초록 ▼

1) 한국산 겨우살이 추출물 전기 유산균 발효를 위한 최적조건 확립과 이들의 생리활성 조사에 관한 연구
○ 발효를 위한 최적조건을 확립함
○ Adjuvant개발을 위한 기반 확립
- 항체역가상승효과를 통한 체액성 효과와 DTH와 같은 세포성 면역증진 효과를 확인함
- 균주의 종류에 따라 활성의 차이를 나타냄
- 겨우살이 추출이 갖는 세포독성이 발효 후에 다소 감소하는 경향을 나타내었고 렉틴의 함량도 다소 감소하는 경향을 나타내었음
- cytokine유도능 확인 : IL-1, IL-6, $TN

1) 한국산 겨우살이 추출물 전기 유산균 발효를 위한 최적조건 확립과 이들의 생리활성 조사에 관한 연구
○ 발효를 위한 최적조건을 확립함
○ Adjuvant개발을 위한 기반 확립
- 항체역가상승효과를 통한 체액성 효과와 DTH와 같은 세포성 면역증진 효과를 확인함
- 균주의 종류에 따라 활성의 차이를 나타냄
- 겨우살이 추출이 갖는 세포독성이 발효 후에 다소 감소하는 경향을 나타내었고 렉틴의 함량도 다소 감소하는 경향을 나타내었음
- cytokine유도능 확인 : IL-1, IL-6, $TNF-{\alpha}$
○ 점막면역 자극 효과에 의한 경구용 adjuvant개발을 위한 연구 : 유산균으로 발효시킨 것을 adjuvant로 사용하고 OVA을 항원으로 하며 혈청내 IgG항체 역가와 fecal내 IgA항체 역가를 조사하여 효능이 있음을 입증함
○ 항암제 개발을 위한 연구
- XTT법에 의한 in-vitro cytotoxicity조사 : 균주에 따라 차이를 나타냄
- Apoptosis유도능 조사
- 복수암과 고형암을 모델로 한 in-vivo 항암효과 조사
- 기존 항암제와 병용투여시 상승효과를 나타냄 : 새로운 항암제 개발 가능성 제시

Abstract ▼

1) Studies on the optimization of conditions for the fermentation of Korean mistletoe extract with lactobacillus (F-KM) and their biological activities
○ Optimal conditions for the fermentation were established
○ Development of adjuvant for the production of antibody and vaccine
- F-KM show

1) Studies on the optimization of conditions for the fermentation of Korean mistletoe extract with lactobacillus (F-KM) and their biological activities
○ Optimal conditions for the fermentation were established
○ Development of adjuvant for the production of antibody and vaccine
- F-KM showed both humoral and cellular immuno activities
- activities were different from according to the kinds of lactobacillus
- toxicities were reduced by ferentation procedure and amount of lectin were also reduced without changing biological activities significantly
- various kinds of cytokines such as IL-1, IL-6 and TNF-$\alpha$ were induced
○ Development of adjuvant for oral vaccine based on mucosal immunostimulating activity of F-KM : when the titers of IgG antibody in serum and IgA in fecal were compared with cholera toxin(CT), F-KM was more effective than CT.
○ Development of antitumor drugs
- in-vitro cytotoxicities to various tumor- cell lines were measured by XRR method : type of lactobacillus affected them
- they induced the apoptosis
- in-vivo antitumor activitied in both solid and ascitic tumors were investigated
- when F-KM was treated with known antitumor drugs such as adriamycin and ascenic compound, the effect were enhanced synergistically

