)유전자의 cloning
▶항생제 마커 free 형질전환체계를 이용한 배추의 형질전환
- JMT 유전자의 배추 형질전환: 형질전환체 60개체 획득하여 T1종자의 채종 완료
- GO유전자의 배추형질전환: 형질전환체 60개체 확보 T1종자의 채종 완료
- Defensine유전자의 배추형질전환: 형질전환체 20개체 확보 T1종자의 채종 완료
- HSP101 유전자의 배추형질전환: 형질전환체 60개체 획득하여 T1종자 채종 완료
- GLOase유전자의 배추형질전환: 형질전환체 60개체 획득하여 T1종자 채종 완료
▶상추의 형질전환
- GLOase유전자의 상추형질전환: 적축면, 청치마 상추 각각 100개체 형질전환체 획득하여 T1 종자의 채종 완료
- JMT유전자의 상추형질전환: 적축면상추 100개체 형질전환체 획득하여 T1종자 채종 완료
▶형질전환배추와 상추의 검정
- 상추의 비타민C 함량 검정: GLOase형질전환상추의 비타민C 함량 검정 결과 3-4배 비타민C 함량이 증가한 상추 선발하여 T2종자 채종
- 상추의 내병성 검정: JMT형질전환상추의 연부병, 균핵병 접종시험 결과 내병성계통 선발
- 배추의 내병성 검정: JMT형질전환배추의 흑반병 접종시험 결과 5일정도의 수평저항성을 나타냄
▶양배추의 항생제 마커 free체계를 통한 형질전환체계 확립
- JMT유전자의 양배추형질전환을 통하여 50개체의 형질전환체 획득 (T1 종자 채종 중)
▶오이의 형질전환체계 확립
- 오이의 계통에 Bcl2유전자를 형질전환하여 현재 10개체의 형질전환체를 확인하고 일부 채종 완료
▶Cauliflower의 항생제 마커 free체계를 통한 형질전환체계 확립
- 내서성 관련 유전자를 형질전환하여 현재 형질전환체 3개체 확인

Abstract ▼

Establishment of transformation system for Korean cabbage and watermelon, which is experimentally difficult to be transformed. Development of the highly functional Korean cabbage and watermelon that resists to disease and unfavorably environmental conditions by using the established transformation s

Establishment of transformation system for Korean cabbage and watermelon, which is experimentally difficult to be transformed. Development of the highly functional Korean cabbage and watermelon that resists to disease and unfavorably environmental conditions by using the established transformation system in which useful genes of interest could be introdeced. Cultivation of the transformed Korean cabbage and watermelon having new traits, and utilization of the Korean cabbage and watermelon as semen. Commercialization of GM crops from a mass transformation system The gene of interest for transfomation was cloned into a binary vector. The gene encoding resistance and unfavorable conditions was transformed into a variety of inbred lines of Korean cabbage and watermelon from an intradepartmental team - not into traditional cultivar under optimal conditions. The potential transgenic crops were subjected to PCR and Southern blot to confirm the transformation. Introduction of a single copy of the gene into chromosomal DNA was confirmed by Southern blot analysis. The selected transformants were grown to seed production in an isolated green house. The harvested seeds were planted to grow. The first Seedlings are reexamined by a biological test according to the phenotype of the gene of interest, followed by a PCR test. The above procedure was repeated until T4 generation, to obtain the final inbred line. The finally selected transgenic plant was not only used as semen, but also used for obtaining F1 hybrid having good traits with cross breeding. Safety test of the transgenic crop was performed prior to quality test and commercialization for the cultivar. Once the product is determined to commercialize, F1 generation of semen will be massively produced, and, with the network of the company and advertisement, goes into the market after being patented and reported. For the useful genes of interets holding by domestic and international institutes, we contracted with those institutes to commercialize transgenic crops, which would activate the GMO world market. This would enable us to be competitive in the world. Establishment of transformation system for Korean cabbage and watermelon, enabled us to develop a new cultivar by introduction of a useful gene of interest, to be competitive in the world, and to play a role improvement of agricultural biotechnology. The development of diesease-resistant transgenic crop resulted in the reduction of agricultural chemicals, and, finally, minimized the contamination of cultivation area resulting from the abuse of the chemicals. Development of the highly functional crop contributed the increased incomes of farmers and rural development. With patent for transgenic cabbage and watermelon being acceptable, the official right was given. In exploitation of a new cultivar, the recombinant DNA technology would overcome the limitation of traditional breeding method.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 보고서 초록...3
• 요약문...4
• SUMMARY...8
• CONTENTS...9
• 목차...11
• 제1장 연구개발과제의 개요...13
• 제1절 연구개발의 목적과 필요성...13
• 제2절 연구개발의 내용과 범위...14
• 제2장 국내외 기술개발 개요...16
• 제1절 배추형질전환 기술...16
• 제2절 수박형질전환...17
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...18
• 제1절 유전자원의 확보...18
• 제2절 항생제 free system을 이용한 배추의 형질전환체계 확립...18
• 1. 목적...18
• 2. 새로운 벡터 구축...18
• 3. Sucrose-Mannose system을 이용한 선발 조건 규명...19
• 제3절 Mannose를 이용한 배추의 형질전환...21
• 1. GLOase유전자의 배추형질전환...21
• 2. HSP101유전자의 배추형질전환...23
• 3. GO 유전자의 배추형질전환...23
• 4. JMT 유전자의 배추형질전환...24
• 4-1. JMT 형질전환배추의 흑반병 접종시험 및 선발...25
• 5. Defensine 유전자의 배추형질전환...26
• 제4절 수박의 형질전환...26
• 1. PDI 유전자의 형질전환...26
• 제5절 상추의 형질전환...27
• 1. GLOase 유전자의 형질전환...27
• 2. GLOase유전자가 전이된 형질전환상추의 비타민C 함량 검정...29
• 3. JMT 유전자의 상추형질전환...29
• 4. JMT 형질전환체의 anthocyin 발현 검정...30
• 5. JMT 형질전환상추의 내병성 검정...31
• 제6절 오이의 형질전환체계 개발...32
• 1. Apoptosis 관련 유전자의 오이 형질전환...32
• 제7절 Mannose를 선발마커로 이용한 양배추의 형질전환체계 개발...33
• 제8절 Mannose를 선발마커로 이용한 cauliflower의 형질전환체제 개발...36
• 1. HSP101유전자의 cauliflower형질전환...36
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...38
• 제1절 연구개발목표의 달성도...38
• 제2절 기술개발에의 기여도...39
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...40
• 1. 추가연구의 필요성...40
• 2. 타연구에의 응용...40
• 3. 기업화 추진방안...40
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...40
• 제7장 참고문헌...41
• 부록 : 특정연구개발사업 연구결과 활용계획서...44