초록 ▼

본 연구과제는 닭을 이용한 효율적인 모델시스템의 개발을 위해 줄기세포(stem cell)인 닭의 정원세포를 이용 연구를 진행하였다. 닭의 주령에 따른 정소 내 정원세포의 효율적인 분리 방법과 정원세포의 배양조건 및 효율적인 유전자 전이조건 확립 그리고 정원세포의 이식에 의한 생식선 카이메라의 생산을 목표로 연구를 진행하였다본 연구과제를 통하여 닭의 주령에 따른 정소 내 정원세포의 효율적인 분리방법과 정원세포의 체외 배양 및 장기배양 조건을 확립하였다. 또한 체외배양 된 닭 정원세포의 특성과 세포주 확립 및 다능성을 확인하였다. 효율

본 연구과제는 닭을 이용한 효율적인 모델시스템의 개발을 위해 줄기세포(stem cell)인 닭의 정원세포를 이용 연구를 진행하였다. 닭의 주령에 따른 정소 내 정원세포의 효율적인 분리 방법과 정원세포의 배양조건 및 효율적인 유전자 전이조건 확립 그리고 정원세포의 이식에 의한 생식선 카이메라의 생산을 목표로 연구를 진행하였다본 연구과제를 통하여 닭의 주령에 따른 정소 내 정원세포의 효율적인 분리방법과 정원세포의 체외 배양 및 장기배양 조건을 확립하였다. 또한 체외배양 된 닭 정원세포의 특성과 세포주 확립 및 다능성을 확인하였다. 효율적인 모델시스템의 개발을 위해 정원세포의 이식을 통한 생식선 카이메라의 생산을 확인하였고 효율적인 유전자 전이 조건의 확립을 통해 유전자 전이 개체의 생산을 진행중에 있다.본 연구에서 확립된 정원세포주는 줄기세포(stem cell)로서 체외 배양을 통한 성세포의 분화 및 유전자 조작에 의한 형질전환 개체 생산의 새로운 도구로서의 활용이 가능하며 기존의 방법과 차별되는 고 효율의 기술개발이 가능함을 제시하였다. 이렇게 개발된 형질전환 시스템은 질환 모델 시스템으로서 각종 질병의 치료 연구에 응용될 수 있을 것이며, 해당 질환의 치료를 위한 유용 단백질 대량 생산의 바이오리엑터ㅓ로서 그 역할을 담당할 수 있을 것이다.

Abstract ▼

Purposes
Purposes of this project are as follows; 1) efficient isolation and culture of spermatogonial cells according to age, 2) establishment of gene transfer system into chicken spermatogonial stem cell and 3) production of germline chimeric chicken by transplantation of transfected spermatogo

Purposes
Purposes of this project are as follows; 1) efficient isolation and culture of spermatogonial cells according to age, 2) establishment of gene transfer system into chicken spermatogonial stem cell and 3) production of germline chimeric chicken by transplantation of transfected spermatogonial stem cell
Contents
Spermatogonial cells were recently focused on fundamental research for germ cell differentiation in vitro as stem cells. It able to produce of transgenic animals by genetic modification. However, in chickens as well as mammals, it is not yet reported for long-term culture and gene transfer on spermatogonial cells. This study consist of characterization of chicken spermatogonial cells, optimization the isolation and separation conditions and establishment of culture condition of chicken spermatogonial stem cell. Consequently, germline chimeric birds will be produced by transplantation of spermatogonial stem cells and transfected spermatogonial stem cell.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...2
• 보고서 초록...3
• 요약문...4
• SUMMARY...9
• CONTENTS...11
• 목차...13
• 제1장 연구개발과제의 개요...15
• 1. 기술적 측면에서의 필요성...15
• 2. 경제？산업적 측면에서의 필요성...15
• 3. 사회？문화적 측면에서의 필요성...16
• 제2장 국내외 기술 개발 현황...17
• 1. 지금까지의 연구 개발 동향 및 실적...17
• 2. 현 기술 상태의 취약성...21
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...22
• 제1절 닭 주령에 따른 정원세포 특성의 구명...22
• 1. 닭 주령에 따른 정소 내 정원세포의 분화 양상 구명...22
• 2. 주령에 따른 분화 양상 검증...27
• 3. 닭 정원세포의 면역조직화학적 특성 분석...27
• 4. 닭 정원세포 특이적 발현 유전자 분석...28
• 제2절 닭 정원세포의 체외 배양 조건의 확립...30
• 1. 정소 세포 분리방법 비교...30
• 2. 닭 정원세포 단기 배양 조건의 확립...31
• 제3절 닭 정원세포의 닭 정원세포 장기 배양 조건의 확립...34
• 1. 닭 정원세포 장기 배양 조건의 확립...34
• 2. 닭 정원세포의 장기 배양...40
• 제4절 체외배양 된 닭 정원세포의 특성 구명...42
• 1. 체외배양 된 닭 정원세포의 특성 구명...42
• 제5절 효율적 생식선 카이메라 생산 조건의 확립...47
• 1. 정원세포 이식을 통한 생식선 카이메라 생산...47
• 2. 수용체 정소 불임화 조건의 확립...49
• 제6절 닭 정원세포내로의 유전자 전이 및 정원줄기세포 발현 벡터 제작...52
• 1. 정원세포 내로의 유전자 전이 기법 확립...52
• 2. 대량 발현 벡터의 제작 및 유전자 전이 정원줄기세포의 생산...55
• 3. 유전자 전이된 정원줄기세포를 이용한 카이메라의 생산...56
• 제7절 실험축 사육을 위한 시설 구축...58
• 1. 자동화 계사 케이지 시스템...58
• 2. 분뇨처리 시스템...58
• 3. 검정 교배용 계사 시스템...59
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...60
• 제5장 연구개발결과의 활용 계획...65
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외 과학 기술 정보...67
• 제7장 참고 문헌...72