목차 Contents

• 표지 ...1
• 제출문 ...2
• 목차 ...3
• 표목차 ...5
• 그림목차 ...5
• 요약문 ...10
• SUMMARY ...14
• 연차별 연구 결과 및 평가(한동대) ...17
• 연구성과 ...20
• [주관 연구 대학 : 한동대학교]...23
• 1. Adjuvant 개발을 위한 기반확립...23
• 1-1. 최적 발효조건 확립...23
• 1-2. 시료의 in vivo독성조사...26
• 1-3. 항체 역가 상승효과...27
• 1-4. 기존제품과의 비교...30
• 1-5. 다양한 항원에 대한 항체 생산 및 적정 조성 결정...31
• 1-6. Cytokine 유도능 조사...33
• 2. 경구 백신용 adjuvant개발...36
• 2-1. 경구 독성 테스트...36
• 2-2. 경구 적정 농도 및 조성 결정...37
• 2-3. 경구용 adjuvant 개발...41
• 2-4. 경비 adjuvant 적정 농도 및 조성 결정...42
• 2-5. 겨우살이 추출물(KML-C)을 경비 투여시의 비장 세포의 분화능...44
• 2-6. 겨우살이 추출물(KML-C)을 경비 투여시의 비장 세포의 cytokine 발현능...46
• 3. 항암제개발...47
• 3-1. in vitro 세포독성효과...47
• 3-2. Apoptosis 유도능 조사...48
• 3-3. in vivo에서의 종양성장 억제...51
• 3-4. 병용투여에 의한 종양성장 억제 효과...54
• 3-5. 종양 전이 억제 효과...55
• 4. 겨우살이의 렉틴 A chain의 독성을 이용한 Immunotoxin의 개발...58
• 4-1. 렉틴 A chain 유전자의 증폭 및 cloning...58
• 4-2. E.coli에서의 recombinant immunotoxin의 발현...61
• 5. 면역증가 (lectin)유전자를 이용한 기능성 효모의 육종...62
• 5-1. 연구개발의 필요성...62
• 5-2. 연구 내용...62
• 1) 사용균주 및 배지...62
• 2) 유전자 재조합 plasmid의 구축 및 염기서열 분석...62
• 5-3. 단백질 수준에서의 Lectin A1 및 B1유전자 산물의 확인...66
• 5-4. 유전자 수준에서의 Lectin A1 및 B1유전자 산물의 확인...66
• 5-5. 효모를 이용한 면역강화 고기능성 식품 개발...68
• 1) 겨우살이 최적농도 결정...68
• 2) YKMs-110의 lectin 변화...68
• 3) YKMs-110의 in vivo독성...70
• 4) 효모로 발효시킨 겨우살이(YKMs-110)의 세포독성 효과...73
• 5) YKMs-110의 경구 면역 증진 효과...74
• 6. 유전자 재조합에 의한 lectin 생산...78
• 6-1. Recombinant lectin protein을 가장 많이 발현시키는 bacterial host selection...78
• 6-2. Recombinant lectin의 발현 및 분리 정제...78
• 6-3. Recombinant lectin A1 protein을 정제...80
• 7. 겨우살이 추출물을 첨가한 겨우살이 빵의 항 당뇨 효과...81
• 7-1. 겨우살이 빵 사료(B-KM diet) 제조 및 당뇨 예방 효과...81
• 7-2. B-KM diet의 당뇨 치료 효과...83
• 8. 겨우살이의 분포도 조사...87
• [공동 연구 대학 : 군산대학교]...89
• 1. 양어용 사료 첨가제 개발...89
• 1-1. 장어 Phagocyte의 respiratory burst 활성화 검색...89
• 1-2. 장어 혈청 내의 Iysozyme 활성 검색...90
• 1-3. 장어 대식세포의 탐식능 검색...91
• 1-4. 병원균에 대한 겨우살이의 면역증감효과 검색...92
• [공동 연구 대학 : 건양대학교]...94
• 1-1. 한국산 겨우살이 함유 산양 발효유(F-GM-KM)에 의한 면역학적 기능 향상과 기타 생리활성에 관한 연구...94
• 1-2. 한국산 겨우살이 추출물의 항당뇨 활성 해석과 임상시험에서의 유효성 확인...95
• 1) 당뇨마우스에서의 항당뇨 활성 해석...95
• 2) 당뇨마우스에서의 항당뇨 활성 해석...100
• 1-3. 한국산 겨우살이 추출물의 항고혈압 활성의 해석과 활성분획의 동정...102
• 참고문헌 ...104